目的:結(jié)直腸癌是人類最主要的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率和死亡率呈上升趨勢。肝臟是結(jié)直腸癌出現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移最常見的靶器官,結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移也是影響患者預(yù)后最主要的因素。對于術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移和不可切除的結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者,以化療為主的綜合治療是最常見的治療手段。隨著腫瘤分子靶向研究的不斷深入,靶向藥物與化療藥物聯(lián)合治療的療效越來越好,但化療耐藥仍然是影響腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移最關(guān)鍵的因素。腫瘤微環(huán)境在化療耐藥方面發(fā)揮重要的作用,既往研究發(fā)現(xiàn)腫瘤細胞和基質(zhì)細胞在不同營養(yǎng)條件下發(fā)生的代謝途徑改變賦予腫瘤細胞更強的增殖和耐藥能力。外泌體作為傳遞信息物質(zhì)的載體介導(dǎo)腫瘤細胞和基質(zhì)細胞之間的串話。近年來,研究發(fā)現(xiàn)外泌體調(diào)節(jié)的腫瘤細胞和腫瘤相關(guān)成纖維細胞(cancer-associated fibroblasts,CAFs)間的代謝重編程在腫瘤細胞的侵襲、轉(zhuǎn)移和耐藥方面扮演重要角色。腫瘤細胞的快速增殖導(dǎo)致腫瘤內(nèi)部乏氧,本研究的目的是探討在肝轉(zhuǎn)移微環(huán)境中,常氧結(jié)直腸腫瘤細胞外泌體通過馴化肝臟星形細胞調(diào)節(jié)乏氧腫瘤細胞的代謝從而促進化療耐藥的機制,研究結(jié)果可能為結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移化療耐藥患者提供新的預(yù)測標志物和潛在治療靶點。研究方法:...

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮略語
第一部分 :結(jié)直腸腫瘤細胞外泌體活化肝臟星形細胞并促進其分泌IL-6和增強糖酵解能力的機制研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 細胞培養(yǎng)
            2.2.2 CCK-8檢測細胞活性
            2.2.3 細胞凋亡檢測
            2.2.4 細胞蛋白提取
            2.2.5 BCA測定蛋白濃度
            2.2.6 Western Blot蛋白印跡雜交
            2.2.7 外泌體分離
            2.2.8 外泌體攝取實驗
            2.2.9 免疫熒光
            2.2.10 葡萄糖攝取實驗
            2.2.11 乳酸生成實驗
            2.2.12 酶聯(lián)免疫吸附實驗
            2.2.13 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 結(jié)直腸腫瘤細胞外泌體的鑒定
        3.2 結(jié)直腸腫瘤細胞外泌體能夠?qū)SCS活化成為MFS
        3.3 結(jié)直腸腫瘤細胞外泌體能夠促進HSCS增殖和耐藥
        3.4 結(jié)直腸腫瘤細胞外泌體能夠促進HSCS分泌IL-6
        3.5 結(jié)直腸腫瘤細胞外泌體增強HSCS糖酵解能力
        3.6 腫瘤細胞外泌體通過傳遞P-ERK和 P-AKT促進MFS分泌IL-6 和增強糖酵解
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 :結(jié)直腸腫瘤細胞外泌體活化的肝臟星形細胞培養(yǎng)上清促進乏氧腫瘤細胞耐藥的機制研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 細胞培養(yǎng)
            2.2.2 CCK-8檢測細胞活性
            2.2.3 細胞凋亡檢測
            2.2.4 細胞蛋白提取
            2.2.5 BCA測定蛋白濃度
            2.2.6 Western Blot蛋白印跡雜交
            2.2.7 外泌體分離
            2.2.8 ATP生成實驗
            2.2.9 基因敲除實驗
            2.2.10 免疫組化
            2.2.11 酶聯(lián)免疫吸附實驗
            2.2.12 統(tǒng)計學(xué)分析
    3 結(jié)果
        3.1 MFs的培養(yǎng)上清能夠促進乏氧腫瘤細胞SN38耐藥
        3.2 MFS的培養(yǎng)上清通過分泌IL-6 促進乏氧腫瘤SN38 耐藥
        3.3 MFS培養(yǎng)上清中的IL-6 通過調(diào)節(jié)乏氧腫瘤細胞乳酸代謝促進SN38 耐藥
        3.4 MFS培養(yǎng)上清通過激活I(lǐng)L-6/STAT3 通路調(diào)節(jié)乏氧腫瘤細胞乳酸代謝
        3.5 結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移患者血漿IL-6水平與伊立替康耐藥和腫瘤預(yù)后明顯相關(guān)
    4 討論
    5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3934125