目的肺癌是最常見的肺原發(fā)性惡性腫瘤,絕大多數(shù)肺癌起源于支氣管黏膜上皮。肺癌具有高發(fā)生率和高死亡率的特點(diǎn),依據(jù)其組織學(xué)類型將其分為小細(xì)胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)和非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC),其中NSCLC約占肺癌總數(shù)的80%,包括鱗癌、腺癌和大細(xì)胞癌。目前對(duì)于肺癌的靶向治療雖然已經(jīng)取得了一定的成效,但是在國內(nèi)肺癌仍然是導(dǎo)致死率最高的癌癥,因此進(jìn)一步探究肺癌發(fā)生發(fā)展過程中相關(guān)基因的功能對(duì)于臨床靶向治療肺癌具有重要的作用。泛素連接酶TRIM25(Tripartite motif-containing protein25)是一個(gè)三基序蛋白,屬于TRIM家族,已有研究認(rèn)為它主要參與病毒抗感和雌激素受體信號(hào),且還與乳腺癌的發(fā)生有關(guān)。但是目前關(guān)于TRIM25在NSCLC中的作用及具體機(jī)制仍不明晰。本研究旨在探究泛素連接酶TRIM25促進(jìn)NSCLC發(fā)生的具體機(jī)制,進(jìn)而為臨床的治療提供新的標(biāo)志物及理論依據(jù)。方法1.利用Western Blot(WB)技術(shù)及逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)分析檢測(cè)臨床NSC...

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
前言
材料與方法
    一、實(shí)驗(yàn)材料
        1.樣本組織及細(xì)胞系
        2.主要試劑
        3.主要儀器
        4.抗體
    二、試驗(yàn)方法
        1.主要試劑的配制
        2.主要實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2 蛋白免疫印跡分析
            2.3 肺癌組織制備蛋白樣本及提取RNA
            2.4 免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)
            2.5 RNA逆轉(zhuǎn)錄
            2.6 逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測(cè)RNA水平
            2.7 瓊脂糖凝膠電泳
            2.8 TRIM25截?cái)囿w的構(gòu)建
            2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    1.泛素連接酶TRIM25在NSCLC病人中高表達(dá)
    2.過表達(dá)TRIM25促進(jìn)NSCLC細(xì)胞的增殖,降低細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性
    3.敲降TRIM25抑制NSCLC細(xì)胞的增殖,增加細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性
    4.TRIM25激活A(yù)KT及mTOR但不影響PTEN蛋白水平
    5.TRIM25不影響PTEN蛋白穩(wěn)定性
    6.TRIM25與PTEN相互結(jié)合
    7.TRIM25促進(jìn)PTEN發(fā)生K63位點(diǎn)的多聚泛素化
    8.TRIM25激活A(yù)KT和mTOR依賴PTEN的存在
    9.NXQ增強(qiáng)CDDP誘導(dǎo)的NSCLC細(xì)胞的凋亡
總結(jié)與討論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
中英文縮略詞對(duì)照表
攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文
致謝



本文編號(hào)：3932559