目的肺癌是最常見的肺原發(fā)性惡性腫瘤,絕大多數肺癌起源于支氣管黏膜上皮。肺癌具有高發(fā)生率和高死亡率的特點,依據其組織學類型將其分為小細胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)和非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC),其中NSCLC約占肺癌總數的80%,包括鱗癌、腺癌和大細胞癌。目前對于肺癌的靶向治療雖然已經取得了一定的成效,但是在國內肺癌仍然是導致死率最高的癌癥,因此進一步探究肺癌發(fā)生發(fā)展過程中相關基因的功能對于臨床靶向治療肺癌具有重要的作用。泛素連接酶TRIM25(Tripartite motif-containing protein25)是一個三基序蛋白,屬于TRIM家族,已有研究認為它主要參與病毒抗感和雌激素受體信號,且還與乳腺癌的發(fā)生有關。但是目前關于TRIM25在NSCLC中的作用及具體機制仍不明晰。本研究旨在探究泛素連接酶TRIM25促進NSCLC發(fā)生的具體機制,進而為臨床的治療提供新的標志物及理論依據。方法1.利用Western Blot(WB)技術及逆轉錄-聚合酶鏈反應(RT-PCR)技術分析檢測臨床NSC...

【文章頁數】：61 頁

【學位級別】：碩士

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中文摘要
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前言
材料與方法
    一、實驗材料
        1.樣本組織及細胞系
        2.主要試劑
        3.主要儀器
        4.抗體
    二、試驗方法
        1.主要試劑的配制
        2.主要實驗方法
            2.1 細胞培養(yǎng)
            2.2 蛋白免疫印跡分析
            2.3 肺癌組織制備蛋白樣本及提取RNA
            2.4 免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP)
            2.5 RNA逆轉錄
            2.6 逆轉錄PCR檢測RNA水平
            2.7 瓊脂糖凝膠電泳
            2.8 TRIM25截斷體的構建
            2.9 統(tǒng)計學分析
結果
    1.泛素連接酶TRIM25在NSCLC病人中高表達
    2.過表達TRIM25促進NSCLC細胞的增殖,降低細胞對順鉑的敏感性
    3.敲降TRIM25抑制NSCLC細胞的增殖,增加細胞對順鉑的敏感性
    4.TRIM25激活AKT及mTOR但不影響PTEN蛋白水平
    5.TRIM25不影響PTEN蛋白穩(wěn)定性
    6.TRIM25與PTEN相互結合
    7.TRIM25促進PTEN發(fā)生K63位點的多聚泛素化
    8.TRIM25激活AKT和mTOR依賴PTEN的存在
    9.NXQ增強CDDP誘導的NSCLC細胞的凋亡
總結與討論
參考文獻
綜述
    參考文獻
中英文縮略詞對照表
攻讀學位期間公開發(fā)表的論文
致謝



本文編號：3932559