背景肝細(xì)胞癌是一種病死率極高的原發(fā)性肝癌。在我國癌癥死亡率里排在第三位。在世界范圍內(nèi)以高發(fā)病率、高死亡率而著稱。HCC形成特點是由多種因素、分多個階段、協(xié)同作用所致。HCC的致病因素及發(fā)病機(jī)制,目前未被全部研究清楚。因此,徹底研究清楚HCC發(fā)生的具體分子機(jī)制,對于早期預(yù)防、早期診斷、精確治療HCC意義重大。越來越多的Lnc RNAs被證實通過MAPK傳導(dǎo)通路在肝細(xì)胞癌的形成過程中起調(diào)控作用。因此,深入探究Lnc RNAs的致癌機(jī)制對于HCC的診斷標(biāo)志物及治療新靶點的開發(fā),具有著重要意義。方法(1)采用實時熒光定量PCR(q RT-PCR)技術(shù),對HCC組織、癌旁組織中Lnc RNA LINC00978的表達(dá)情況進(jìn)行對比檢測。利用統(tǒng)計軟件,論證Lnc RNA LINC00978的表達(dá)水平與臨床數(shù)據(jù)的相關(guān)性。(2)采用q RT-PCR技術(shù),對正常肝細(xì)胞和不同肝癌細(xì)胞系中Lnc RNA LINC00978的表達(dá)情況進(jìn)行檢測。并根據(jù)實驗結(jié)果選取構(gòu)建Lnc RNA LINC00978敲低細(xì)胞模型的HCC細(xì)胞系為Hep3B及Huh7。運(yùn)用MTT實驗、流式細(xì)胞術(shù)、集落形成實驗等技術(shù)對細(xì)胞模型進(jìn)行檢測...

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 長鏈非編碼RNA(LncRNA)的簡述
        1.1.1 LncRNA的結(jié)構(gòu)與分類
        1.1.2 LncRNA的生物學(xué)功能
        1.1.3 LncRNA LINC00978 簡介
    1.2 LncRNA與惡性腫瘤
        1.2.1 LncRNA在惡性腫瘤形成中的促進(jìn)作用
        1.2.2 LncRNA在惡性腫瘤形成中的抑制作用
        1.2.3 LncRNA與肝細(xì)胞癌
    1.3 絲裂原活化蛋白激酶(Mitogen Activated Protein Kinase,MAPK)信號通路
        1.3.1 MAPK信號通路的簡介
        1.3.2 絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)與LncRNA
        1.3.3 絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)與肝細(xì)胞癌
第二章 實驗研究的目的、方法設(shè)計及意義
    2.1 前期實驗研究的結(jié)果及本次實驗研究的目的
        2.1.1 前期實驗研究結(jié)果
        2.1.2 本次實驗研究的目的
    2.2 實驗研究的方法設(shè)計
    2.3 實驗研究的意義
第三章 sh-RNA干擾Lnc LINC00978 后對HCC細(xì)胞生長的影響
    3.1 材料
        3.1.1 生物信息學(xué)分析
        3.1.2 細(xì)胞株的選擇
        3.1.3 引物設(shè)計與合成
        3.1.4 主要試劑
        3.1.5 主要儀器和耗材
    3.2 方法
        3.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.2 質(zhì)粒的提取
        3.2.3 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
        3.2.4 細(xì)胞總RNA提取
        3.2.5 逆轉(zhuǎn)錄PCR
        3.2.6 實時熒光定量PCR
        3.2.7 細(xì)胞生長曲線測定
        3.2.8 細(xì)胞增殖測定
        3.2.10 細(xì)胞凋亡檢測
        3.2.11 細(xì)胞總蛋白提取
        3.2.12 Western blot檢測
        3.2.13 實驗數(shù)據(jù)收集和統(tǒng)計學(xué)處理
    3.3 實驗結(jié)果與討論
        3.3.1 Lnc RNA LINC00978 促進(jìn)肝細(xì)胞癌增殖及侵襲
        3.3.2 LncRNA LINC00978對MAPK信號通路的影響
    3.4 本章小結(jié)
第四章 綜合討論
第五章 結(jié)論與創(chuàng)新點
    5.1 結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 肝細(xì)胞癌致病因素及機(jī)制的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間取得的科研成果



本文編號：3858219