采用基于免疫層析技術(shù)與熒光微球標(biāo)記技術(shù)相結(jié)合的方式,建立一種快速、簡單的定量檢測肝癌腫瘤標(biāo)記物的方法。依據(jù)雙抗體夾心原理,將細(xì)胞骨架蛋白4(CKAP4)配對抗體分別作為標(biāo)記與包被抗體,羊抗兔多抗作為質(zhì)控線包被抗體,制備CKAP4熒光免疫層析試紙條,并對試紙條的線性、精密性、穩(wěn)定性等各項(xiàng)性能指標(biāo)進(jìn)行評價(jià)。結(jié)果表明,采用時(shí)間分辨熒光微球所制備的CKAP4免疫層析試紙條靈敏度高,特異性好,精密性在15%以內(nèi),回收率在85%–115%之間,線性范圍為25–1 000 pg/mL,可在37℃穩(wěn)定保存20 d,與商業(yè)化的ELISA試劑盒的相關(guān)性良好。結(jié)論:初步建立了CKAP4熒光免疫層析方法,能夠定量檢測血清中CKAP4的含量,且具有快速、靈敏、簡便、經(jīng)濟(jì)、可單人份操作等優(yōu)點(diǎn),有望成為肝癌輔助診療的新方法。

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