研究背景非霍奇金淋巴瘤(NHL)是最常見的成人血液腫瘤,在過去的三十年中,發(fā)病率持續(xù)上升。在所有非霍奇金淋巴瘤病例中,大約85%NHL都起源于B淋巴細胞。盡管利妥昔單抗聯(lián)合化療改善了B細胞淋巴瘤(B-NHL)的總體療效和預后,但仍有部分病例原發(fā)耐藥或者復發(fā)難治,此外藥物副反應也是限制化療效果的因素之一。因此,開發(fā)新的高效低毒藥物治療B細胞淋巴瘤很有必要。NL101是兼具苯達莫司汀和組蛋白去乙�；敢种苿�(HDACi)結構特征的新型小分子化合物,前期研究提示NL101具有較高的抗腫瘤活性,毒副作用輕,本研究將明確NL101對B細胞淋巴瘤的抑制作用,初步闡明其作用機制,為其在淋巴瘤的臨床試驗提供實驗依據(jù)。研究方法為了明確NL101對B-NHL的增殖抑制作用,我們采用MTT法檢測NL101對BNHL細胞系和原代細胞增殖的影響,流式細胞術分析細胞周期和凋亡,WB或q-PCR檢測DNA損傷通路和B-NHL關鍵生存因子的表達。建立NOD-SCID小鼠淋巴瘤移植模型,觀察NL101對體內抗瘤作用并隨訪小鼠的生存。為了探討NL101的作用機制,RNA-seq檢測NL101導致的基因表達譜改變,篩選出差...

【文章頁數(shù)】：130 頁

【學位級別】：博士

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縮略語表
引言
1 NL101具有顯著的B-細胞淋巴瘤抑制作用
    1.1 前言
    1.2 實驗材料
        1.2.1 主要實驗設備及耗材
        1.2.2 實驗試劑
        1.2.3 溶液配置
        1.2.4 B-細胞淋巴瘤細胞系
        1.2.5 原代細胞
        1.2.6 動物
    1.3 實驗方法
        1.3.1 B-細胞淋巴瘤細胞系培養(yǎng)
        1.3.2 原代淋巴細胞的分離和培養(yǎng)
        1.3.3 MTT檢測細胞存活情況
        1.3.4 流式細胞學檢測細胞周期
        1.3.5 流式細胞學AV-FITC/PI雙染法檢測細胞凋亡
        1.3.6 WB檢測細胞相關蛋白的表達水平
        1.3.7 NOD-SCID異體淋巴瘤模型小鼠的構建及處理
        1.3.8 小鼠瘤塊的免疫組化
    1.4 實驗結果
        1.4.1 NL101對B-細胞淋巴瘤細胞系存在普遍抑制作用
        1.4.2 NL101顯著抑制原代B細胞淋巴瘤細胞
        1.4.3 NL101將淋巴瘤細胞阻滯在G0/G1期
        1.4.4 NL101可誘導B細胞淋巴瘤細胞發(fā)生凋亡
        1.4.5 NL101 通過激活Caspase途徑誘導細胞凋亡
        1.4.6 NL101抑制小鼠淋巴瘤的生長并延長其生存期
    1.5 小結與討論
    1.6 結論
2 miR-21-Mxd1-c-Myc調節(jié)通路參與NL101對B-NHL的抑制過程
    2.1 NL101 抑制miR-21 的表達及miR-21在B-NHL的意義
        2.1.1 前言
        2.1.2 實驗材料
        2.1.3 實驗方法
        2.1.4 研究結果
        2.1.5 小結與討論
        2.1.6 結論
    2.2 Mxd1為miR-21在B-NHL中的靶基因
        2.2.1 前言
        2.2.2 實驗材料
        2.2.3 實驗方法
        2.2.4 實驗結果
        2.2.5 小結與討論
        2.2.6 結論
    2.3 Mxd1與c-Myc在 B-NHL中的相關性
        2.3.1 前言
        2.3.2 實驗材料
        2.3.3 實驗方法
        2.3.4 研究結果
        2.3.5 小結與討論
        2.3.6 結論
    2.4 c-Myc調節(jié)miR-21 的表達
        2.4.1 前言
        2.4.2 實驗材料
        2.4.3 實驗方法
        2.4.4 研究結果
        2.4.5 小結與討論
        2.4.6 結論
參考文獻
綜述 microRNA在B細胞淋巴瘤中的作用
    參考文獻
作者簡歷及科研成果



本文編號：3845711