研究背景非霍奇金淋巴瘤(NHL)是最常見的成人血液腫瘤,在過去的三十年中,發(fā)病率持續(xù)上升。在所有非霍奇金淋巴瘤病例中,大約85%NHL都起源于B淋巴細(xì)胞。盡管利妥昔單抗聯(lián)合化療改善了B細(xì)胞淋巴瘤(B-NHL)的總體療效和預(yù)后,但仍有部分病例原發(fā)耐藥或者復(fù)發(fā)難治,此外藥物副反應(yīng)也是限制化療效果的因素之一。因此,開發(fā)新的高效低毒藥物治療B細(xì)胞淋巴瘤很有必要。NL101是兼具苯達(dá)莫司汀和組蛋白去乙酰化酶抑制劑(HDACi)結(jié)構(gòu)特征的新型小分子化合物,前期研究提示NL101具有較高的抗腫瘤活性,毒副作用輕,本研究將明確NL101對(duì)B細(xì)胞淋巴瘤的抑制作用,初步闡明其作用機(jī)制,為其在淋巴瘤的臨床試驗(yàn)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究方法為了明確NL101對(duì)B-NHL的增殖抑制作用,我們采用MTT法檢測(cè)NL101對(duì)BNHL細(xì)胞系和原代細(xì)胞增殖的影響,流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期和凋亡,WB或q-PCR檢測(cè)DNA損傷通路和B-NHL關(guān)鍵生存因子的表達(dá)。建立NOD-SCID小鼠淋巴瘤移植模型,觀察NL101對(duì)體內(nèi)抗瘤作用并隨訪小鼠的生存。為了探討NL101的作用機(jī)制,RNA-seq檢測(cè)NL101導(dǎo)致的基因表達(dá)譜改變,篩選出差...

【文章頁數(shù)】：130 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
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中文摘要
英文摘要
縮略語表
引言
1 NL101具有顯著的B-細(xì)胞淋巴瘤抑制作用
    1.1 前言
    1.2 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2.1 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備及耗材
        1.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.2.3 溶液配置
        1.2.4 B-細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系
        1.2.5 原代細(xì)胞
        1.2.6 動(dòng)物
    1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3.1 B-細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系培養(yǎng)
        1.3.2 原代淋巴細(xì)胞的分離和培養(yǎng)
        1.3.3 MTT檢測(cè)細(xì)胞存活情況
        1.3.4 流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)細(xì)胞周期
        1.3.5 流式細(xì)胞學(xué)AV-FITC/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        1.3.6 WB檢測(cè)細(xì)胞相關(guān)蛋白的表達(dá)水平
        1.3.7 NOD-SCID異體淋巴瘤模型小鼠的構(gòu)建及處理
        1.3.8 小鼠瘤塊的免疫組化
    1.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.4.1 NL101對(duì)B-細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞系存在普遍抑制作用
        1.4.2 NL101顯著抑制原代B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
        1.4.3 NL101將淋巴瘤細(xì)胞阻滯在G0/G1期
        1.4.4 NL101可誘導(dǎo)B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡
        1.4.5 NL101 通過激活Caspase途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡
        1.4.6 NL101抑制小鼠淋巴瘤的生長(zhǎng)并延長(zhǎng)其生存期
    1.5 小結(jié)與討論
    1.6 結(jié)論
2 miR-21-Mxd1-c-Myc調(diào)節(jié)通路參與NL101對(duì)B-NHL的抑制過程
    2.1 NL101 抑制miR-21 的表達(dá)及miR-21在B-NHL的意義
        2.1.1 前言
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1.4 研究結(jié)果
        2.1.5 小結(jié)與討論
        2.1.6 結(jié)論
    2.2 Mxd1為miR-21在B-NHL中的靶基因
        2.2.1 前言
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.2.5 小結(jié)與討論
        2.2.6 結(jié)論
    2.3 Mxd1與c-Myc在 B-NHL中的相關(guān)性
        2.3.1 前言
        2.3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.4 研究結(jié)果
        2.3.5 小結(jié)與討論
        2.3.6 結(jié)論
    2.4 c-Myc調(diào)節(jié)miR-21 的表達(dá)
        2.4.1 前言
        2.4.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.4 研究結(jié)果
        2.4.5 小結(jié)與討論
        2.4.6 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 microRNA在B細(xì)胞淋巴瘤中的作用
    參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)歷及科研成果



本文編號(hào)：3845711