【研究背景】肝細胞癌(HCC)是全球常見的癌癥之一,也是導致癌癥死亡的主要原因。全球每年約有84.1萬名患者被診斷為肝細胞癌。在中國,由于潛在肝病、晚期診斷和有限的治療方法,肝細胞癌在癌癥相關死亡原因中位居第三。肝癌其惡性程度高,進展較快。肝癌的復發(fā)轉(zhuǎn)移是其治療失敗的主要原因之一。流行病學統(tǒng)計結(jié)果顯示,酒精是肝癌發(fā)生發(fā)展過程中的重要危險因素之一。前期大量的研究主要集中在酒精代謝過程中的主要產(chǎn)物乙醛的氧化應激作用對疾病的影響。然而現(xiàn)在越來越多的研究表明,酒精的代謝影響著DNA的甲基化和去甲基化的過程。DNA甲基化即在甲基轉(zhuǎn)移酶的作用下催化胞嘧啶生成5-甲基胞嘧啶(5m C)。異常模式的DNA甲基化,這一重要的表觀遺傳機制的轉(zhuǎn)錄調(diào)控與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關。TET(ten-eleven translocation)蛋白家族是一組能夠調(diào)節(jié)表觀遺傳反應的DNA脫甲基酶,可將5-甲基胞嘧啶(5m C)轉(zhuǎn)化為5-羥甲基胞嘧啶(5hm C),該過程是DNA去甲基化的1個必要階段。本課題組前期的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)慢性酒精應激可以引起多種mi RNAs譜表達差異。micro RNAs(mi RNAs)是一種內(nèi)...

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

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1.前言
2.實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞株
        2.1.2 實驗動物
        2.1.3 實驗過程中所用試劑和儀器設備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞復蘇、培養(yǎng)和凍存
        2.2.2 穩(wěn)定表達GFP的肝癌細胞株(HCCLM3)的構(gòu)建
        2.2.3 小鼠肝癌的原位移植
        2.2.4 外周血循環(huán)腫瘤細胞的分選計數(shù)
        2.2.5 Western blot實驗
        2.2.6 Real-time q-PCR實驗
        2.2.7 H&E染色
        2.2.8 免疫組化
        2.2.9 統(tǒng)計分析
3.實驗結(jié)果
    3.1 HCCLM3/GFP細胞的構(gòu)建
    3.2 慢性酒精誘導促進肝癌的進展和轉(zhuǎn)移
    3.3 TET2蛋白在慢性酒精應激的肝癌組織和肝癌細胞中低表達
    3.4 miR-22-3p在慢性酒精應激的肝癌組織和肝癌細胞中高表達
4.討論
5.結(jié)論
6.參考文獻
附錄
致謝
綜述 循環(huán)腫瘤細胞在肝癌診斷和治療中的研究進展
    參考文獻



本文編號：3837462