本研究旨在明確新城疫病毒(NDV)溶瘤作用是否依賴其復(fù)制水平,并改進(jìn)NDV溶瘤機(jī)制研究模型。以NDV疫苗株LaSota感染人腫瘤細(xì)胞系HCT116、A549和人非腫瘤細(xì)胞系HEK293T為研究模型;RT-qPCR檢測(cè)NDV在各細(xì)胞系的基因組復(fù)制水平;Western blot檢測(cè)NDV在各細(xì)胞系的蛋白表達(dá)水平;利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)NDV感染對(duì)各細(xì)胞系的細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的影響。結(jié)果表明,NDV在三個(gè)細(xì)胞系內(nèi)的基因組復(fù)制水平和蛋白表達(dá)水平?jīng)]有顯著差異,但對(duì)三個(gè)細(xì)胞系的溶瘤作用存在明顯差異;進(jìn)一步流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)發(fā)現(xiàn),NDV感染能誘發(fā)HEK293T和HCT116的細(xì)胞周期發(fā)生G1期停滯,但對(duì)A549的細(xì)胞周期沒有明顯影響;此外,NDV感染24 h后,A549細(xì)胞以早期凋亡為主,而HCT116細(xì)胞以壞死/晚期細(xì)胞凋亡為主。NDV的溶瘤作用并不依賴于其復(fù)制水平,而且NDV對(duì)不同類型腫瘤細(xì)胞的溶瘤作用存在不同機(jī)制。

【文章頁數(shù)】：7 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 引物序列
    1.3 質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的構(gòu)建
    1.4 RT-qPCR
    1.5 檢測(cè)病毒基因組復(fù)制
    1.6 檢測(cè)病毒蛋白的表達(dá)水平
    1.7 顯微鏡觀察
    1.8 細(xì)胞凋亡檢測(cè)
    1.9 細(xì)胞周期檢測(cè)
    1.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié) 果
    2.1 NDV在不同類型人細(xì)胞系中基因組復(fù)制水平的比較
    2.2 NDV在不同類型人細(xì)胞系中蛋白表達(dá)水平的比較
    2.3 NDV對(duì)不同類型人細(xì)胞系殺傷效果的比較
    2.4 NDV對(duì)各細(xì)胞系細(xì)胞周期的影響
    2.5 NDV感染細(xì)胞凋亡情況檢測(cè)
3 討 論
4 結(jié) 論



本文編號(hào)：3817310