研究背景和目的:p53是重要的抑癌基因之一,i ASPP是新發(fā)現(xiàn)的能特異性抑制p53正常抑癌功能的蛋白,我們課題組前期研究發(fā)現(xiàn),i ASPP能通過(guò)與p53的結(jié)合,從而抑制p53的正常抑癌功能。因此,解除i ASPP與p53的結(jié)合,釋放出游離的p53,可能是恢復(fù)或激活p53的正常抑癌功能的有效方法。本項(xiàng)目利用p53衍生肽A34能與p53競(jìng)爭(zhēng)i ASPP結(jié)合位點(diǎn)的特性,采用報(bào)告基因、CHIP、體外轉(zhuǎn)錄翻譯、免疫共沉淀、流式細(xì)胞、移植瘤模型等技術(shù),從體內(nèi)體外兩方面研究A34與i ASPP的相互作用,觀察A34過(guò)表達(dá)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖和凋亡的影響以及對(duì)前凋亡基因表達(dá)和啟動(dòng)子活性的影響,闡明小分子肽A34在恢復(fù)和重建p53抑癌功能中的作用和機(jī)制。由于野生型p53存在于50%的人類腫瘤中,因此本課題的實(shí)施為使用小分子肽阻斷p53和i ASPP的結(jié)合,恢復(fù)和重建p53抑癌功能提供了新的思路。方法:第一部分小分子肽A34對(duì)腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的影響1.小分子肽對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的影響:(1)針對(duì)于不同p53表達(dá)的腫瘤細(xì)胞,培養(yǎng)細(xì)胞U2OS、MKN-45、H1299、敲除p53基因的U2OS細(xì)胞,轉(zhuǎn)染EX-GF...

【文章頁(yè)數(shù)】：106 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略語(yǔ)表
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中文摘要
第一章 前言
第二章 小分子肽A34對(duì)腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
    2.1 小分子肽A34對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的影響
        2.1.1 材料和實(shí)驗(yàn)方法
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.2 小分子肽A34對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的影響
        2.2.1 材料和實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
第三章 小分子肽A34、iASPP、p53之間的相互作用
    3.1 小分子肽A34、iASPP、p53在體外的相互作用
        3.1.1 材料和實(shí)驗(yàn)方法
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.2 小分子肽A34、iASPP、p53在細(xì)胞內(nèi)的相互作用
        3.2.1 材料和實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.2 結(jié)果
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
第四章 小分子肽A34影響腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的機(jī)制
    4.1 小分子肽A34對(duì)凋亡基因啟動(dòng)子Bax/PUMA轉(zhuǎn)錄功能的影響
        4.1.1 材料和實(shí)驗(yàn)方法
        4.1.2 結(jié)果
    4.2 小分子肽A34與凋亡基因Bax/PUMA結(jié)合能力的影響
        4.2.1 材料和實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
第五章 小分子肽A34對(duì)裸鼠腫瘤生長(zhǎng)的影響
    5.1 材料和實(shí)驗(yàn)方法
    5.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    5.3 討論
    5.4 小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 iASPP與癌癥
    參考文獻(xiàn)
研究生期間發(fā)表的文章
致謝



本文編號(hào)：3817072