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蟲草素靶向DEK調(diào)控Akt及Erk1/2信號(hào)通路抑制膽管癌增殖和遷移的機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2023-03-22 22:37
  目的:探討蟲草素(Cordycepin)對(duì)膽管癌細(xì)胞增殖和遷移的抑制作用及其分子機(jī)制。材料和方法:MTT法檢測(cè)不同濃度蟲草素對(duì)膽管癌細(xì)胞活力的抑制作用;平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)蟲草素對(duì)膽管癌細(xì)胞集落形成能力的影響;Hoechst33342染色觀察蟲草素處理后的細(xì)胞內(nèi)凋亡小體的形成情況;AnnexinV/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)蟲草素用藥后的細(xì)胞凋亡率;劃痕愈合實(shí)驗(yàn)和Transwell小室遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)蟲草素對(duì)膽管癌細(xì)胞遷移能力的影響;免疫熒光染色法檢測(cè)蟲草素處理后膽管癌細(xì)胞E-Cadherin和Vimentin的表達(dá)情況;蛋白印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白、EMT標(biāo)志物蛋白、Akt信號(hào)通路和Erk1/2信號(hào)通路相關(guān)蛋白及DEK蛋白的表達(dá)水平;DEK基因沉默后檢測(cè)膽管癌細(xì)胞增殖活力、克隆形成能力和遷移能力;RT-PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)正常膽管及多種膽管癌細(xì)胞系中DEK的mRNA表達(dá)水平;免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)人膽管癌組織中DEK和裸鼠荷瘤中E-Cadherin、Vimentin、p-Akt、p-Erk1/2及DEK的表達(dá)水平;裸鼠荷瘤實(shí)驗(yàn)檢測(cè)蟲草素在體內(nèi)對(duì)膽管癌的抑制作用。結(jié)果:1.MTT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:用0μ...

【文章頁(yè)數(shù)】:70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮寫
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第三章 結(jié)果
    3.1 蟲草素顯著抑制膽管癌細(xì)胞增殖活力和克隆形成能力
    3.2 蟲草素誘導(dǎo)膽管癌細(xì)胞凋亡
    3.3 蟲草素抑制膽管癌細(xì)胞的遷移能力
    3.4 蟲草素抑制膽管癌細(xì)胞EMT的發(fā)生
    3.5 蟲草素抑制Akt和Erk1/2信號(hào)通路
    3.6 DEK在各腫瘤中的表達(dá)及蟲草素對(duì)DEK蛋白的影響
    3.7 DEK在膽管癌中過(guò)表達(dá)
    3.8 DEK基因沉默抑制膽管癌細(xì)胞增殖和遷移
    3.9 DEK基因沉默抑制Akt和Erk1/2信號(hào)通路
    3.10 蟲草素對(duì)裸鼠荷瘤的影響
    3.11 蟲草素對(duì)裸鼠荷瘤蛋白表達(dá)的影響
    3.12 全文機(jī)制圖
    附圖
第四章 討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間取得的科研業(yè)績(jī)
致謝



本文編號(hào):3767724

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