目的:探討蟲草素(Cordycepin)對膽管癌細胞增殖和遷移的抑制作用及其分子機制。材料和方法:MTT法檢測不同濃度蟲草素對膽管癌細胞活力的抑制作用;平板克隆形成實驗檢測蟲草素對膽管癌細胞集落形成能力的影響;Hoechst33342染色觀察蟲草素處理后的細胞內(nèi)凋亡小體的形成情況;AnnexinV/PI雙染流式細胞術檢測蟲草素用藥后的細胞凋亡率;劃痕愈合實驗和Transwell小室遷移實驗檢測蟲草素對膽管癌細胞遷移能力的影響;免疫熒光染色法檢測蟲草素處理后膽管癌細胞E-Cadherin和Vimentin的表達情況;蛋白印跡實驗檢測凋亡相關蛋白、EMT標志物蛋白、Akt信號通路和Erk1/2信號通路相關蛋白及DEK蛋白的表達水平;DEK基因沉默后檢測膽管癌細胞增殖活力、克隆形成能力和遷移能力;RT-PCR實驗檢測正常膽管及多種膽管癌細胞系中DEK的mRNA表達水平;免疫組織化學染色法檢測人膽管癌組織中DEK和裸鼠荷瘤中E-Cadherin、Vimentin、p-Akt、p-Erk1/2及DEK的表達水平;裸鼠荷瘤實驗檢測蟲草素在體內(nèi)對膽管癌的抑制作用。結果:1.MTT實驗結果顯示:用0μ...

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮寫
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料
    2.2 實驗方法
    2.3 統(tǒng)計學方法
第三章 結果
    3.1 蟲草素顯著抑制膽管癌細胞增殖活力和克隆形成能力
    3.2 蟲草素誘導膽管癌細胞凋亡
    3.3 蟲草素抑制膽管癌細胞的遷移能力
    3.4 蟲草素抑制膽管癌細胞EMT的發(fā)生
    3.5 蟲草素抑制Akt和Erk1/2信號通路
    3.6 DEK在各腫瘤中的表達及蟲草素對DEK蛋白的影響
    3.7 DEK在膽管癌中過表達
    3.8 DEK基因沉默抑制膽管癌細胞增殖和遷移
    3.9 DEK基因沉默抑制Akt和Erk1/2信號通路
    3.10 蟲草素對裸鼠荷瘤的影響
    3.11 蟲草素對裸鼠荷瘤蛋白表達的影響
    3.12 全文機制圖
    附圖
第四章 討論
第五章 結論
參考文獻
攻讀碩士學位期間取得的科研業(yè)績
致謝



本文編號：3767724