肥胖是已知的易發(fā)生肝癌的危險因素之一。然而,肥胖促肝癌轉(zhuǎn)移的能力和機制尚不十分明確。因此,我們在體外誘導(dǎo)前脂肪細胞3T3-L1分化為脂肪細胞及用肥胖小鼠在體內(nèi)建立肝癌轉(zhuǎn)移模型來模擬肥胖狀態(tài)下的腫瘤微環(huán)境。以此為工具,本文探索了肥胖相關(guān)mi R-27a上調(diào)促肝癌轉(zhuǎn)移的機制。結(jié)果顯示:mi R-27a在脂肪細胞及肥胖小鼠模型中均上調(diào),且上調(diào)的mi R-27a促進HCC細胞系的遷移和侵襲,并增加肥胖小鼠肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)的數(shù)目。在對照組的HCC細胞系及小鼠組織中SFRP1過表達明顯減輕了由于mi R-27a的上調(diào)導(dǎo)致的β-catenin和MMP7的上調(diào)。同時,在肥胖小鼠模型中,EMT相關(guān)標志物E-cadherin表達減少、Vimentin表達增多,并與β-catenin上調(diào)有關(guān)。此外,對臨床肝癌標本的探究發(fā)現(xiàn)mi R-27a與SFRP1表達呈負相關(guān)。綜上,我們的結(jié)果表明mi R-27a是一個重要的促肝癌轉(zhuǎn)移因子,肥胖相關(guān)的mi R-27a上調(diào)能通過抑制SFRP1的方式激活wnt/β-catenin通路促進肝癌轉(zhuǎn)移。

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
提要
中文摘要
abstract
第一章 綜述
    1.1 肥胖與肝癌的相關(guān)進展
        1.1.1 肥胖
        1.1.2 肥胖相關(guān)肝癌的流行病學(xué)
        1.1.3 肥胖引起肝癌的可能發(fā)病機制
    1.2 microRNA在肝癌中的作用
        1.2.1 概述
        1.2.2 microRNA的特性
        1.2.3 microRNA的產(chǎn)生過程
        1.2.4 microRNA在HCC中的生物功能
        1.2.5 microRNA在腫瘤微環(huán)境中的作用
第二章 材料與方法
    2.1 實驗材料與器材
        2.1.1 細胞和細胞株
        2.1.2 實驗動物
        2.1.3 臨床組織樣本
        2.1.4 主要實驗材料
        2.1.5 主要實驗器材
        2.1.6 引物序列
        2.1.7 主要溶液配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 3T3-L1細胞分化
        2.2.3 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
        2.2.4 細胞遷移及侵襲實驗
        2.2.5 動物飼養(yǎng)及實驗?zāi)Ｐ偷慕?br>        2.2.6 HE染色及免疫組化
        2.2.7 RNA水平檢測
        2.2.8 蛋白水平檢測
    2.3 統(tǒng)計學(xué)分析
第三章 實驗結(jié)果
    3.1 3T3-L1細胞分泌miR-27a對HepG2細胞轉(zhuǎn)移能力的影響
        3.1.1 HepG2細胞與3T3-L1脂肪細胞共培養(yǎng)體系的建立
        3.1.2 3T3-L1細胞分泌miR-27a對HepG2細胞遷移能力的影響
        3.1.3 3T3-L1細胞分泌miR-27a對HepG2細胞侵襲能力的影響
        3.1.4 小結(jié)
    3.2 miR-27a在體外通過抑制SFRP1激活wnt/β-catenin通路
        3.2.1 SFRP1過表達對HepG2細胞轉(zhuǎn)移能力的影響
        3.2.2 SFRP1抑制HepG2細胞轉(zhuǎn)移能力機制的研究
        3.2.3 小結(jié)
    3.3 動物模型中脂肪分泌的miR-27a促進肝癌轉(zhuǎn)移
        3.3.1 小鼠肥胖模型的建立及相關(guān)miR-27a的表達情況
        3.3.2 肥胖對小鼠肝癌肺轉(zhuǎn)移的影響
        3.3.3 小鼠模型中肥胖促轉(zhuǎn)移機制的探究
        3.3.4 小結(jié)
    3.4 臨床樣本中miR-27a的表達與SFRP1的表達呈負相關(guān)
        3.4.1 臨床樣本中miR-27a與SFRP1的表達情況
        3.4.2 肥胖患者的生存曲線分析
        3.4.3 小結(jié)
第四章 討論
    4.1 肥胖促進肝癌轉(zhuǎn)移與miR-27a高表達相關(guān)
    4.2 miR-27a促肝癌轉(zhuǎn)移通過抑制SFRP1與wnt/β-catenin信號通路有關(guān)
    4.3 EMT與肝癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系
    4.4 總結(jié)和展望
第五章 結(jié)論
第六章 創(chuàng)新點與不足
參考文獻
作者簡介
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及取得的科研成果
致謝



本文編號：3763700