發(fā)布時(shí)間：2023-03-18 19:06

　　肥胖是已知的易發(fā)生肝癌的危險(xiǎn)因素之一。然而,肥胖促肝癌轉(zhuǎn)移的能力和機(jī)制尚不十分明確。因此,我們在體外誘導(dǎo)前脂肪細(xì)胞3T3-L1分化為脂肪細(xì)胞及用肥胖小鼠在體內(nèi)建立肝癌轉(zhuǎn)移模型來模擬肥胖狀態(tài)下的腫瘤微環(huán)境。以此為工具,本文探索了肥胖相關(guān)mi R-27a上調(diào)促肝癌轉(zhuǎn)移的機(jī)制。結(jié)果顯示:mi R-27a在脂肪細(xì)胞及肥胖小鼠模型中均上調(diào),且上調(diào)的mi R-27a促進(jìn)HCC細(xì)胞系的遷移和侵襲,并增加肥胖小鼠肺轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)的數(shù)目。在對照組的HCC細(xì)胞系及小鼠組織中SFRP1過表達(dá)明顯減輕了由于mi R-27a的上調(diào)導(dǎo)致的β-catenin和MMP7的上調(diào)。同時(shí),在肥胖小鼠模型中,EMT相關(guān)標(biāo)志物E-cadherin表達(dá)減少、Vimentin表達(dá)增多,并與β-catenin上調(diào)有關(guān)。此外,對臨床肝癌標(biāo)本的探究發(fā)現(xiàn)mi R-27a與SFRP1表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。綜上,我們的結(jié)果表明mi R-27a是一個(gè)重要的促肝癌轉(zhuǎn)移因子,肥胖相關(guān)的mi R-27a上調(diào)能通過抑制SFRP1的方式激活wnt/β-catenin通路促進(jìn)肝癌轉(zhuǎn)移。

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
提要
中文摘要
abstract
第一章 綜述
    1.1 肥胖與肝癌的相關(guān)進(jìn)展
        1.1.1 肥胖
        1.1.2 肥胖相關(guān)肝癌的流行病學(xué)
        1.1.3 肥胖引起肝癌的可能發(fā)病機(jī)制
    1.2 microRNA在肝癌中的作用
        1.2.1 概述
        1.2.2 microRNA的特性
        1.2.3 microRNA的產(chǎn)生過程
        1.2.4 microRNA在HCC中的生物功能
        1.2.5 microRNA在腫瘤微環(huán)境中的作用
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料與器材
        2.1.1 細(xì)胞和細(xì)胞株
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.3 臨床組織樣本
        2.1.4 主要實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.5 主要實(shí)驗(yàn)器材
        2.1.6 引物序列
        2.1.7 主要溶液配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 3T3-L1細(xì)胞分化
        2.2.3 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染
        2.2.4 細(xì)胞遷移及侵襲實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 動(dòng)物飼養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ偷慕?br>        2.2.6 HE染色及免疫組化
        2.2.7 RNA水平檢測
        2.2.8 蛋白水平檢測
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 3T3-L1細(xì)胞分泌miR-27a對HepG2細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響
        3.1.1 HepG2細(xì)胞與3T3-L1脂肪細(xì)胞共培養(yǎng)體系的建立
        3.1.2 3T3-L1細(xì)胞分泌miR-27a對HepG2細(xì)胞遷移能力的影響
        3.1.3 3T3-L1細(xì)胞分泌miR-27a對HepG2細(xì)胞侵襲能力的影響
        3.1.4 小結(jié)
    3.2 miR-27a在體外通過抑制SFRP1激活wnt/β-catenin通路
        3.2.1 SFRP1過表達(dá)對HepG2細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的影響
        3.2.2 SFRP1抑制HepG2細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力機(jī)制的研究
        3.2.3 小結(jié)
    3.3 動(dòng)物模型中脂肪分泌的miR-27a促進(jìn)肝癌轉(zhuǎn)移
        3.3.1 小鼠肥胖模型的建立及相關(guān)miR-27a的表達(dá)情況
        3.3.2 肥胖對小鼠肝癌肺轉(zhuǎn)移的影響
        3.3.3 小鼠模型中肥胖促轉(zhuǎn)移機(jī)制的探究
        3.3.4 小結(jié)
    3.4 臨床樣本中miR-27a的表達(dá)與SFRP1的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)
        3.4.1 臨床樣本中miR-27a與SFRP1的表達(dá)情況
        3.4.2 肥胖患者的生存曲線分析
        3.4.3 小結(jié)
第四章 討論
    4.1 肥胖促進(jìn)肝癌轉(zhuǎn)移與miR-27a高表達(dá)相關(guān)
    4.2 miR-27a促肝癌轉(zhuǎn)移通過抑制SFRP1與wnt/β-catenin信號通路有關(guān)
    4.3 EMT與肝癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系
    4.4 總結(jié)和展望
第五章 結(jié)論
第六章 創(chuàng)新點(diǎn)與不足
參考文獻(xiàn)
作者簡介
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及取得的科研成果
致謝



本文編號：3763700