本論文采用UPLC-MS/MS方法對人體血清和尿液中的代謝產(chǎn)物進(jìn)行定量分析,并探討了它們與兩種癌癥的相關(guān)性,這在醫(yī)學(xué)上對癌癥的早期診斷和治療、減輕患者身體心理上的痛苦和經(jīng)濟(jì)壓力都具有十分重要的意義。首先,建立了測定人體尿液中DNA氧化損傷標(biāo)志物8-羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)的UPLC-MS/MS分析方法。尿樣經(jīng)HLB固相萃取柱凈化,以正離子電噴霧離子源和多反應(yīng)監(jiān)測模式進(jìn)行分析。8-OHdG的線性范圍在1-300 nmol/L之間。LOD和LOQ分別為0.2和0.6 nmol/L,樣品的日內(nèi)精密度為0.7%-1.1%,日間精密度為0.5%-0.7%。8-OHdG的回收率在99.8-111.4%之間。此外,應(yīng)用建立的方法檢測了65例正常人(吸煙與非吸煙者分別為21和44例)和61例結(jié)直腸癌患者(吸煙與非吸煙者分別為17和44例)尿液中8-OHdG含量,發(fā)現(xiàn)吸煙者和結(jié)直腸癌患者的8-OHdG含量明顯高于對照組。其次,對血清樣品里的蛋白質(zhì)進(jìn)行沉淀處理,利用穩(wěn)定同位素標(biāo)記的方法在負(fù)離子電離多反應(yīng)監(jiān)測模式下檢測了甘膽酸(GCA)的含量。GCA的校準(zhǔn)曲線覆蓋濃度范圍從0.2到400 ng/ml;L...

【文章頁數(shù)】：102 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮寫
第一章 緒論
    1.1 前言
    1.2 代謝組學(xué)研究進(jìn)展
        1.2.1 代謝組學(xué)概念
        1.2.2 代謝組學(xué)的分類
        1.2.3 代謝組學(xué)與生物標(biāo)志物
        1.2.4 代謝組學(xué)的研究流程
        1.2.5 代謝組學(xué)在疾病診斷的應(yīng)用
    1.3 樣品前處理技術(shù)
        1.3.1 液液萃取
        1.3.2 液相微萃取
        1.3.3 固相萃取
        1.3.4 固相微萃取
        1.3.5 攪拌棒吸附萃取
        1.3.6 分子印跡固相萃取
        1.3.7 化學(xué)衍生化
    1.4 常用檢測代謝產(chǎn)物的分析方法
        1.4.1 核磁共振技術(shù)
            1.4.1.1 核磁共振氫譜
            1.4.1.2 核磁共振碳譜
        1.4.2 質(zhì)譜技術(shù)
            1.4.2.1 毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜聯(lián)用
            1.4.2.2 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用
            1.4.2.3 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用
    1.5 論文選題目的、意義和研究內(nèi)容
第二章 UPLC-MS/MS 測定尿液中 8-羥基脫氧鳥苷的含量及與吸煙和結(jié)直腸癌的相關(guān)性
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 材料與試劑
        2.2.2 儀器與設(shè)備
        2.2.3 尿液樣品收集
        2.2.4 樣品前處理
        2.2.5 試驗(yàn)條件
            2.2.5.1 色譜條件
            2.2.5.2 質(zhì)譜條件
        2.2.6 方法評估
        2.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 色譜條件的優(yōu)化
        2.3.2 質(zhì)譜條件的優(yōu)化
        2.3.3 方法學(xué)驗(yàn)證
        2.3.4 方法的應(yīng)用
            2.3.4.1 人群尿液樣本的檢測
            2.3.4.2 8-OHdG的定量
    2.4 小結(jié)
第三章 UPLC-MS/MS 測定血清中甘膽酸的含量及與肝細(xì)胞肝癌的相關(guān)性
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 材料與試劑
        3.2.2 儀器與設(shè)備
        3.2.3 血清樣品收集
        3.2.4 樣品前處理
        3.2.5 試驗(yàn)條件
            3.2.5.1 色譜條件
            3.2.5.2 質(zhì)譜條件
        3.2.6 方法評估
        3.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 色譜條件的優(yōu)化
        3.3.2 質(zhì)譜參數(shù)的優(yōu)化
        3.3.3 方法學(xué)評估
        3.3.4 方法的應(yīng)用
            3.3.4.1 人群血清樣品的檢測
            3.3.4.2 GCA的定量
    3.4 小結(jié)
第四章 UPLC-MS/MS 測定尿液中胞嘧啶核苷的含量及與結(jié)直腸癌的相關(guān)性
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 材料與試劑
        4.2.2 儀器與設(shè)備
        4.2.3 尿液樣品收集
        4.2.4 樣品前處理
        4.2.5 試驗(yàn)條件
            4.2.5.1 色譜條件
            4.2.5.2 質(zhì)譜條件
        4.2.6 方法評估
        4.2.7 數(shù)據(jù)分析
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 流動(dòng)相加入蘋果酸后對 5-mdC、5-hmdC、5-mrC 和 5-hmrC 的 MS 檢測
        4.3.2 SPE程序的優(yōu)化
        4.3.3 方法學(xué)評估
        4.3.4 方法的應(yīng)用
            4.3.4.1 同時(shí)測定 CRC 患者尿液中的 5-mdC、5-hmdC、5-mrC 和 5-hmrC
            4.3.4.2 5-mdC、5-hmdC、5-mrC 和 5-hmrC 的定量
    4.4 小結(jié)
第五章 總結(jié)與展望
    5.1 總結(jié)
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
作者簡歷
致謝



本文編號：3750844