目的:通過(guò)抑制舌鱗癌細(xì)胞中PI3K/AKT/mTOR/p70S6K信號(hào)通路的表達(dá),檢測(cè)細(xì)胞凋亡與自噬的變化,探討舌鱗癌耐藥的機(jī)制。方法:以舌鱗癌細(xì)胞Cal27與舌鱗癌耐順鉑細(xì)胞Cal27/CDDP為研究對(duì)象。分別用PI3K/AKT抑制劑LY294002、mTOR抑制劑Rapamycin、p70S6K抑制劑LY2584702作用該通路各個(gè)環(huán)節(jié)。Western blot檢測(cè)通路抑制劑作用后相關(guān)蛋白的變化。Cyto-ID熒光染色檢測(cè)自噬體的形成。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡水平。結(jié)果:Western blot結(jié)果顯示加入抑制劑后舌鱗癌細(xì)胞Beclin1表達(dá)分別高于對(duì)照組,LC3II與LC3I以及Bax與Bcl-2的比值均升高,該通路的p-AKT、p-mTOR、p-p70S6K等蛋白均有下降(P<0.05)。流式結(jié)果顯示加入抑制劑后的舌鱗癌細(xì)胞凋亡率分別較對(duì)照組升高(P<0.05)。Cyto-ID熒光染色后結(jié)果顯示加入抑制劑后的舌鱗癌細(xì)胞自噬小體的數(shù)目明顯高于對(duì)照組(P<0.05)。對(duì)比兩組細(xì)胞顯示加入抑制劑后的Cal27細(xì)胞發(fā)生凋亡與自噬的水平高于Cal27/CDDP(P<...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 抑制劑濃度
        1.2.3 Western blot法檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)
        1.2.4 Cyto-ID熒光染色觀察細(xì)胞自噬
        1.2.5 流式細(xì)胞儀測(cè)定Cal27、Cal27/CDDP細(xì)胞的凋亡率
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 Western blot檢測(cè)舌鱗癌細(xì)胞內(nèi)相關(guān)蛋白的表達(dá)情況
        2.1.1 加入抑制劑后對(duì)Cal27細(xì)胞蛋白表達(dá)的影響
        2.1.2 加入抑制劑后對(duì)Cal27/CDDP細(xì)胞蛋白表達(dá)的影響
    2.2抑制PI3K/AKT/mTOR/p7OS6K對(duì)舌鱗癌細(xì)胞自噬的影響
    2.3 抑制PI3K/AKT/mTOR/p7OS6K對(duì)舌鱗癌細(xì)胞凋亡的影響
    2.4 加抑制劑后Cal27細(xì)胞與Cal27/CDDP細(xì)胞凋亡與自噬變化比較
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