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siRNA干擾PDGFRβ抑制新生兒血管瘤干細(xì)胞的增殖和分化

發(fā)布時(shí)間:2023-01-12 22:41
  為了研究血小板衍生生長(zhǎng)因子受體β(PDGFRβ)在血管瘤干細(xì)胞(Hem-SCs)中的表達(dá),并探討PDGFRβ siRNA對(duì)Hem-SCs增殖、凋亡和分化的影響。本研究通過(guò)組織消化法和免疫磁珠分選法從新生兒血管瘤組織中分離Hem-SCs,并通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)鑒定細(xì)胞免疫表型;并使用Western blotting法檢測(cè)PDGFRβ蛋白在Hem-SCs中的表達(dá)水平。通過(guò)lipofectamine 2000將PDGFRβ siRNA轉(zhuǎn)染到Hem-SCs細(xì)胞,使用CCK8和流式細(xì)胞術(shù)分別檢測(cè)PDGFRβ siRNA對(duì)Hem-SCs增殖和凋亡的影響;經(jīng)過(guò)Western blotting檢測(cè)PDGFRβ siRNA對(duì)Hem-SCs Sox2、Oct4和Notch1蛋白表達(dá)的影響。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示,CD133和CD90在分離的Hem-SCs中陽(yáng)性率分別為99.8%和96.7%;Western blotting結(jié)果顯示PDGFRβ蛋白在Hem-SCs細(xì)胞中的表達(dá)顯著高于血管瘤內(nèi)皮細(xì)胞;CCK8結(jié)果顯示,與Control組比較,PDGFRβ siRNA組細(xì)胞增殖率顯著降低(p<0.01);流式檢測(cè)結(jié)果... 

【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)

【文章目錄】:
1 結(jié)果與分析
    1.1 Hem-SCs的抗原標(biāo)記表達(dá)
    1.2 PDGFRβ在血管瘤Hem-SCs中高表達(dá)
    1.3 PDGFRβsiRNA抑制血管瘤Hem-SCs增殖能力
    1.4 PDGFRβsiRNA促進(jìn)血管瘤干細(xì)胞Hem-SCs凋亡
    1.5 PDGFRβsiRNA抑制血管瘤Hem-SCs分化能力
2 討論
3 材料與方法
    3.1 試驗(yàn)材料
    3.2 Hem-SCs分離培養(yǎng)
    3.3 流式細(xì)胞術(shù)鑒定Hem-SCs
    3.4 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
    3.5 CCK8法檢測(cè)
    3.6 流式細(xì)胞儀檢測(cè)
    3.7 Western blotting檢測(cè)
    3.8 數(shù)據(jù)分析



本文編號(hào):3730553

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