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人參皂苷CK通過(guò)TGF-β1/Smads通路誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制

發(fā)布時(shí)間:2023-01-12 16:15
  目的探討人參皂苷CK(Ginsenoside CK)通過(guò)TGF-β1/Smads通路誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡及其作用機(jī)制,為人參皂苷CK治療肝癌的研究提供理論依據(jù)。方法常規(guī)培養(yǎng)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞,分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組;利用MTT法檢測(cè)不同濃度人參皂苷CK(20,40,60,80 μmol/L)作用于細(xì)胞的存活率;利用Hoechst染色和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同濃度人參皂苷CK(20,40,60 μmol/L)對(duì)人肝癌SMMC-7721的凋亡作用;利用免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測(cè)TGF-β1/Smads通路相關(guān)蛋白TβRⅡ、Smad4的表達(dá);進(jìn)一步利用Western Blot技術(shù)檢測(cè)TGF-β1/Smads 通路相關(guān)蛋白 TGF-β1、TβRⅡ、Smad2/3、Smad4、Smad7 及凋亡相關(guān)蛋白Cleaved-Caspase3的表達(dá);利用Western Blot技術(shù)檢測(cè)加入人重組蛋白TGF-β1后,人參皂苷CK組的TGF-β1/Smads通路相關(guān)蛋白Smad2/3、Smad4和Smad7蛋白的表達(dá)。結(jié)果1.人參皂苷CK能降低人肝癌SMMC-7721細(xì)胞存活率,并且隨著藥物濃度... 

【文章頁(yè)數(shù)】:50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
前言
摘要
Abstract
中英文縮略語(yǔ)
第一章 材料
    1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
    1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    1.3 實(shí)驗(yàn)抗體
    1.4 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
第二章 方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.2 MTT實(shí)驗(yàn)
    2.3 Hoechst染色
    2.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè)試驗(yàn)(Annexin V FITC/PI雙染)
    2.5 免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測(cè)Smad4蛋白的表達(dá)
    2.6 Western Blot檢測(cè)蛋白表達(dá)含量
        2.6.1 提取細(xì)胞全蛋白
        2.6.2 BCA法測(cè)定蛋白質(zhì)含量
        2.6.3 Western blot法檢測(cè)蛋白的表達(dá)
    2.7 數(shù)據(jù)處理及分析
第三章 結(jié)果
    3.1 人參皂苷CK誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡的結(jié)果
        3.1.1 MTT法檢測(cè)人參皂苷CK抑制人肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖的結(jié)果
        3.1.2 Hoechst檢測(cè)人參皂苷CK誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡結(jié)果
        3.1.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)人參皂苷CK誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡結(jié)果
        3.1.4 Western Blot檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)結(jié)果
    3.2 人參皂苷CK作用于人肝癌SMMC-7721細(xì)胞對(duì)其TGF-β1/Smads通路蛋白表達(dá)影響的結(jié)果
        3.2.1 免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)Smad4蛋白表達(dá)的結(jié)果
        3.2.2 Western blot檢測(cè)TGF-β1/Smads通路相關(guān)蛋白的表達(dá)結(jié)果
        3.2.3 Western blot檢測(cè)人重組蛋白TGF-β1對(duì)人參皂苷CK抑制TGF-β1/Smads通路表達(dá)的影響結(jié)果
第四章 討論
第五章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[9]人參皂苷CK對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞株的增殖抑制作用及其機(jī)制[J]. 王紅,鄧晶,劉珊,付鳳蓮,蔣永新.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2016(04)
[10]人參皂苷Rg3對(duì)H2O2誘導(dǎo)人腎小球系膜細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究[J]. 吳勝斌,王應(yīng)燈.  現(xiàn)代藥物與臨床. 2015(12)

碩士論文
[1]TGF-β/Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在肝癌發(fā)展過(guò)程中的動(dòng)態(tài)變化[D]. 馬冬杰.延邊大學(xué) 2013



本文編號(hào):3730123

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