人參皂苷CK通過(guò)TGF-β1/Smads通路誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制
發(fā)布時(shí)間:2023-01-12 16:15
目的探討人參皂苷CK(Ginsenoside CK)通過(guò)TGF-β1/Smads通路誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡及其作用機(jī)制,為人參皂苷CK治療肝癌的研究提供理論依據(jù)。方法常規(guī)培養(yǎng)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞,分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組;利用MTT法檢測(cè)不同濃度人參皂苷CK(20,40,60,80 μmol/L)作用于細(xì)胞的存活率;利用Hoechst染色和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)不同濃度人參皂苷CK(20,40,60 μmol/L)對(duì)人肝癌SMMC-7721的凋亡作用;利用免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測(cè)TGF-β1/Smads通路相關(guān)蛋白TβRⅡ、Smad4的表達(dá);進(jìn)一步利用Western Blot技術(shù)檢測(cè)TGF-β1/Smads 通路相關(guān)蛋白 TGF-β1、TβRⅡ、Smad2/3、Smad4、Smad7 及凋亡相關(guān)蛋白Cleaved-Caspase3的表達(dá);利用Western Blot技術(shù)檢測(cè)加入人重組蛋白TGF-β1后,人參皂苷CK組的TGF-β1/Smads通路相關(guān)蛋白Smad2/3、Smad4和Smad7蛋白的表達(dá)。結(jié)果1.人參皂苷CK能降低人肝癌SMMC-7721細(xì)胞存活率,并且隨著藥物濃度...
【文章頁(yè)數(shù)】:50 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
前言
摘要
Abstract
中英文縮略語(yǔ)
第一章 材料
1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
1.3 實(shí)驗(yàn)抗體
1.4 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
第二章 方法
2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
2.2 MTT實(shí)驗(yàn)
2.3 Hoechst染色
2.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè)試驗(yàn)(Annexin V FITC/PI雙染)
2.5 免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測(cè)Smad4蛋白的表達(dá)
2.6 Western Blot檢測(cè)蛋白表達(dá)含量
2.6.1 提取細(xì)胞全蛋白
2.6.2 BCA法測(cè)定蛋白質(zhì)含量
2.6.3 Western blot法檢測(cè)蛋白的表達(dá)
2.7 數(shù)據(jù)處理及分析
第三章 結(jié)果
3.1 人參皂苷CK誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡的結(jié)果
3.1.1 MTT法檢測(cè)人參皂苷CK抑制人肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖的結(jié)果
3.1.2 Hoechst檢測(cè)人參皂苷CK誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡結(jié)果
3.1.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)人參皂苷CK誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡結(jié)果
3.1.4 Western Blot檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)結(jié)果
3.2 人參皂苷CK作用于人肝癌SMMC-7721細(xì)胞對(duì)其TGF-β1/Smads通路蛋白表達(dá)影響的結(jié)果
3.2.1 免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)Smad4蛋白表達(dá)的結(jié)果
3.2.2 Western blot檢測(cè)TGF-β1/Smads通路相關(guān)蛋白的表達(dá)結(jié)果
3.2.3 Western blot檢測(cè)人重組蛋白TGF-β1對(duì)人參皂苷CK抑制TGF-β1/Smads通路表達(dá)的影響結(jié)果
第四章 討論
第五章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Value of quality of life analysis in liver cancer: A clinician’s perspective[J]. Leung Li,Winnie Yeo. World Journal of Hepatology. 2017(20)
[2]TGF-β1對(duì)卵巢癌細(xì)胞A2780增殖及遷移侵襲的影響[J]. 陳雨龍,宋克娟,曹佃霞,呂騰,于曉敏,姚勤. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2017(14)
[3]肝癌肝移植的研究現(xiàn)狀和進(jìn)展[J]. 王峰,饒偉,臧運(yùn)金. 臨床外科雜志. 2017(03)
[4]原發(fā)性肝癌治療進(jìn)展[J]. 邵艷,管靜芝. 傳染病信息. 2016(04)
[5]乳腺癌TGF-β信號(hào)通路相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展[J]. 周雨晴,金敏,祖旭宇. 中華腫瘤防治雜志. 2016(15)
[6]人參皂苷CK轉(zhuǎn)化復(fù)合菌群的篩選及條件優(yōu)化[J]. 孫海明,倪萍,王宇星,石磊,鄧光敏,朱梅. 北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2016(04)
[7]人參皂苷CK誘導(dǎo)人肝癌HepG-2細(xì)胞凋亡的研究[J]. 劉榮榮,張璇,肖斌,張學(xué)武. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥. 2016(04)
[8]糖尿病腎病中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1/Sma和Mad相關(guān)蛋白信號(hào)通路的作用及其相關(guān)藥物研究進(jìn)展[J]. 賈會(huì)玉,李中南,陳光亮. 中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2016(03)
[9]人參皂苷CK對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞株的增殖抑制作用及其機(jī)制[J]. 王紅,鄧晶,劉珊,付鳳蓮,蔣永新. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2016(04)
[10]人參皂苷Rg3對(duì)H2O2誘導(dǎo)人腎小球系膜細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究[J]. 吳勝斌,王應(yīng)燈. 現(xiàn)代藥物與臨床. 2015(12)
碩士論文
[1]TGF-β/Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在肝癌發(fā)展過(guò)程中的動(dòng)態(tài)變化[D]. 馬冬杰.延邊大學(xué) 2013
本文編號(hào):3730123
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【學(xué)位級(jí)別】:碩士
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第一章 材料
1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
1.3 實(shí)驗(yàn)抗體
1.4 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
第二章 方法
2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
2.2 MTT實(shí)驗(yàn)
2.3 Hoechst染色
2.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè)試驗(yàn)(Annexin V FITC/PI雙染)
2.5 免疫細(xì)胞化學(xué)染色檢測(cè)Smad4蛋白的表達(dá)
2.6 Western Blot檢測(cè)蛋白表達(dá)含量
2.6.1 提取細(xì)胞全蛋白
2.6.2 BCA法測(cè)定蛋白質(zhì)含量
2.6.3 Western blot法檢測(cè)蛋白的表達(dá)
2.7 數(shù)據(jù)處理及分析
第三章 結(jié)果
3.1 人參皂苷CK誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡的結(jié)果
3.1.1 MTT法檢測(cè)人參皂苷CK抑制人肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖的結(jié)果
3.1.2 Hoechst檢測(cè)人參皂苷CK誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡結(jié)果
3.1.3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)人參皂苷CK誘導(dǎo)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞凋亡結(jié)果
3.1.4 Western Blot檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)結(jié)果
3.2 人參皂苷CK作用于人肝癌SMMC-7721細(xì)胞對(duì)其TGF-β1/Smads通路蛋白表達(dá)影響的結(jié)果
3.2.1 免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)Smad4蛋白表達(dá)的結(jié)果
3.2.2 Western blot檢測(cè)TGF-β1/Smads通路相關(guān)蛋白的表達(dá)結(jié)果
3.2.3 Western blot檢測(cè)人重組蛋白TGF-β1對(duì)人參皂苷CK抑制TGF-β1/Smads通路表達(dá)的影響結(jié)果
第四章 討論
第五章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Value of quality of life analysis in liver cancer: A clinician’s perspective[J]. Leung Li,Winnie Yeo. World Journal of Hepatology. 2017(20)
[2]TGF-β1對(duì)卵巢癌細(xì)胞A2780增殖及遷移侵襲的影響[J]. 陳雨龍,宋克娟,曹佃霞,呂騰,于曉敏,姚勤. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2017(14)
[3]肝癌肝移植的研究現(xiàn)狀和進(jìn)展[J]. 王峰,饒偉,臧運(yùn)金. 臨床外科雜志. 2017(03)
[4]原發(fā)性肝癌治療進(jìn)展[J]. 邵艷,管靜芝. 傳染病信息. 2016(04)
[5]乳腺癌TGF-β信號(hào)通路相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子研究進(jìn)展[J]. 周雨晴,金敏,祖旭宇. 中華腫瘤防治雜志. 2016(15)
[6]人參皂苷CK轉(zhuǎn)化復(fù)合菌群的篩選及條件優(yōu)化[J]. 孫海明,倪萍,王宇星,石磊,鄧光敏,朱梅. 北華大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2016(04)
[7]人參皂苷CK誘導(dǎo)人肝癌HepG-2細(xì)胞凋亡的研究[J]. 劉榮榮,張璇,肖斌,張學(xué)武. 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥. 2016(04)
[8]糖尿病腎病中轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1/Sma和Mad相關(guān)蛋白信號(hào)通路的作用及其相關(guān)藥物研究進(jìn)展[J]. 賈會(huì)玉,李中南,陳光亮. 中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志. 2016(03)
[9]人參皂苷CK對(duì)人肺腺癌A549細(xì)胞株的增殖抑制作用及其機(jī)制[J]. 王紅,鄧晶,劉珊,付鳳蓮,蔣永新. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2016(04)
[10]人參皂苷Rg3對(duì)H2O2誘導(dǎo)人腎小球系膜細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制研究[J]. 吳勝斌,王應(yīng)燈. 現(xiàn)代藥物與臨床. 2015(12)
碩士論文
[1]TGF-β/Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在肝癌發(fā)展過(guò)程中的動(dòng)態(tài)變化[D]. 馬冬杰.延邊大學(xué) 2013
本文編號(hào):3730123
本文鏈接:http://sikaile.net/yixuelunwen/zlx/3730123.html
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