目的:通過具有生物相容性的微濾膜和外周血循環(huán)單通道閉合環(huán)路裝置的結合來有效富集循環(huán)腫瘤細胞（circulating tumor cells,CTCs）。方法:使用均勻分布有直徑為10μm大小微孔的派瑞林微濾膜;采用肺癌H1975細胞系,以不同濃度混入健康受試者外周血,體外免疫熒光實驗檢測微濾膜對腫瘤細胞的捕獲率;進一步二代測序實驗驗證了基于微濾膜捕獲腫瘤細胞行基因突變檢測的敏感性。體內實驗在豬模型中,驗證該單通道閉合環(huán)路裝置的安全性。結果:使用微濾膜可以在肺癌H1975細胞系樣本中獲得85.00%的捕獲率。在一定的細胞濃度下,基于微濾膜捕獲的腫瘤細胞可有效實現基因突變的檢測,并且通過豬模型初步確定了裝置的安全性。結論:基于微濾膜的單通道閉合環(huán)路裝置是一種可實現高通量、高效的CTCs捕獲設備,為后續(xù)CTCs的高效富集及基于CTCs的相關分子生物學檢測、實時個體化治療的探索奠定了基礎。 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 實驗方法
        1.3.1 細胞培養(yǎng)
        1.3.2 微濾膜及腫瘤細胞加標 回收實驗(Spiking recovery)
        1.3.3 免疫熒光染色
        1.3.4 圖像分析和細胞計數
        1.3.5 二代測序分析
        1.3.6 動物體內實驗初步探索單通道閉合環(huán)路裝置的安全性
    1.4 統(tǒng)計學方法
2 結果
    2.1 微濾膜和單通道閉合環(huán)路裝置的構建
    2.2 基于微濾膜的細胞捕獲
    2.3 基于微濾膜捕獲細胞的二代測序分析
    2.4 經豬模型驗證微濾膜和單通道閉合環(huán)路裝置的安全性
3 討論



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