目的:通過(guò)具有生物相容性的微濾膜和外周血循環(huán)單通道閉合環(huán)路裝置的結(jié)合來(lái)有效富集循環(huán)腫瘤細(xì)胞（circulating tumor cells,CTCs）。方法:使用均勻分布有直徑為10μm大小微孔的派瑞林微濾膜;采用肺癌H1975細(xì)胞系,以不同濃度混入健康受試者外周血,體外免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測(cè)微濾膜對(duì)腫瘤細(xì)胞的捕獲率;進(jìn)一步二代測(cè)序?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證了基于微濾膜捕獲腫瘤細(xì)胞行基因突變檢測(cè)的敏感性。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)在豬模型中,驗(yàn)證該單通道閉合環(huán)路裝置的安全性。結(jié)果:使用微濾膜可以在肺癌H1975細(xì)胞系樣本中獲得85.00%的捕獲率。在一定的細(xì)胞濃度下,基于微濾膜捕獲的腫瘤細(xì)胞可有效實(shí)現(xiàn)基因突變的檢測(cè),并且通過(guò)豬模型初步確定了裝置的安全性。結(jié)論:基于微濾膜的單通道閉合環(huán)路裝置是一種可實(shí)現(xiàn)高通量、高效的CTCs捕獲設(shè)備,為后續(xù)CTCs的高效富集及基于CTCs的相關(guān)分子生物學(xué)檢測(cè)、實(shí)時(shí)個(gè)體化治療的探索奠定了基礎(chǔ)。 

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 實(shí)驗(yàn)方法
        1.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.3.2 微濾膜及腫瘤細(xì)胞加標(biāo) 回收實(shí)驗(yàn)(Spiking recovery)
        1.3.3 免疫熒光染色
        1.3.4 圖像分析和細(xì)胞計(jì)數(shù)
        1.3.5 二代測(cè)序分析
        1.3.6 動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)初步探索單通道閉合環(huán)路裝置的安全性
    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 微濾膜和單通道閉合環(huán)路裝置的構(gòu)建
    2.2 基于微濾膜的細(xì)胞捕獲
    2.3 基于微濾膜捕獲細(xì)胞的二代測(cè)序分析
    2.4 經(jīng)豬模型驗(yàn)證微濾膜和單通道閉合環(huán)路裝置的安全性
3 討論



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