背景:乳腺癌（Breast Cancer）是全球主要的公共衛(wèi)生問(wèn)題之一,也是女性最為常見(jiàn)的惡性腫瘤,且其發(fā)病率仍呈持續(xù)上升的趨勢(shì),嚴(yán)重威脅到全球女性的生命健康。根據(jù)2020年美國(guó)癌癥協(xié)會(huì)期刊《CA Cancer J Clin》發(fā)表的2020年全美腫瘤預(yù)估報(bào)告顯示,在美國(guó)女性腫瘤發(fā)生率的排名中,乳腺癌已經(jīng)超越肺癌成為首位。盡管近年來(lái)在基礎(chǔ)研究中取得了較大的進(jìn)展,但乳腺癌的防治仍是亟需解決的重要問(wèn)題。NUDT21是一種RNA結(jié)合蛋白,在多種生物反應(yīng)的調(diào)節(jié)中起著重要作用,且與腫瘤的發(fā)生發(fā)展息息相關(guān)。同時(shí)與乳腺癌細(xì)胞的增殖,侵襲和遷移以及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）的發(fā)生有著不可或缺的關(guān)系。探明NUDT21對(duì)乳腺癌發(fā)生發(fā)展的作用和機(jī)制可為乳腺癌的診斷和治療提供新思路,NUDT21也可能作為乳腺癌檢測(cè)的新標(biāo)志物。目的:探討NUDT21在乳腺癌中是否通過(guò)調(diào)節(jié)CPSF6抑制其發(fā)生發(fā)展;分析NUDT21對(duì)乳腺癌細(xì)胞的增殖,侵襲和遷移以及EMT的影響。方法:1)通過(guò)蛋白質(zhì)印跡（western blot）方法檢測(cè)NUDT21在乳腺癌細(xì)胞系,正常... 

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞匯
中文摘要
英文摘要
1.前言
2.材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)耗材與實(shí)驗(yàn)試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備
    2.3 主要抗體
    2.4 細(xì)胞株
    2.5 標(biāo)本來(lái)源
    2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物序列
    2.7 siRNA序列
    2.8 實(shí)驗(yàn)步驟
        2.8.1 免疫組織化學(xué)
        2.8.2 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.8.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)條件
            2.8.2.2 細(xì)胞復(fù)蘇
            2.8.2.3 細(xì)胞傳代
            2.8.2.4 細(xì)胞凍存
        2.8.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.8.4 Total RNA提取
        2.8.5 逆轉(zhuǎn)錄
        2.8.6 RT-qPCR
        2.8.7 Western blot
            2.8.7.1 SDS-PAGE凝膠制備
            2.8.7.2 蛋白制備
            2.8.7.3 蛋白上樣
            2.8.7.4 凝膠電泳
        2.8.8 細(xì)胞活力檢測(cè)
        2.8.9 細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)
        2.8.10 細(xì)胞遷移和侵襲實(shí)驗(yàn)
        2.8.11 免疫沉淀實(shí)驗(yàn)
        2.8.12 銀染實(shí)驗(yàn)
        2.8.13 DNA凝膠電泳鑒定
        2.8.14 切膠回收
        2.8.15 酶切
        2.8.16 連接
        2.8.17 細(xì)菌轉(zhuǎn)化與挑菌
        2.8.18 小劑量質(zhì)粒抽取
        2.8.19 中劑量質(zhì)粒抽取
    2.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 NUDT21在乳腺癌細(xì)胞系、正常乳腺上皮細(xì)胞及臨床組織樣本中的表達(dá)
    3.2 NUDT21對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖,遷移和侵襲的影響
        3.2.1 NUDT21 過(guò)表達(dá)對(duì)細(xì)胞內(nèi)NUDT21 蛋白表達(dá)水平和細(xì)胞功能的影響
        3.2.2 NUDT21 敲低對(duì)細(xì)胞內(nèi)NUDT21 蛋白表達(dá)水平和細(xì)胞功能的影響
    3.3 NUDT21 的表達(dá)在體外抑制乳腺癌細(xì)胞EMT過(guò)程
    3.4 質(zhì)譜分析揭示NUDT21和CPSF6 蛋白之間相互作用
    3.5 CPSF6的表達(dá)促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞中的細(xì)胞增殖,遷移和侵襲
    3.6 NUDT21 通過(guò)調(diào)控CPSF6 表達(dá)抑制乳腺癌細(xì)胞遷移和侵襲
4.討論
5.結(jié)論
6.展望
參考文獻(xiàn)
附錄 個(gè)人簡(jiǎn)歷
致謝
綜述 NUDT21在腫瘤中研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中原地區(qū)家族性乳腺癌BRCA1和BRCA2基因突變的臨床意義[J]. 程多,梁芳,張青松,霍彥平,張楠,郜輝,杜潔.  中國(guó)藥物經(jīng)濟(jì)學(xué). 2019(06)
[2]Snail介導(dǎo)的肺上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化在肌成纖維細(xì)胞活化中的作用[J]. 李思泠,朱鐘慧,李秋月,許春杰,趙靜,王炎,田琳.  首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2020(01)

碩士論文
[1]CPSF6在肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其作用機(jī)制[D]. 邵運(yùn)影.中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué) 2017



本文編號(hào)：3725165