背景:乳腺癌（Breast Cancer）是全球主要的公共衛(wèi)生問題之一,也是女性最為常見的惡性腫瘤,且其發(fā)病率仍呈持續(xù)上升的趨勢,嚴重威脅到全球女性的生命健康。根據(jù)2020年美國癌癥協(xié)會期刊《CA Cancer J Clin》發(fā)表的2020年全美腫瘤預估報告顯示,在美國女性腫瘤發(fā)生率的排名中,乳腺癌已經(jīng)超越肺癌成為首位。盡管近年來在基礎研究中取得了較大的進展,但乳腺癌的防治仍是亟需解決的重要問題。NUDT21是一種RNA結合蛋白,在多種生物反應的調(diào)節(jié)中起著重要作用,且與腫瘤的發(fā)生發(fā)展息息相關。同時與乳腺癌細胞的增殖,侵襲和遷移以及上皮間質(zhì)轉化（Epithelial-mesenchymal transition,EMT）的發(fā)生有著不可或缺的關系。探明NUDT21對乳腺癌發(fā)生發(fā)展的作用和機制可為乳腺癌的診斷和治療提供新思路,NUDT21也可能作為乳腺癌檢測的新標志物。目的:探討NUDT21在乳腺癌中是否通過調(diào)節(jié)CPSF6抑制其發(fā)生發(fā)展;分析NUDT21對乳腺癌細胞的增殖,侵襲和遷移以及EMT的影響。方法:1)通過蛋白質(zhì)印跡（western blot）方法檢測NUDT21在乳腺癌細胞系,正常... 

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞匯
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英文摘要
1.前言
2.材料與方法
    2.1 實驗耗材與實驗試劑
    2.2 實驗儀器設備
    2.3 主要抗體
    2.4 細胞株
    2.5 標本來源
    2.6 實時熒光定量PCR引物序列
    2.7 siRNA序列
    2.8 實驗步驟
        2.8.1 免疫組織化學
        2.8.2 細胞培養(yǎng)
            2.8.2.1 細胞培養(yǎng)條件
            2.8.2.2 細胞復蘇
            2.8.2.3 細胞傳代
            2.8.2.4 細胞凍存
        2.8.3 細胞轉染
        2.8.4 Total RNA提取
        2.8.5 逆轉錄
        2.8.6 RT-qPCR
        2.8.7 Western blot
            2.8.7.1 SDS-PAGE凝膠制備
            2.8.7.2 蛋白制備
            2.8.7.3 蛋白上樣
            2.8.7.4 凝膠電泳
        2.8.8 細胞活力檢測
        2.8.9 細胞克隆形成實驗
        2.8.10 細胞遷移和侵襲實驗
        2.8.11 免疫沉淀實驗
        2.8.12 銀染實驗
        2.8.13 DNA凝膠電泳鑒定
        2.8.14 切膠回收
        2.8.15 酶切
        2.8.16 連接
        2.8.17 細菌轉化與挑菌
        2.8.18 小劑量質(zhì)粒抽取
        2.8.19 中劑量質(zhì)粒抽取
    2.9 統(tǒng)計學分析
3.實驗結果
    3.1 NUDT21在乳腺癌細胞系、正常乳腺上皮細胞及臨床組織樣本中的表達
    3.2 NUDT21對乳腺癌細胞增殖,遷移和侵襲的影響
        3.2.1 NUDT21 過表達對細胞內(nèi)NUDT21 蛋白表達水平和細胞功能的影響
        3.2.2 NUDT21 敲低對細胞內(nèi)NUDT21 蛋白表達水平和細胞功能的影響
    3.3 NUDT21 的表達在體外抑制乳腺癌細胞EMT過程
    3.4 質(zhì)譜分析揭示NUDT21和CPSF6 蛋白之間相互作用
    3.5 CPSF6的表達促進乳腺癌細胞中的細胞增殖,遷移和侵襲
    3.6 NUDT21 通過調(diào)控CPSF6 表達抑制乳腺癌細胞遷移和侵襲
4.討論
5.結論
6.展望
參考文獻
附錄 個人簡歷
致謝
綜述 NUDT21在腫瘤中研究進展
    參考文獻


【參考文獻】：
期刊論文
[1]中原地區(qū)家族性乳腺癌BRCA1和BRCA2基因突變的臨床意義[J]. 程多,梁芳,張青松,霍彥平,張楠,郜輝,杜潔.  中國藥物經(jīng)濟學. 2019(06)
[2]Snail介導的肺上皮間質(zhì)轉化在肌成纖維細胞活化中的作用[J]. 李思泠,朱鐘慧,李秋月,許春杰,趙靜,王炎,田琳.  首都醫(yī)科大學學報. 2020(01)

碩士論文
[1]CPSF6在肝癌發(fā)生發(fā)展中的作用及其作用機制[D]. 邵運影.中國科學技術大學 2017



本文編號：3725165