目的SHP2（SH2 domain-containing protein-tyrosine phophatase-2）,是由ptpn11基因編碼的非受體酪氨酸磷酸酶,廣泛存在于真核生物細(xì)胞中。SHP2在乳腺癌,白血病,肺癌,肝癌,胃癌,胰腺癌和口腔癌等都被證實(shí)有相關(guān)性,并且在多種腫瘤相關(guān)的生命過程中有參與,例如細(xì)胞侵襲,遷移,凋亡,DNA損傷,細(xì)胞增殖,細(xì)胞周期和耐藥等。在多種腫瘤中都有證實(shí)癌細(xì)胞的增殖能力明顯強(qiáng)于正常細(xì)胞,腫瘤細(xì)胞增殖能力異常是患者難以治愈和死亡率高的主要原因之一。SHP2是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)具有磷酸酶活性的癌基因,同時(shí)其磷酸酶活性對腫瘤的影響也是學(xué)術(shù)界關(guān)注的焦點(diǎn)之一。本研究的目的是,通過體外實(shí)驗(yàn)明確SHP2及其磷酸酶活性對乳腺癌細(xì)胞增殖的影響,初步探索其分子機(jī)制,從而為深入的機(jī)制研究和乳腺癌的治療提供一些新的線索。方法1.通過細(xì)胞轉(zhuǎn)染在人乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231中構(gòu)建SHP2瞬時(shí)和穩(wěn)定降表達(dá)細(xì)胞系,在人乳腺癌細(xì)胞系BT549中構(gòu)建SHP2瞬時(shí)降表達(dá)細(xì)胞系,通過Western blot驗(yàn)證降表達(dá)結(jié)果。2.通過細(xì)胞功能學(xué)實(shí)驗(yàn)CCK8,克隆形成實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞技術(shù)明確下調(diào)... 

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

下調(diào)SHP2表達(dá)降低了乳腺癌細(xì)胞的增殖能力A-B：Westernblot驗(yàn)證SHP2小干擾RNA對MDA-MB-231和BT549細(xì)胞的

敲減SHP2降低了乳腺癌細(xì)胞的增殖能力A:載體pLKO.1-Hygro結(jié)構(gòu)

下調(diào)SHP2表達(dá)后，乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231和BT549中處于G2/M期的細(xì)胞比例增多，G2/M期阻滯

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Tyrosine 23 Phosphorylation of Annexin A2 Promotes Proliferation,Invasion,and Stat3 Phosphorylation in the Nucleus of Human Breast Cancer SK-BR-3 Cells[J]. Yu-qing Wang,Fei Zhang,Ran Tian,Wei Ji,Yan Zhou,Xiu-mei Sun,Yuan Liu,Zhi-yong Wang,Rui-fang Niu.  Cancer Biology ＆ Medicine. 2012(04)



本文編號：3723066