研究目的根據(jù)2014年世界衛(wèi)生組織發(fā)表的全球癌癥報(bào)告,全球癌癥患者和死亡病例都在急劇地增加,中國(guó)新增癌癥病例高居亞洲第一位。癌癥已成為人類最主要的致死疾病之一,化學(xué)療法是目前癌癥治療的主要手段,但是化療副作用及其并發(fā)癥給腫瘤病人的健康帶來(lái)了極大的威脅,因此為開(kāi)發(fā)具有高度特異性、更低副作用及更高效的抗腫瘤藥物提供新的靶標(biāo)和新的腫瘤治療策略顯得尤為重要。sirtuins家族蛋白因其與生物體的壽命相關(guān),并且是一類可能的新型抗腫瘤藥物靶點(diǎn)近年得到科學(xué)家們的廣泛關(guān)注。哺乳動(dòng)物sirtuins （SIRT1-7）是一類依賴于NAD+的Ⅲ型組蛋白去乙�；�。轉(zhuǎn)錄后修飾和表觀遺傳修飾在調(diào)控蛋白活性方面起著重要作用,而蛋白活性的改變可能導(dǎo)致生物體代謝活動(dòng)的變化,從而引起許多疾病,比如癌癥。就目前的研究來(lái)看,sirtuins家族的蛋白在調(diào)控腫瘤發(fā)生中扮演著重要角色。一方面,這類蛋白可能作為腫瘤抑制因子發(fā)揮著其生物學(xué)功能。另一方面,還有證據(jù)證明sirtuins也能促進(jìn)腫瘤發(fā)生。因此,有很多以sirtuins基因?yàn)榘悬c(diǎn)的化合物都涌現(xiàn)出來(lái)。在本研究中,我們使用了一種小分子化合物salermide,它是一種sir... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
符號(hào)說(shuō)明
前言
    1 肺癌
    2 腫瘤與組蛋白去乙�；�
    3 去乙�；讣易宓鞍譻irtuins
        3.1 sirtuins與衰老
        3.2 sirtuins與癌癥
    4 細(xì)胞自噬
        4.1 自噬概述
        4.2 細(xì)胞自噬與腫瘤
    5 細(xì)胞凋亡
        5.1 凋亡概述
        5.2 細(xì)胞凋亡與細(xì)胞自噬
    6 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與細(xì)胞凋亡和細(xì)胞自噬
        6.1 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與細(xì)胞自噬
        6.2 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與細(xì)胞凋亡
實(shí)驗(yàn)材料與方法
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 細(xì)胞系及細(xì)胞培養(yǎng)所需材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑及抗體
        1.3 siRNA
        1.4 質(zhì)粒
        1.5 主要實(shí)驗(yàn)設(shè)備及儀器
        1.6 實(shí)驗(yàn)所需主要溶液及試劑配方
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 轉(zhuǎn)染
        2.3 基因克隆
        2.4 免疫印跡
        2.5 免疫共沉淀
        2.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        2.7 統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    1 salermide誘導(dǎo)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞自噬
        1.1 salermide誘導(dǎo)細(xì)胞形成自噬小體
        1.2 salermide上調(diào)細(xì)胞中MAP1LC3B蛋白表達(dá)
        1.3 salermide誘導(dǎo)細(xì)胞形成自噬流
    2 抑制SIRT1/2促進(jìn)細(xì)胞自噬
        2.1 敲低SIRT1/2誘導(dǎo)細(xì)胞形成自噬小體
        2.2 敲低SIRT/2上調(diào)細(xì)胞中MAP1LC3B蛋白的表達(dá)
    3 抑制SIRT1/2抑制MTOR并上調(diào)ATF4、DDIT4
        3.1 salermide抑制MTOR信號(hào)通路并上調(diào)ATF4、DDIT4
        3.2 敲低SIRT1/2抑制MTOR信號(hào)通路并上調(diào)ATF4、DDIT4
    4 抑制SIRT1/2通過(guò)ATF4-DDIT4-MTOR信號(hào)通路誘導(dǎo)自噬
        4.1 敲低ATF4后抑制DDIT4的表達(dá)
        4.2 敲低DDIT4后恢復(fù)了MTOR信號(hào)通路
        4.3 過(guò)表達(dá)DDIT4促進(jìn)MAP1LC3B的表達(dá)
        4.4 敲低ATF4后抑制DDIT4并恢復(fù)MTOR信號(hào)通路
        4.5 敲低ATF4和DDIT4后抑制了自噬小體的形成
    5 抑制SIRT1/2使HSPA5乙�；⑴cEIF2AK3解離
        5.1 抑制SIRT1/2使HSPA5與EIF2AK3解離
        5.2 抑制SIRT1/2使HSPA5乙�；潭壬�
    6 HSPA5與SIRT1/2相互作用的結(jié)構(gòu)域
        6.1 HSPA5、SIRT1和SIRT2的結(jié)構(gòu)域
        6.2 HSPA5與SIRT1相互作用的結(jié)構(gòu)域
        6.3 HSPA5與SIRT2相互作用的結(jié)構(gòu)域
    7 抑制SLM誘導(dǎo)的細(xì)胞自噬促進(jìn)細(xì)胞凋亡
        7.1 敲低ATG5上調(diào)CASP8、CASP3、PARP1的表達(dá)
        7.2 敲低ATG5后凋亡細(xì)胞比例增加
討論
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Autophagy and cancer[J]. Si-Zhao Lu,Duygu Dee Harrison-Findik.  World Journal of Biological Chemistry. 2013(03)
[2]植物程序性細(xì)胞死亡檢測(cè)技術(shù)[J]. 徐昌杰,陳昆松,Hong Ding,IonaE.Weir,IanB.Ferguson.  遺傳. 2004(01)



本文編號(hào)：3706776