發(fā)布時(shí)間：2022-10-15 18:21

　　目的:明確HDAC4與miR-200a在胃癌組織中的表達(dá)情況,探討HDAC4/miR-200a反饋回路對(duì)胃癌細(xì)胞增殖、侵襲、轉(zhuǎn)移的影響,為胃癌的治療提供更多依據(jù),發(fā)現(xiàn)治療胃癌可能潛在的新靶點(diǎn)。方法:選取40例胃癌患者的癌組織及對(duì)應(yīng)的癌旁組織標(biāo)本,采用免疫組化方法檢測HDAC4的表達(dá)情況,同時(shí)利用熒光定量PCR技術(shù)檢測上述40例標(biāo)本中HDAC4的mRNA與miR-200a的表達(dá)情況。分別在BGC-823胃癌細(xì)胞系中使用質(zhì)粒上調(diào)HDAC4的表達(dá)、siRNA下調(diào)HDAC4的表達(dá),利用熒光定量PCR檢測miR-200a的表達(dá);使用慢病毒轉(zhuǎn)染上調(diào)miR-200a的表達(dá),并通過western-bolt檢測HDAC4的表達(dá)。通過western-bolt檢測分別檢測上述各組細(xì)胞ZEB1、ZEB2、上皮細(xì)胞標(biāo)志物E-鈣粘連蛋白（E-cadherin）與間質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物N-鈣粘連蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）的表達(dá)情況,使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒以及Cell Counting Kit-8試劑檢測細(xì)胞的增殖能力,transwell實(shí)驗(yàn)分別檢測胃癌細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移能力。所有實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)... 

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略詞表
第一章 前言
第二章 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 組織樣本與臨床資料
        2.1.2 細(xì)胞株
        2.1.3 質(zhì)粒
        2.1.4 siRNA
        2.1.5 慢病毒
        2.1.6 引物
        2.1.7 主要試劑
        2.1.8 實(shí)驗(yàn)儀器及設(shè)備
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 組織樣本與細(xì)胞的RNA提取
        2.2.2 反轉(zhuǎn)錄合成cDNA
        2.2.3 熒光定量PCR
        2.2.4 細(xì)胞培養(yǎng)、換液、傳代與凍存
        2.2.5 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.2.6 CCK-8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 EDU實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞增殖
        2.2.8 Transwell實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移
        2.2.9 Western bolt實(shí)驗(yàn)
        2.2.10 石蠟切片免疫組化染色實(shí)驗(yàn)
        2.2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第三章 結(jié)果
    3.1 胃癌組織與癌旁組織中HDAC4與miR-200a的表達(dá)
    3.2 HDAC4 調(diào)控miR-200a的表達(dá)
        3.2.1 下調(diào)HDAC4 的表達(dá)會(huì)增加mi R-200a的表達(dá)
        3.2.2 上調(diào)HDAC4 的表達(dá)會(huì)降低mi R-200a的表達(dá)
    3.3 HDAC4 誘導(dǎo)EMT
        3.3.1 下調(diào)HDAC4 的表達(dá)會(huì)抑制EMT
        3.3.2 上調(diào)HDAC4 的表達(dá)會(huì)誘導(dǎo)EMT
    3.4 HDAC4促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖
        3.4.1 下調(diào)HDAC4的表達(dá)會(huì)抑制胃癌細(xì)胞增殖
        3.4.2 上調(diào)HDAC4的表達(dá)會(huì)促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖
    3.5 .HDAC4促進(jìn)胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移
        3.5.1 .下調(diào)HDAC4的表達(dá)會(huì)抑制胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移
        3.5.2 .上調(diào)HDAC4的表達(dá)會(huì)促進(jìn)胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移
    3.6 .miR-200a調(diào)控HDAC4 的表達(dá)
    3.7 .miR-200a抑制EMT
    3.8 .miR-200a抑制胃癌細(xì)胞增殖
    3.9 .miR-200a抑制胃癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移
第四章 討論
第五章 結(jié)論
    5.1 主要結(jié)論
    5.2 研究展望
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
在學(xué)期間的研究成果
致謝



本文編號(hào)：3691804