研究背景和目的中國(guó)是食管癌高發(fā)國(guó)家,尤以食管鱗狀細(xì)胞癌最常見。化療抵抗是晚期食管鱗癌患者預(yù)后差的主要原因,順鉑是治療食管鱗癌經(jīng)典的化療藥物,因此提高食管鱗癌對(duì)順鉑的化療敏感性是治療晚期食管鱗癌的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。細(xì)胞死亡的減少是化療抵抗機(jī)制之一。近年研究表明,一些化療藥物可以誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞焦亡。細(xì)胞焦亡作為新型的細(xì)胞死亡形式,或許可以為化療敏感性的研究提供新的思路。我們前期研究發(fā)現(xiàn),MAGEA6在對(duì)化療抵抗的食管鱗癌組織中有著極高的表達(dá)。本課題旨在研究MAGEA6對(duì)食管鱗癌細(xì)胞順鉑化療敏感性的影響,并進(jìn)一步探究MAGEA6與細(xì)胞焦亡之間的關(guān)系,為尋找食管鱗癌潛在的治療靶點(diǎn)奠定理論基礎(chǔ)。研究?jī)?nèi)容和方法首先,通過分析TCGA數(shù)據(jù)庫以及收集臨床組織樣本檢測(cè)MAGEA6在食管鱗癌組織中的表達(dá)情況。然后,采用CCK8實(shí)驗(yàn)方法評(píng)估MAGEA6表達(dá)水平對(duì)食管鱗癌細(xì)胞順鉑化療敏感性的影響。通過轉(zhuǎn)染慢病毒人為地干擾食管鱗癌細(xì)胞中MAGEA6的表達(dá),再利用CCK8實(shí)驗(yàn)、顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)及Western blot實(shí)驗(yàn)來明確其與細(xì)胞焦亡的關(guān)系。接著,通過Western blot實(shí)驗(yàn)、qRT-PCR、雙熒光素... 

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
第一章 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞系
    1.2 組織樣本來源
    1.3 慢病毒、質(zhì)粒
    1.4 主要試劑
    1.5 主要儀器
    1.6 相關(guān)試劑的配置
第二章 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)、傳代、凍存與復(fù)蘇
    2.2 穩(wěn)定表達(dá)株的建立
    2.3 細(xì)胞焦亡形態(tài)的觀察
    2.4 雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)
    2.5 CCK8檢測(cè)細(xì)胞活力
    2.6 qRT-PCR
    2.7 細(xì)胞總蛋白提取
    2.8 BCA法測(cè)定蛋白濃度
    2.9 免疫印跡(Western blot)
    2.10 裸鼠皮下成瘤模型
    2.11 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第三章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 MAGEA6在食管鱗癌組織,尤其是對(duì)化療抵抗的食管鱗癌組織中高表達(dá)
    3.2 MAGEA6抑制細(xì)胞焦亡而增加順鉑化療抵抗
    3.3 MAGEA6抑制細(xì)胞焦亡是通過抑制Caspase-1的轉(zhuǎn)錄活性
    3.4 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)干擾MAGEA6表達(dá)可以增加食管鱗癌順鉑化療敏感性
第四章 討論
第五章 全文小結(jié)
參考文獻(xiàn)
中英文縮略詞對(duì)照表
在讀期間發(fā)表論文情況
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2015年中國(guó)惡性腫瘤流行情況分析[J]. 鄭榮壽,孫可欣,張思維,曾紅梅,鄒小農(nóng),陳茹,顧秀瑛,魏文強(qiáng),赫捷.  中華腫瘤雜志. 2019 (01)



本文編號(hào)：3686112