目的:口腔鱗狀細(xì)胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）是全世界最常見的惡性腫瘤之一。自噬作為一種重要的非選擇性降解機(jī)制,可以通過維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和細(xì)胞代謝以及細(xì)胞活力影響腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。CircCDR1as作為促癌基因在癌癥中的作用已經(jīng)被證實(shí),但是circCDR1as在OSCC中對自噬的調(diào)控機(jī)制尚未明確。本研究旨在探討circCDR1as與OSCC細(xì)胞自噬的潛在性機(jī)制。方法:1、采用免疫組化檢測57對OSCC組織和癌旁組織中低氧誘導(dǎo)因子和自噬相關(guān)蛋白的表達(dá),并分析它們的相關(guān)性;采用低氧處理Tca-8113細(xì)胞后,應(yīng)用Western blot、免疫熒光和透射電鏡的方法檢測低氧條件對細(xì)胞自噬和細(xì)胞凋亡的影響。2、構(gòu)建 circCDR1as環(huán)狀過表達(dá)真核載體,在OSCC細(xì)胞系Tca-8113中過表達(dá)circCDR1as;經(jīng)低氧干預(yù)、雷帕霉素或3-MA處理后,應(yīng)用RT-PCR、Western blot和免疫熒光實(shí)驗(yàn)檢測細(xì)胞自噬變化和circCDR1as表達(dá)變化,評價circCDR1as對低氧介導(dǎo)的自噬的調(diào)控作用。3、在低氧條件下,采用CCK-8和細(xì)胞流式儀通過... 

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
材料與方法
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 細(xì)胞系與組織樣本
        1.2 PCR所需引物
        1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        1.4 主要生化試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 實(shí)時定量聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)
        2.3 透射電鏡
        2.4 Western Blotting
        2.5 免疫組化
        2.6 免疫熒光
        2.7 CCK-8測定
        2.8 流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡
        2.9 ROS檢測
        2.10 雙熒光素酶報告實(shí)驗(yàn)
        2.11 裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)
        2.12 生物信息學(xué)分析
        2.13 統(tǒng)計(jì)分析
結(jié)果
    1 低氧微環(huán)境促進(jìn)OSCC中自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)水平
    2 CircCDR1as促進(jìn)OSCC細(xì)胞中低氧介導(dǎo)的自噬
    3 CircCDR1as調(diào)節(jié)OSCC細(xì)胞自噬和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激促進(jìn)細(xì)胞存活
    4 低氧微環(huán)境下circCDR1as對自噬相關(guān)通路的影響
    5 CircCDR1as作為miR-671-5p的吸附海綿促進(jìn)細(xì)胞自噬
    6 CircCDR1as促進(jìn)裸鼠體內(nèi)OSCC腫瘤的生長
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表
致謝



本文編號：3683901