目的:肺癌是我國最普遍的惡性腫瘤之一,其致死率居首位。肺癌分為兩大亞型:小細胞肺癌（small cell lung cancer）和非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）,其中NSCLC約占原發(fā)性肺癌的85%,NSCLC主要包括鱗狀上皮細胞癌、腺癌和大細胞癌,肺腺癌是NSCLC最常見的亞型,由于缺乏特異敏感的早期診斷方法和有效的治療方法,肺癌5年生存率較低。據(jù)估計,如果所有分期的肺癌患者合并統(tǒng)計,肺腺癌生存率只有18%。因而,需要篩選新的肺腺癌相關基因來提供有效的治療靶點。P21活化激酶5（PAK5）于2002年首次被克隆,并被鑒定為一種腦特異性激酶,參與了神經(jīng)細胞中纖維蛋白的形成。PAK5是P21活化激酶（PAKs）家族最新發(fā)現(xiàn)的成員,定位于線粒體和細胞核內,PAK5基因位于人類染色體20p12上,編碼相對分子質量80kDa蛋白。自從在腦神經(jīng)元細胞中發(fā)現(xiàn)PAK5以來,越來越多的證據(jù)表明PAK5是腫瘤進展的重要介質。PAK5目前已被證實在多種腫瘤中高表達,調節(jié)腫瘤細胞骨架改變、抗凋亡、促進腫瘤細胞侵襲、遷移和增殖等。目前PAK5在肺腺癌中的表達... 

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
材料與方法
    1 材料
        1.1 細胞株及培養(yǎng)基
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器設備及耗材
        1.4 主要試劑的制備
    2 組織標本
    3 免疫組織化學
    4 細胞培養(yǎng)
        4.1 細胞復蘇
        4.2 細胞傳代
        4.3 細胞凍存
        4.4 細胞計數(shù)
    5 A549細胞PAK5基因沉默株構建
        5.1 PAK5 RNA干擾慢病毒載體的構建和包裝
        5.2 慢病毒轉染方法
    6 Western Blot實驗
        6.1 提取細胞蛋白
        6.2 Western Blot
    7 細胞增殖實驗(CCK8實驗)
        7.1 制備細胞懸液
        7.2 細胞計數(shù)
        7.3 96孔板接種細胞
    8 細胞劃痕愈合實驗
    9 Transwell侵襲實驗
    10 統(tǒng)計學處理
結果
    1 肺腺癌組織和癌旁組織中PAK5表達情況
    2 PAK5蛋白的表達水平與患者臨床病理特征的關系
    3 PAK5蛋白的表達水平與患者預后的關系
    4 A549細胞PAK5基因沉默株成功構建
    5 PAK5基因沉默對A549細胞增殖能力的影響
    6 PAK5基因沉默對A549細胞遷移、侵襲能力的影響
討論
結論
參考文獻
綜述
    綜述參考文獻
攻讀學位期間的研究成果
縮略詞表
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Group Ⅱ p21-activated kinases as therapeutic targets in gastrointestinal cancer[J]. Yang-Guang Shao,Ke Ning,Feng Li.  World Journal of Gastroenterology. 2016(03)



本文編號：3680249