目的本研究通過(guò)觀察不同狀態(tài)的維生素D受體對(duì)于前列腺癌細(xì)胞惡性表型的影響以及Wnt/β-catenin信號(hào)通路各指標(biāo)表達(dá)情況,從細(xì)胞水平研究維生素D受體調(diào)控Wnt/β-catenin信號(hào)通路參與前列腺癌發(fā)生發(fā)展機(jī)制。方法構(gòu)建敲低VDR基因的重組質(zhì)粒載體;聯(lián)合兩個(gè)包裝質(zhì)粒ps PAX2和p MD2.G,采用PEI介導(dǎo)三質(zhì)粒系統(tǒng)轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,包裝敲低表達(dá)VDR的慢病毒,構(gòu)建敲低表達(dá)VDR和表達(dá)隨機(jī)序列的細(xì)胞模型。分組:DU145細(xì)胞組、隨機(jī)序列對(duì)照組、敲低VDR基因組;用劃痕實(shí)驗(yàn)、Western-blot分別檢測(cè)細(xì)胞的遷移能力、凋亡變化及β-catenin含量變化。結(jié)果1成功構(gòu)建敲低VDR的前列腺癌細(xì)胞DU145模型和攜帶隨機(jī)序列的對(duì)照細(xì)胞模型。2敲低VDR基因促進(jìn)了DU145細(xì)胞的遷移能力:在劃痕24h后觀測(cè)并計(jì)算發(fā)現(xiàn),敲低VDR基因組細(xì)胞修復(fù)比例為（0.58±0.07）,隨機(jī)序列對(duì)照組修復(fù)比例為（0.18±0.03）,DU145細(xì)胞組修復(fù)比例為（0.21±0.02）,敲低VDR基因組的細(xì)胞遷移能力明顯高于DU145細(xì)胞組和隨機(jī)序列對(duì)照組,修復(fù)比例大于DU145細(xì)胞組和隨機(jī)序列對(duì)照組（... 

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
引言
第1章 實(shí)驗(yàn)研究
    1.1 主要實(shí)驗(yàn)材料與方法
        1.1.1 主要實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)分組
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)方法和步驟
        1.1.4 統(tǒng)計(jì)方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 敲低組(LV-SHVDR)重組質(zhì)粒構(gòu)建成功
        1.2.2 G418濃度篩選成功
        1.2.3 成功構(gòu)建敲低VDR基因的DU145細(xì)胞模型及對(duì)照模型
        1.2.4 敲低VDR基因促進(jìn)了DU145細(xì)胞的遷移
        1.2.5 敲低VDR基因抑制了DU145細(xì)胞的凋亡
        1.2.6 敲低VDR基因促進(jìn)了DU145 細(xì)胞β-catenin含量的表達(dá)
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
參考文獻(xiàn)
結(jié)論
第2章 綜述 維生素D受體及Wnt/β-catenin信號(hào)通路與前列腺癌研究進(jìn)展
    2.1 前列腺癌流行病學(xué)
    2.2 維生素D受體與前列腺癌
    2.3 Wnt/β-catenin信號(hào)通路與前列腺癌
    2.4 維生素D受體與Wnt/β-catenin信號(hào)通路
    2.5 小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間研究成果



本文編號(hào)：3668618