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去甲腎上腺素通過(guò)PI3K/Akt信號(hào)通路上調(diào)Sox4表達(dá)促進(jìn)肝癌細(xì)胞增殖

發(fā)布時(shí)間:2022-08-01 18:55
  目的探討去甲腎上腺素對(duì)肝癌細(xì)胞自我更新能力的影響及其分子機(jī)制。方法實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot檢測(cè)去甲腎上腺素對(duì)肝癌細(xì)胞(Huh7、PLC)中CD133表達(dá)水平的影響;腫瘤細(xì)胞球形成實(shí)驗(yàn)以及克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)去甲腎上腺素和哌唑嗪對(duì)肝癌細(xì)胞自我更新能力的作用;實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot檢測(cè)去甲腎上腺素(10μmol/L)和哌唑嗪(5μmol/L)對(duì)肝癌細(xì)胞中干性相關(guān)基因表達(dá)的影響,并檢測(cè)相關(guān)的信號(hào)通路。結(jié)果去甲腎上腺素使Huh7和PLC肝癌細(xì)胞中的CD133表達(dá)升高;去甲腎上腺素處理Huh7和PLC肝癌細(xì)胞后的成球率較對(duì)照組明顯上升,哌唑嗪處理后明顯降低(P<0.05);在克隆形成實(shí)驗(yàn)中,去甲腎上腺素處理Huh7和PLC肝癌細(xì)胞的后,克隆形成率高于哌唑嗪組和對(duì)照組(P<0.05);與對(duì)照組和哌唑嗪組相比,去甲腎上腺素組中Sox4基因表達(dá)明顯升高,同時(shí)p-Akt表達(dá)相較于哌唑嗪和對(duì)照組相比也明顯上調(diào)(P<0.05)。結(jié)論去甲腎上腺素激動(dòng)肝癌細(xì)胞中α腎上腺素能受體,通過(guò)激活PI3K/Akt信號(hào)通路上調(diào)肝癌細(xì)胞中Sox4基因表達(dá),從而提高肝癌細(xì)... 

【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)及去甲腎上腺素和哌唑嗪處理
        1.2.2 蛋白質(zhì)提取以及Western blot檢測(cè)
        1.2.3 細(xì)胞總RNA提取、反轉(zhuǎn)錄及實(shí)時(shí)定量熒光PCR檢測(cè)
        1.2.4 腫瘤細(xì)胞球形成實(shí)驗(yàn)
        1.2.5 腫瘤細(xì)胞克隆形成實(shí)驗(yàn)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 去甲腎上腺素促進(jìn)肝癌細(xì)胞表達(dá)CD133
    2.2 去甲腎上腺素促進(jìn)肝癌細(xì)胞成球
    2.3 去甲腎上腺素提高肝癌細(xì)胞克隆形成能力
    2.4 去甲腎上腺素通過(guò)PI3K/Akt信號(hào)通路促進(jìn)肝癌細(xì)胞中Sox4的表達(dá)
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本文編號(hào):3667994

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