目的:探討雷帕霉素體外對急性單核細(xì)胞白血病SHI-1細(xì)胞體外增殖、凋亡的作用以及裸鼠皮下腫瘤的治療作用。方法:1、以人來源的急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞株為研究對象,實(shí)驗(yàn)分組為陰性對照組及雷帕霉素組（終濃度分別為:5uM,10uM,20uM）。CCK8法檢測不同濃度雷帕霉素在不同時間對SHI-1增殖的作用。用不同濃度的雷帕霉素處理SHI-1細(xì)胞,24小時后,Annexin/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡。5uM雷帕霉素處理SHI-1細(xì)胞24小時,檢測凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3以及CAV1蛋白表達(dá)變化。2、以裸鼠為實(shí)驗(yàn)動物,將5×10~6個SHI-1細(xì)胞接種于裸鼠皮下,皮下成瘤后隨機(jī)分為兩組,每組6只,第一組為對照組,第二組為治療組,皮下成瘤后第10天開始瘤體內(nèi)注射雷帕霉素（10mg/kg）,連續(xù)5天,于治療后第1、5及10天測量腫瘤大小。結(jié)果:1、CCK8檢測結(jié)果顯示24h時5uM,10uM,20uM的雷帕霉素對SHI-1細(xì)胞增殖抑制率分別為:24.62±2.20%,49.63±2.96%,66.02±1.68%;48h時增殖抑制率分別為:43.5±3.51,%,65.1±2... 

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略詞表
第1章 引言
第2章 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 細(xì)胞系
    2.2 實(shí)驗(yàn)動物
    2.3 主要儀器和設(shè)備
    2.4 主要試劑及配制
        2.4.1 主要試劑
        2.4.2 主要試劑的配置
第3章 實(shí)驗(yàn)方法及步驟
    3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.1.1 細(xì)胞復(fù)蘇
        3.1.2 細(xì)胞換液
        3.1.3 細(xì)胞傳代
        3.1.4 細(xì)胞凍存
    3.2 雷帕霉素體外抑制白血病細(xì)胞的作用
        3.2.1 檢測不同處理組細(xì)胞增殖抑制率
        3.2.2 檢測不同處理組細(xì)胞凋亡率
        3.2.3 檢測不同處理組蛋白表達(dá)水平
    3.3 雷帕霉素體內(nèi)對SHI-1 細(xì)胞的作用
        3.3.1 SHI-1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
        3.3.2 實(shí)驗(yàn)動物
        3.3.3 裸鼠皮下接種SHI-1 細(xì)胞
    3.4 統(tǒng)計(jì)方法
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 各處理組增殖抑制率
    4.2 各處理組凋亡比例
    4.3 各處理組蛋白表達(dá)水平
    4.4 雷帕霉素體內(nèi)抑制SHI-1 細(xì)胞增殖
        4.4.1 構(gòu)建裸鼠皮下瘤
        4.4.2 雷帕霉素裸鼠瘤體內(nèi)治療
第5章 討論
    5.1 雷帕霉素對急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞體外作用
    5.2 雷帕霉素對急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞體內(nèi)作用
第6章 結(jié)論與展望
    6.1 結(jié)論
    6.2 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3665707