發(fā)布時間：2022-07-23 14:14

　　乳腺癌是女性發(fā)病率最高的癌癥,也是造成女性癌癥死亡的主要要原因。近年來,針對乳腺癌的研究雖然取得了很大程度上的進(jìn)展,但是仍存在很多難以解決的問題。探尋新的乳腺癌的發(fā)病機制和轉(zhuǎn)移途徑,找到新的調(diào)控乳腺癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵分子,從而降低乳腺癌的發(fā)病率和死亡率,是我國目前亟待解決的問題。Ras抑制蛋白1（Ras suppressor 1,RSU1）是一個高度保守的蛋白質(zhì),從抑制Ras癌基因轉(zhuǎn)化能力的表達(dá)克隆實驗中首次分離出來而命名。RSU1通過LRR結(jié)構(gòu)域以高親和力與PINCH1的LIM5結(jié)構(gòu)域相結(jié)合,與ILK-PINCH-Parvin形成IPPR復(fù)合物,并定位于細(xì)胞-細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix,ECM）黏附,在肌動蛋白細(xì)胞骨架重塑中發(fā)揮重要作用。有研究報道RSU1缺失引起細(xì)胞黏附和遷移的變化,負(fù)向調(diào)控腫瘤的增殖和轉(zhuǎn)移。然而,同時也有研究表明RSU1缺失或突變可通過降低PTEN信號傳導(dǎo)或改變JNK活性而有助于癌癥的發(fā)生和發(fā)展。RSU1廣泛存在于各種細(xì)胞中,我們的前期研究發(fā)現(xiàn),RSU1全身性基因敲除導(dǎo)致小鼠在胚胎發(fā)育過程中致死。在過去的研究中,由于缺乏合適的動物模型,對R... 

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 緒論
    1.1 本課題的研究意義
    1.2 乳腺癌現(xiàn)狀
    1.3 RSU1的生物學(xué)功能和其在人類疾病中的作用
    1.4 RSU1在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用的研究
    1.5 本課題的研究內(nèi)容
第2章 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗細(xì)胞、菌株、抗體、質(zhì)粒、引物、動物等
        2.1.2 實驗試劑與試劑盒
        2.1.3 實驗儀器
        2.1.4 主要分析軟件
    2.2 實驗方法
        2.2.1 常規(guī)實驗方法
        2.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染
        2.2.3 構(gòu)建細(xì)胞體系
        2.2.4 懸浮、黏附細(xì)胞培養(yǎng)實驗
        2.2.5 Colony Formation增殖實驗
        2.2.6 Agar Formation增殖實驗
        2.2.7 細(xì)胞遷移實驗
        2.2.8 蛋白質(zhì)免疫印跡(Western blotting)
        2.2.9 小鼠基因型鑒定(genotyping)
        2.2.10 小鼠成瘤實驗
        2.2.11 組織包埋切片
        2.2.12 免疫組織化學(xué)分析(immunohistochemistry)
        2.2.13 蘇木精—伊紅(H&E)染色
第3章 RSU1對乳腺癌細(xì)胞的影響
    3.1 引言
    3.2 敲除RSU1乳腺腫瘤細(xì)胞株的構(gòu)建
    3.3 RSU1缺失對細(xì)胞遷移的影響
    3.4 RSU1缺失對細(xì)胞克隆形成的影響
    3.5 RSU1對MAPK信號通路的調(diào)控
    3.6 本章小結(jié)
第4章 腫瘤細(xì)胞微環(huán)境中RSU1缺失對腫瘤生長的影響
    4.1 引言
    4.2 內(nèi)皮敲除RSU1小鼠模型的構(gòu)建
    4.3 微環(huán)境(內(nèi)皮組織)中RSU1缺失對肺癌腫瘤生長的影響
    4.4 細(xì)胞微環(huán)境(內(nèi)皮組織)RSU1缺失對肺癌腫瘤轉(zhuǎn)移的影響
    4.5 本章小結(jié)
結(jié)論
    總結(jié)與討論
    不足
    展望
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3665288