目的:通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)觀察黃連素聯(lián)合順鉑對人肺癌耐藥細(xì)胞A549/DDP增殖和凋亡的影響,探討黃連素聯(lián)合順鉑誘導(dǎo)人肺癌耐藥細(xì)胞A549/DDP的凋亡可行性及其相關(guān)機(jī)制。方法:以A549/DDP細(xì)胞為研究對象,分別加入12μg/m L的順鉑、濃度為20μmol/L、40μmol/L、80μmol/L的黃連素+12μg/m L的順鉑,設(shè)置空白對照孔（PBS孔）,分別用藥物干預(yù)24h、48h、72h,采用MTT法檢測細(xì)胞增殖活性;各組用藥干預(yù)48h后,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡,Western blot法檢測Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl-2的蛋白表達(dá)情況,Real-time PCR法檢測Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl-2的m RNA表達(dá)水平。結(jié)果:（1）作用24h,與PBS組對比,低中高濃度黃連素聯(lián)合順鉑組、順鉑組之間的A549/DDP細(xì)胞吸光值均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）;隨著黃連素濃度增加,其吸光值逐漸降低,抑制率逐漸增高,但各組之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;作用48h、72h,中、高濃度黃連素聯(lián)合順鉑組與PBS組、順鉑組、低濃度黃連素聯(lián)... 

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
引言
縮寫詞對照表
第一部分 實(shí)驗(yàn)材料及儀器
    1.1 細(xì)胞株
    1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑及溶液調(diào)配
        1.2.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        1.2.2 溶液調(diào)配
    1.3 主要儀器和設(shè)備
第二部分 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)分組
    2.2 細(xì)胞培養(yǎng)及傳代
    2.3 MTT法檢測細(xì)胞增殖
    2.4 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡
    2.5 Western blot檢測蛋白表達(dá)
    2.6 RT-PCR法檢測Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2、Bax的mRNA水平
    2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第三部分 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 MTT法檢測細(xì)胞增值
    3.2 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡
    3.3 Western blot檢測蛋白表達(dá)
    3.4 RT-PCR法檢測Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2、Bax的mRNA水平
第四部分 結(jié)論
第五部分 討論
    5.1 中醫(yī)對肺癌的認(rèn)識
        5.1.1 病名
        5.1.2 病因病機(jī)
        5.1.3 辨證論治
    5.2 中藥逆轉(zhuǎn)肺癌耐藥細(xì)胞A549/DDP的研究
    5.3 黃連素聯(lián)合順鉑逆轉(zhuǎn)腫瘤耐藥的研究
    5.4 Bcl-2家族調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡的機(jī)制
        5.4.1 Bcl-2蛋白抗凋亡機(jī)制
        5.4.2 Bax蛋白促凋亡機(jī)制
        5.4.3 Bcl-2與Bax在腫瘤耐藥細(xì)胞中的表達(dá)
    5.5 Caspase家族蛋白在細(xì)胞凋亡中的影響
    5.6 總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Yangfei Kongliu Formula, a compound Chinese herbal medicine, combined with cisplatin, inhibits growth of lung cancer cells through transforming growth factor-β1 signaling pathway[J]. Shui-jie Shen,Yong-hong Zhang,Xiao-xia Gu,Shui-ju Jiang,Ling-jun Xu.  Journal of Integrative Medicine. 2017(03)
[2]人參皂苷Rh2對人肝癌細(xì)胞HepG2/ADM耐藥逆轉(zhuǎn)作用及其機(jī)制研究[J]. 吳艷林,劉潤田.  醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào). 2017(05)
[3]Berberine displays antitumor activity in esophageal cancer cells in vitro[J]. Shu-Xian Jiang,Bo Qi,Wen-Jian Yao,Cheng-Wei Gu,Xiu-Feng Wei,Yi Zhao,Yu-Zhen Liu,Bao-Sheng Zhao.  World Journal of Gastroenterology. 2017(14)
[4]補(bǔ)中益氣湯含藥血清干預(yù)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化對A549/DDP細(xì)胞凋亡的影響[J]. 周琳,于丹,劉春英.  中華中醫(yī)藥雜志. 2017(04)
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[7]苦參素逆轉(zhuǎn)結(jié)腸癌細(xì)胞多藥耐藥作用及機(jī)制研究[J]. 鐘自強(qiáng),黃桂柳,黃贊松,蘇建偉,周喜漢.  右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2017(01)
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[9]益肺湯對人肺腺癌耐順鉑細(xì)胞株移植瘤裸鼠P-gp基因表達(dá)和免疫功能影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 凌仕良,欒智宇,張小玲,山廣志,劉帆.  新中醫(yī). 2016(11)
[10]補(bǔ)中益氣湯對A549/DDP與A549荷瘤BALB/c小鼠移植瘤生長的影響[J]. 高原,王瑩,陳奇,井歡,于丹,潘茜,王哲,劉春英.  中國老年學(xué)雜志. 2016(19)

博士論文
[1]培土生金法對A549/DDP細(xì)胞及其荷瘤裸鼠體內(nèi)P-gp及LRP蛋白影響的研究[D]. 李璐璐.遼寧中醫(yī)藥大學(xué) 2015
[2]β-欖香烯逆轉(zhuǎn)人肺腺癌A549/DDP細(xì)胞株的耐藥性及可能機(jī)制的初步探討[D]. 姚成才.福建醫(yī)科大學(xué) 2014

碩士論文
[1]六君子湯含藥血清對A549/DDP細(xì)胞E-cadherin和N-cadherin表達(dá)的影響[D]. 甄芳.遼寧中醫(yī)藥大學(xué) 2017
[2]柚皮苷逆轉(zhuǎn)人卵巢癌耐藥細(xì)胞SKOV3/DDP耐藥性及逆轉(zhuǎn)機(jī)制的研究[D]. 王磊.南昌大學(xué) 2016
[3]黃連素對人結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡和遷移作用的研究[D]. 陳彬彬.廈門大學(xué) 2014
[4]重樓皂苷Ⅶ對耐順鉑人肺腺癌A549/DDP細(xì)胞增殖抑制作用的研究[D]. 郝杰.吉林大學(xué) 2012



本文編號：3658774