目的:膀胱癌是最常見(jiàn)的泌尿系統(tǒng)癌癥,每年新發(fā)病例以及死亡病例在不斷上升。膀胱癌的診斷主要是基于膀胱與尿路細(xì)胞學(xué)的檢查,因診斷的敏感度較低,因此許多患者在患癌早期難以察覺(jué)。從基因水平探索基因表達(dá)變化與膀胱癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系可能會(huì)為膀胱癌診斷以及開(kāi)發(fā)靶向藥物提供新的方向,為尋找非侵入性,敏感性和特異性高的檢查方法提供新思路。蛋白質(zhì)精氨酸甲基轉(zhuǎn)移酶（protein arginine methyltransferase,PRMTs）參與生物體的多項(xiàng)生理進(jìn)程。PRMT5具有保守的甲基轉(zhuǎn)移酶催化結(jié)構(gòu),在多種類型的細(xì)胞中廣泛存在,而在不同的細(xì)胞中其含量水平又不盡相同。PRMT5催化的甲基化修飾在許多細(xì)胞中都發(fā)揮重要作用,其異常表達(dá)影響多種類型惡性腫瘤的發(fā)展。PRMT5發(fā)揮其生物學(xué)功能主要的方式有兩種,其一是表觀遺傳調(diào)控靶基因的表達(dá)。其二是通過(guò)甲基化作用,直接修飾細(xì)胞中關(guān)鍵的信號(hào)分子。本次研究我們將探究PRMT5在膀胱腫瘤中的表達(dá)模式及臨床病理意義。并分別通過(guò)體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)分析PRMT5表達(dá)水平變化對(duì)膀胱癌產(chǎn)生的影響及其潛在的分子機(jī)制。研究方法:1.免疫組織化學(xué):80例膀胱癌組織（病理類型為移行細(xì)胞癌）以及... 

【文章頁(yè)數(shù)】：94 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
第一部分 :PRMT5在膀胱癌組織及細(xì)胞中的表達(dá)及臨床意義
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑及生產(chǎn)商
        2.2 主要儀器及生產(chǎn)商
        2.3 實(shí)驗(yàn)方法
            2.3.1 免疫組織化學(xué)
            2.3.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
            2.3.3 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.3.4 Western blot
        2.4 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果
        3.1 PRMT5在膀胱癌組織中高表達(dá)
        3.2 PRMT5在膀胱癌細(xì)胞系中高表達(dá)
        3.3 PRMT5表達(dá)異常與膀胱癌患者的生存相關(guān)
        3.4 PRMT5表達(dá)水平與膀胱癌病理T分期顯著相關(guān)
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 :PRMT5 通過(guò)NF-κB信號(hào)通路促進(jìn)膀胱癌增殖,抑制膀胱癌凋亡
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑及生產(chǎn)商
        2.2 主要儀器及生產(chǎn)商
        2.3 實(shí)驗(yàn)步驟
            2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.3.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染與干擾
            2.3.3 Western blot
            2.3.4 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
            2.3.5 細(xì)胞增殖和集落形成實(shí)驗(yàn)
            2.3.6 細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)
            2.3.7 線粒體膜電位JC-1實(shí)驗(yàn)
            2.3.8 熒光素酶檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
            2.3.9 CHIP實(shí)驗(yàn)
        2.4 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果
        3.1 PRMT5促進(jìn)膀胱癌細(xì)胞增殖
        3.2 PRMT5抑制膀胱癌細(xì)胞凋亡并上調(diào)線粒體膜電位
        3.3 抑制PRMT5 上調(diào)膀胱癌Cleaved-caspase3 蛋白表達(dá)水平
        3.4 下調(diào)PRMT5 抑制NF-κB活性及其靶基因表達(dá)
    4 討論
    5 結(jié)論
第三部分 :PRMT5促進(jìn)膀胱細(xì)胞小鼠移植瘤的形成與機(jī)制
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 主要試劑及生產(chǎn)商
        2.2 主要儀器及生產(chǎn)商
        2.3 實(shí)驗(yàn)步驟
            2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.3.2 小鼠腫瘤模型構(gòu)建
            2.3.3 實(shí)時(shí)熒光定量PCR
        2.4 統(tǒng)計(jì)分析
    3 結(jié)果
        3.1 膀胱癌細(xì)胞T24培養(yǎng)情況
        3.2 PRMT5促進(jìn)膀胱腫瘤體積的增大
        3.3 PRMT5促進(jìn)膀胱腫瘤重量的增加
        3.4 在小鼠膀胱腫瘤模型中,PRMT5調(diào)控凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)
    4 討論
    5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Developmental expression of three prmt genes in Xenopus[J]. Cheng-Dong Wang,Xiao-Fang Guo,Thomas Chi Bun Wong,Hui Wang,Xu-Feng Qi,Dong-Qing Cai,Yi Deng,Hui Zhao.  Zoological Research. 2019(02)
[2]SA-hTNF-α膜錨定修飾治療表淺膀胱癌的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 陳忠,譚萬(wàn)龍,黃鑫,梁中錕,徐翠香,高基民.  南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2010(05)



本文編號(hào)：3647821