發(fā)布時(shí)間：2022-04-23 18:20

　　癌癥是一個(gè)全球性的公共健康問題,已成為當(dāng)今世界上死亡率最高的常見病及多發(fā)病之一。相比于傳統(tǒng)的癌癥治療手段,腫瘤免疫治療具有專一性強(qiáng)、免疫記憶、對(duì)原發(fā)瘤和轉(zhuǎn)移瘤均有殺傷作用等優(yōu)點(diǎn),是有望徹底根除癌癥的新型治療方法。尤其是免疫檢查點(diǎn)阻斷（Immune Checkpoint Blockade,ICB）療法的出現(xiàn),為腫瘤治療裝備了新穎而強(qiáng)大的“武器”,已成為目前國(guó)際上腫瘤免疫治療的主要研究方向。ICB療法是通過抗體阻斷被癌細(xì)胞激活的免疫抑制通路的治療方法,但是阻斷劑的脫靶效應(yīng)及其低的血漿半衰期導(dǎo)致免疫檢查點(diǎn)阻斷劑單藥治療癌癥的效率僅為20%左右。此外,免疫檢查點(diǎn)阻斷藥物在重新激活免疫系統(tǒng)的同時(shí)導(dǎo)致的免疫相關(guān)毒副作用也是一個(gè)不容忽視的問題。而且,由于腫瘤本身及腫瘤微環(huán)境中存在多重免疫抑制機(jī)制,使得腫瘤細(xì)胞在各種免疫逃逸通路作用下,擺脫免疫系統(tǒng)的監(jiān)視及免疫殺傷作用。綜上所述,僅僅解除腫瘤的某一種免疫抑制通路難以實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的有效治療。如何開發(fā)新型免疫治療體系,克服單一阻斷劑治療效率低,毒副作用大等缺點(diǎn)對(duì)于腫瘤的根治具有重要的研究意義。因此,通過創(chuàng)新設(shè)計(jì)合理的聯(lián)合腫瘤免疫治療是有望改善治療效果的有效途... 

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 腫瘤免疫治療
        1.1.1 腫瘤免疫治療概述
        1.1.2 腫瘤免疫治療的手段及不足
        1.1.3 腫瘤免疫治療的局限性及解決措施
    1.2 外泌體載藥體系
        1.2.1 外泌體的生物發(fā)生
        1.2.2 外泌體作為藥物載體的優(yōu)勢(shì)
        1.2.3 外泌體的種類及特點(diǎn)
        1.2.4 DC外泌體
    1.3 立題依據(jù)
第二章 原代樹突狀細(xì)胞的培養(yǎng)及其外泌體的分離表征
    2.1 試劑與儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 原代DC的培養(yǎng)
        2.2.2 流式細(xì)胞術(shù)分析DC表型
        2.2.3 激光共聚焦掃描顯微鏡分析DC
        2.2.4 DC抗原攝取能力實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 外泌體(Exo)的分離
        2.2.6 Exo表面修飾PD-L1 抗體
        2.2.7 Exo的透射電子顯微鏡表征
        2.2.8 Exo的粒徑,Zeta測(cè)定
        2.2.9 Exo的流式細(xì)胞術(shù)分析
        2.2.10 Exo的免疫印跡鑒定
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        2.3.1 DC的 FCM分析
        2.3.2 DC的 LCSM分析
        2.3.3 DC的抗原攝取能力分析
        2.3.4 Exo的 TEM表征
        2.3.5 Exo的 FCM分析
        2.3.6 Exo膜修飾a PD-L1 的表征
        2.3.7 Exo,Exo-OVA,Exo-OVA-aPD-L1 的粒徑表征
    2.4 本章小結(jié)
第三章 EXO-OVA-APD-L1 的抗腫瘤免疫治療作用
    3.1 試劑與儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 Exo-OVA-aPD-L1 體外激活免疫細(xì)胞
        3.2.2 Exo-OVA-aPD-L1 體外與腫瘤細(xì)胞的結(jié)合能力
        3.2.3 Exo-OVA-aPD-L1 的體內(nèi)分布
        3.2.4 Exo-OVA-aPD-L1 對(duì)荷瘤小鼠的抑瘤作用
        3.2.5 荷瘤小鼠腫瘤局部免疫細(xì)胞浸潤(rùn)
        3.2.6 ELISA檢測(cè)小鼠血清中免疫相關(guān)細(xì)胞因子
        3.2.7 ELISA檢測(cè)小鼠血清中OVA抗體
        3.2.8 Exo-OVA-aPD-L1 抑制腫瘤復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移效果
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論
        3.3.1 FCM分析免疫細(xì)胞激活效率
        3.3.2 LCSM分析Exo-OVA-aPD-L1 與腫瘤細(xì)胞相互作用
        3.3.3 小鼠體內(nèi)分布
        3.3.4 Exo-OVA-aPD-L1 抑瘤作用
        3.3.5 腫瘤局部免疫細(xì)胞浸潤(rùn)
        3.3.6 ELISA檢測(cè)小鼠血清中的細(xì)胞因子及抗體
        3.3.7 Exo-OVA-aPD-L1 抑制腫瘤復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移效果
        3.3.8 免疫熒光、免疫組化分析轉(zhuǎn)移肺組織T細(xì)胞浸潤(rùn)
    3.4 本章小結(jié)
全文總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀學(xué)位期間取得的科研成果



本文編號(hào)：3647732