第一部分circ-CCDC85A在乳腺癌組織和細胞中的表達及對其生物學(xué)行為的影響目的:研究環(huán)狀RNA CCDC85A在乳腺癌（Breast Cancer,BC）組織和細胞中的表達及其對乳腺癌細胞增值、遷移和侵襲能力的影響。方法:1.RT-PCR和q RT-PCR法檢測circ-CCDC85A在乳腺癌組織和細胞中的表達。2.采用Sanger測序鑒定circ-CCDC85A的環(huán)化剪接點序列。3.RNase R實驗驗證circ-CCDC85A在乳腺癌細胞中的特性。4.采用CCK-8實驗、平板克隆形成實驗、劃痕愈合實驗以及Transwell實驗檢測過表達或敲低circ-CCDC85A對乳腺癌細胞增殖、遷移和侵襲能力的影響。結(jié)果:1.RT-PCR結(jié)果顯示,以乳腺癌組織和細胞的c DNA和g DNA為模板,環(huán)狀轉(zhuǎn)錄本只能通過發(fā)散引物在c DNA中擴增出來,而線性轉(zhuǎn)錄本可通過聚合引物同時在c DNA和g DNA中擴增出來。q RT-PCR結(jié)果顯示,與癌旁正常組織相比,乳腺癌組織中circ-CCDC85A表達水平顯著下調(diào)（P<0.05）。2.PCR產(chǎn)物的Sanger測序結(jié)果驗證了circ-CCD... 

【文章來源】：河北醫(yī)科大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

circ-CCDC85A在乳腺癌細胞系和組織標本中的鑒定

研究論文26圖2PCR產(chǎn)物的Sanger測序驗證circ-CCDC85A的環(huán)化剪接點Fig.2Verificationofthejunctionsiteofcirc-CCDC85AbySangersequencingofthePCRproduct.3.circ-CCDC85A在乳腺癌細胞中的特性提取MCF-7細胞的總RNA后分成以下兩組：一組不經(jīng)任何處理，另一組使用RNaseR進行消化。然后通過qRT-PCR分別檢測circ-CCDC85A相關(guān)的環(huán)狀轉(zhuǎn)錄本和線性轉(zhuǎn)錄本的表達變化，結(jié)果如圖3所示，與對照組相比，MCF-7細胞RNaseR處理組中circ-CCDC85A對應(yīng)線性轉(zhuǎn)錄本的表達水平明顯降低（1.01±0.04vs0.22±0.00，***P＜0.001），而環(huán)狀轉(zhuǎn)錄本的表達水平無明顯改變（1.00±0.12vs0.92±0.13，P＞0.05）。圖3circ-CCDC85A在乳腺癌細胞中具有RNaseR抗性Fig.3circ-CCDC85AisresistanttoRNaseRtreatmentinbreastcancercells.***P<0.001vsMCF-7-controllineargroup.

研究論文26圖2PCR產(chǎn)物的Sanger測序驗證circ-CCDC85A的環(huán)化剪接點Fig.2Verificationofthejunctionsiteofcirc-CCDC85AbySangersequencingofthePCRproduct.3.circ-CCDC85A在乳腺癌細胞中的特性提取MCF-7細胞的總RNA后分成以下兩組：一組不經(jīng)任何處理，另一組使用RNaseR進行消化。然后通過qRT-PCR分別檢測circ-CCDC85A相關(guān)的環(huán)狀轉(zhuǎn)錄本和線性轉(zhuǎn)錄本的表達變化，結(jié)果如圖3所示，與對照組相比，MCF-7細胞RNaseR處理組中circ-CCDC85A對應(yīng)線性轉(zhuǎn)錄本的表達水平明顯降低（1.01±0.04vs0.22±0.00，***P＜0.001），而環(huán)狀轉(zhuǎn)錄本的表達水平無明顯改變（1.00±0.12vs0.92±0.13，P＞0.05）。圖3circ-CCDC85A在乳腺癌細胞中具有RNaseR抗性Fig.3circ-CCDC85AisresistanttoRNaseRtreatmentinbreastcancercells.***P<0.001vsMCF-7-controllineargroup.

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Noncoding RNAs in gastric cancer: Research progress and prospects[J]. Meng Zhang,Xiang Du.  World Journal of Gastroenterology. 2016(29)



本文編號：3633251