發(fā)布時(shí)間：2022-02-19 16:40

　　第一部分circ-CCDC85A在乳腺癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)及對(duì)其生物學(xué)行為的影響目的:研究環(huán)狀RNA CCDC85A在乳腺癌（Breast Cancer,BC）組織和細(xì)胞中的表達(dá)及其對(duì)乳腺癌細(xì)胞增值、遷移和侵襲能力的影響。方法:1.RT-PCR和q RT-PCR法檢測(cè)circ-CCDC85A在乳腺癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)。2.采用Sanger測(cè)序鑒定circ-CCDC85A的環(huán)化剪接點(diǎn)序列。3.RNase R實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證circ-CCDC85A在乳腺癌細(xì)胞中的特性。4.采用CCK-8實(shí)驗(yàn)、平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、劃痕愈合實(shí)驗(yàn)以及Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過表達(dá)或敲低circ-CCDC85A對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖、遷移和侵襲能力的影響。結(jié)果:1.RT-PCR結(jié)果顯示,以乳腺癌組織和細(xì)胞的c DNA和g DNA為模板,環(huán)狀轉(zhuǎn)錄本只能通過發(fā)散引物在c DNA中擴(kuò)增出來,而線性轉(zhuǎn)錄本可通過聚合引物同時(shí)在c DNA和g DNA中擴(kuò)增出來。q RT-PCR結(jié)果顯示,與癌旁正常組織相比,乳腺癌組織中circ-CCDC85A表達(dá)水平顯著下調(diào)（P<0.05）。2.PCR產(chǎn)物的Sanger測(cè)序結(jié)果驗(yàn)證了circ-CCD... 

【文章來源】：河北醫(yī)科大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

circ-CCDC85A在乳腺癌細(xì)胞系和組織標(biāo)本中的鑒定

研究論文26圖2PCR產(chǎn)物的Sanger測(cè)序驗(yàn)證circ-CCDC85A的環(huán)化剪接點(diǎn)Fig.2Verificationofthejunctionsiteofcirc-CCDC85AbySangersequencingofthePCRproduct.3.circ-CCDC85A在乳腺癌細(xì)胞中的特性提取MCF-7細(xì)胞的總RNA后分成以下兩組：一組不經(jīng)任何處理，另一組使用RNaseR進(jìn)行消化。然后通過qRT-PCR分別檢測(cè)circ-CCDC85A相關(guān)的環(huán)狀轉(zhuǎn)錄本和線性轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)變化，結(jié)果如圖3所示，與對(duì)照組相比，MCF-7細(xì)胞RNaseR處理組中circ-CCDC85A對(duì)應(yīng)線性轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)水平明顯降低（1.01±0.04vs0.22±0.00，***P＜0.001），而環(huán)狀轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)水平無明顯改變（1.00±0.12vs0.92±0.13，P＞0.05）。圖3circ-CCDC85A在乳腺癌細(xì)胞中具有RNaseR抗性Fig.3circ-CCDC85AisresistanttoRNaseRtreatmentinbreastcancercells.***P<0.001vsMCF-7-controllineargroup.

研究論文26圖2PCR產(chǎn)物的Sanger測(cè)序驗(yàn)證circ-CCDC85A的環(huán)化剪接點(diǎn)Fig.2Verificationofthejunctionsiteofcirc-CCDC85AbySangersequencingofthePCRproduct.3.circ-CCDC85A在乳腺癌細(xì)胞中的特性提取MCF-7細(xì)胞的總RNA后分成以下兩組：一組不經(jīng)任何處理，另一組使用RNaseR進(jìn)行消化。然后通過qRT-PCR分別檢測(cè)circ-CCDC85A相關(guān)的環(huán)狀轉(zhuǎn)錄本和線性轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)變化，結(jié)果如圖3所示，與對(duì)照組相比，MCF-7細(xì)胞RNaseR處理組中circ-CCDC85A對(duì)應(yīng)線性轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)水平明顯降低（1.01±0.04vs0.22±0.00，***P＜0.001），而環(huán)狀轉(zhuǎn)錄本的表達(dá)水平無明顯改變（1.00±0.12vs0.92±0.13，P＞0.05）。圖3circ-CCDC85A在乳腺癌細(xì)胞中具有RNaseR抗性Fig.3circ-CCDC85AisresistanttoRNaseRtreatmentinbreastcancercells.***P<0.001vsMCF-7-controllineargroup.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Noncoding RNAs in gastric cancer: Research progress and prospects[J]. Meng Zhang,Xiang Du.  World Journal of Gastroenterology. 2016(29)



本文編號(hào)：3633251