胃癌是癌癥死亡的第三大主因,其因缺乏特異的生物性標(biāo)志所以早期檢出率較低,且預(yù)后較差,丞待發(fā)現(xiàn)新的化療藥物。Jaspine B是從海洋海綿Jaspis和Pachastrissa sp中發(fā)現(xiàn)的一種天然鞘脂類分子,具有顯著的生物學(xué)活性,因此Jaspine B及其衍生物的研究成為熱門靶點。本課題中,我們探討了 Jaspine B衍生物M-2對胃癌細(xì)胞的抗腫瘤作用及其分子機制,主要結(jié)論如下:（1）用 MTT 法檢測了 M-2 對胃癌細(xì)胞（MGC803、HGC27、SGC7901）和胃上皮正常細(xì)胞（GES1）的抗增殖作用。結(jié)果表明,M-2抑制胃癌細(xì)胞（MGC803、HGC27、SGC7901）的增殖且對胃上皮正常細(xì)胞（GES1）基本無毒性。（2）為了確定M-2誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞死亡的機制,我們采用了流式細(xì)胞儀通過Annexin V-FITC/PI雙染法收集細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)死亡細(xì)胞主要集中在區(qū)域Annexin V-FITC+/PI+內(nèi)。然后用MTT法檢測Caspases抑制劑Z-VAD-fmk與M-2聯(lián)用的結(jié)果,發(fā)現(xiàn)與凋亡陽性對照shikonin相比,Z-VAD-fmk未能逆轉(zhuǎn)M-2引起的死亡率。最后用Hoec... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：74 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖４?Ｍ－２抑制ＭＧＣ８０３細(xì)胞的克隆形成

?Ｉ．”??ｗ＇．?＾：；ｉ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?Ｍ－２??圖４?Ｍ－２抑制ＭＧＣ８０３細(xì)胞的克隆形成。??小結(jié)：Ｍ－２顯著抑制了胃癌細(xì)胞（ＭＧＣ８０３）的克隆形成。??３．?３?Ｍ－２誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞（ＭＧＣ８０３）非凋亡性死亡??３．?３．?１雙染法檢測Ｍ－２對ＭＧＣ８０３細(xì)胞的抑制作用??采用Ａｎｎｅｘｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ／ＰＩ雙染法通過流式細(xì)胞儀檢測Ｍ－２對ＭＧＣ８０３細(xì)胞??的抑制作用。Ｍ－２濃度設(shè)置為０、１、２、４和８＾Ｍ，作用于ＭＧＣ８０３細(xì)胞的時間??為２４ｈ。從圖５可以得出，Ｍ－２對ＭＧＣ８０３細(xì)胞有很強的促死亡作用。ＭＧＣ８０３??細(xì)胞在濃度１、２、４和８ｐＭ作用２４ｈ后，細(xì)胞的死亡率分別增加了?４．４％、１３．７％、??２６．７％和?６５．１％。??０?１?２?４?８?（＾Ｍ）??Ｓｐｅｏｗｅｎ?００１－０?Ｓｐｅｃｍｖｅｎ?００１－１??Ｓｐｅｃｉｍｅｎ?〇ｐｉ－２??Ｓｆｒｅｏｍｅｎ?００１?＾?ＳＢ？ｏｍ？ｎ?００１－８??－ｊ￣￣?２ｃＴｊ?－ｊ￣￣Ｉ￣＾７］?－ｄ?￣￣＂＂＂＂??ｓ＾??ＰＩ?９７＆，＞＼?〇〇５ｂ｜?９３％?ＣＣＳ?３?Ｃ３Ｓ｜??ｉｉ－ｉｉ?：?！?ｔｒ：�。�?ｒ?ｉ?ｒ－ｒｒｒ＾?■?ｉＪｒｔ＾?■?ＭＴｒ�。颍�?；■?ｉ?■?ｍｉｉＴ－?ｉ?＂■?Ｍ?ｉ?＇ｉ１．?■?ｍ?�。�?ｉ１?＞?ｎｎ＾?ｉ?Ｍｉｎｉ?ｉ＇ｎ？?ｉ?－？??１８?■ＶｆｆｏＶ�！�?１１）１?｜?一?＇。１?｜?ｗ?＆ｍｃ３?ｗ?ｌ０＊?１０?＂＊?尤?ｍｃＳ１?＂??Ａｎｎｅｉｉｎ?Ｖ－ＦＩＴＣ??圖５?ＡｎｎｅｘｉｎＶ－ＦＩＴＣ／ＰＩ雙染法測定Ｍ

?＾???３．?３．?２?Ｃａｓｐａｓｅｓ抑制劑Ｚ－ＶＡＤ－ｆｍｋ無法逆轉(zhuǎn)Ｍ－２對ＭＧＣ８０３細(xì)胞的抑??制作用??用ＭＴＴ法檢測ｃａｓｐａｓｅｓ抑制劑Ｚ－ＶＡＤ－ｆｍｋ對Ｍ－２抑制ＭＧＣ８０３細(xì)胞存活??率的影響。由圖６Ａ可以得出，Ｚ－ＶＡＤ－ｆｍｋ與Ｍ－２聯(lián)用后ＭＧＣ８０３細(xì)胞存活率??下降６４．４７％，而Ｍ－２單獨作用于ＭＧＣ８０３細(xì)胞后存活率下降６６．９５％，二者之??間無顯著性差異。圖６Ｂ中可以得出，Ｚ－ＶＡＤ－ｆｍｋ與凋亡陽性對照ｓｈｉｋｏｎｉｎ聯(lián)用??后ＭＧＣ８０３細(xì)胞存活率下降４７．２０％，而ｓｈｉｋｏｎｉｎ單獨作用于ＭＧＣ８０３細(xì)胞后存??活率下降７１．７５％，二者之間有顯著性差異。??／＼?１２０１?ＮＳ?ｇ?１２０－Ｉ?＊＊＊??ｒ：ｉ?ｎｒ??ｉ?Ｉ?：＼ｍ?＞?ＩＪ．??Ｍ－２（８?ｐＭ）?■?＋?－?＋?ｓｈｉｋｏｎｉｎ（４?ｐＭ）?－?＋?？?＋??Ｚ－ＶＡＤ－ｆｉｎｋ（１００ｕＭ）?？?－?＋?＋?Ｚ－ＶＡＤ－ｆｉｎｋ（１００＾Ｍ）?－?－?＋?－??圖６?ＭＴＴ法測定Ｚ－ＶＡＤ－ｆｍｋ對Ｍ－２和ｓｈｉｋｏｎｉｎｓ引起的ＭＧＣ８０３細(xì)胞存活率的影響。??（Ａ）ＭＴＴ法測定Ｚ－ＶＡＤ－ｆｍｋ對Ｍ－２引起的ＭＧＣ８０３細(xì)胞存活率的影響。（Ｂ）?ＭＴＴ法測定??Ｚ－ＶＡＤ－ｆｍｋ對ｓｈｉｋｏｎｉｎ引起的ＭＧＣ８０３細(xì)胞存活率的影響。??３．?３．?３?Ｈｏｅｃｈｓｔ染色檢測Ｍ－２對ＭＧＣ８０３細(xì)胞核形態(tài)的影響??采用Ｈｏｅｃｈｓｔ染色通過熒光顯微鏡檢測Ｍ－２作用ＭＧＣ８０３細(xì)胞后細(xì)胞核形??態(tài)的變化。Ｍ－２濃度設(shè)置為０、１、２、４和８ｐＭ，作用時間為２４ｈ。由圖７

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Impact of environmental factors on gastric cancer:A review of the scientific evidence,human prevention and adaptation[J]. Jie Yin,Xiaoxu Wu,Suping Li,Chenlu Li,Zhiyi Guo.  Journal of Environmental Sciences. 2020(03)



本文編號：3595308