目的:探討化療誘導(dǎo)的衰老腫瘤細(xì)胞分泌的胞外囊泡（EVs）特性及其對腫瘤細(xì)胞與巨噬細(xì)胞的影響。方法:化療藥物阿霉素、順鉑及極光激酶抑制劑MLN8237作用神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系,分析細(xì)胞衰老及細(xì)胞周期阻滯情況,建立化療誘導(dǎo)的細(xì)胞衰老模型。分離衰老細(xì)胞培養(yǎng)上清中的EVs,Western blot及Nanosight分析EVs純度、粒徑大小與濃度。分別用腫瘤細(xì)胞及巨噬細(xì)胞孵育EVs,Western blot與RT-qPCR檢測胞內(nèi)蛋白與細(xì)胞因子表達(dá)。結(jié)果:低濃度MLN8237作用IMR32細(xì)胞成功誘導(dǎo)細(xì)胞衰老;衰老細(xì)胞分泌的EVs（SAEs）數(shù)量低于未處理細(xì)胞,但大小在30～150 nm的外泌體組分含量偏高;與EVs孵育組相比,SAEs孵育的IMR32細(xì)胞BRD4與C-MYC表達(dá)水平明顯下調(diào);EVs與SAEs孵育的THP-1細(xì)胞均發(fā)生形態(tài)改變:貼壁并伸出偽足,呈現(xiàn)極化狀態(tài);但THP-1細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子表達(dá)水平明顯不同:在EVs與SAEs組,IL-4與TNF-α水平明顯比未處理組低;與EVs組相比,SAEs組IL-1β、IL-10與TGF-β水平明顯降低。結(jié)論:SAEs能夠抑制腫瘤細(xì)胞BRD4表達(dá)并... 

【文章來源】：中國免疫學(xué)雜志. 2020,36(15)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

SAEs的分離與鑒定

SAEs抑制IMR32細(xì)胞BRD4通路

表2 EVs顆粒大小與濃度Tab.2 Particle size distribution and concentration of EVS Samples Untreated control MLN8237-treated Mean particle size(nm) 218.6 213.8 Particle size peak(nm) 187.4 168.7 Total concentration(1×1011particle/ml) 2.935 1.52 Particle size 30-150 nm percentage(%) 5.8 16.1圖2 SAEs的分離與鑒定

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]外泌體及其對調(diào)節(jié)性T細(xì)胞作用的研究進(jìn)展[J]. 張少鵬,倪緒皓,呂凌.  中國免疫學(xué)雜志. 2018(03)



本文編號：3591414