目的分析腫瘤甲基化抑制劑5-氮雜-2′-脫氧胞苷（5-Aza-CdR）對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）增殖、遷移、管室結(jié)構(gòu)及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體（VEGFR）2的影響來(lái)探討5-Aza-CdR對(duì)腫瘤血管形成HUVEC的抑制作用。方法將HUVEC以胰酶消化傳代至第3代,5-Aza-CdR含藥血清進(jìn)行干預(yù),噻唑藍(lán)（MTT）法檢測(cè)5-Aza-CdR對(duì)HUVEC增殖的影響,Transwell小室觀察5-Aza-CdR對(duì)HUVEC遷移的速度,管樣結(jié)構(gòu)檢測(cè)5-Aza-CdR對(duì)HUVEC管腔結(jié)構(gòu)形成的影響,Western印跡檢測(cè)5-Aza-CdR對(duì)HUVEC受體VEGFR2表達(dá)的影響。結(jié)果在72 h時(shí)5-Aza-CdR 10μmol/L藥物組對(duì)HUVEC的增殖分化和遷移抑制最為明顯,10μmol/L藥物組對(duì)HUVEC管樣結(jié)構(gòu)形成的抑制最為明顯,5-Aza-CdR明顯抑制VEGFR2蛋白表達(dá),并與劑量濃度大小有正相關(guān)關(guān)系,濃度越大其抑制蛋白表達(dá)的作用也越明顯。結(jié)論 5-Aza-CdR可能通過(guò)抑制HUVEC的增殖、遷移、分化、管樣結(jié)構(gòu)形成及其主要的促生長(zhǎng)因子VEGFR2來(lái)阻滯腫瘤血管生長(zhǎng)、擴(kuò)散。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)老年學(xué)雜志. 2020,40(08)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

孵育24、48、72 h各組HUVEC遷移情況(臺(tái)盼藍(lán)染色,×200)

不同濃度5-Aza-CdR在一定時(shí)間段內(nèi)對(duì)HUVEC細(xì)胞小管形成影響不同,小管形成能力隨5-Aza-CdR濃度的降低而增加(圖2)。細(xì)胞接種6 h后在基質(zhì)膠上排列形成類似于毛細(xì)血管的完整管腔。在不同濃度5-Aza-CdR作用下,HUVEC細(xì)胞成團(tuán)聚集,基質(zhì)膠上完整的管腔結(jié)構(gòu)與空白對(duì)照組相比顯著減少。與空白對(duì)照組比較,各劑量組小管形成完整的管腔結(jié)構(gòu)顯著減少;低劑量組6 h后管腔結(jié)構(gòu)被破壞,不時(shí)有斷裂出現(xiàn),呈現(xiàn)一種不完整的、稀疏的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu);中劑量組細(xì)胞管腔結(jié)構(gòu)破壞嚴(yán)重,斷裂擴(kuò)大,細(xì)胞不再聚集開始分散,網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)明顯;高劑量組幾乎沒(méi)有發(fā)現(xiàn)完整閉合的管腔形成,5-Aza-CdR對(duì)HUVEC細(xì)胞形成管腔能力的抑制作用則更明顯。提示,不同濃度5-Aza-CdR均可降低HUVEC小管形成能力,使小管周徑變小、成環(huán)率降低,高劑量組抑制作用最明顯。2.4 5-Aza-CdR對(duì)細(xì)胞VEGFR2表達(dá)的作用

5-Aza-CdR干預(yù)HUVEC 24 h后VEGFR2表達(dá)

【參考文獻(xiàn)】：
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