MSI2在胰腺癌上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化中的作用
發(fā)布時(shí)間：2021-12-31 20:28
目的:探討Musashi2（MSI2）在胰腺癌上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化（Epithelial mesenchymal transition,EMT）中的作用及其相關(guān)分子機(jī)制。研究方法:收集從2012年8月至2016年5月期間于中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院行手術(shù)治療并具有完整臨床病理學(xué)參數(shù)及術(shù)后隨訪資料的胰腺癌標(biāo)本43例,其中男性27例,女性16例,年齡29-80歲（中位數(shù)58歲）,術(shù)后病理均證實(shí)為胰腺導(dǎo)管腺癌。采用免疫組化檢測胰腺癌組織中MSI2,ZEB1及ZO-1的表達(dá)強(qiáng)弱,統(tǒng)計(jì)分析三者在胰腺癌組織水平上的表達(dá)強(qiáng)弱及其與臨床病理學(xué)參數(shù)之間的關(guān)系。統(tǒng)計(jì)分析MSI2,ZEB1及ZO-1胰腺癌組織水平上的相關(guān)關(guān)系。應(yīng)用CRISPR-Cas9技術(shù)于Capan-2,SW1990胰腺癌細(xì)胞系中構(gòu)建MSI2穩(wěn)轉(zhuǎn)沉默細(xì)胞系。應(yīng)用免疫印跡法和免疫沉淀方法探討在胰腺癌細(xì)胞水平上MSI2與EMT關(guān)鍵蛋白之間的表達(dá)相關(guān)關(guān)系。應(yīng)用卡方檢驗(yàn),Wilcoxon秩檢驗(yàn),Pearson相關(guān)系數(shù)法,Kaplan-Meier單因素分析,Log-Rank檢驗(yàn)等統(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:免疫組化結(jié)果顯示MSI2及ZEB1主要在細(xì)胞...
【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁數(shù)】：32 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
倍顯微鏡下胰腺癌組織免疫組化結(jié)果提示MSI2(AD)主要為核表達(dá)與胞漿表達(dá)，ZEB1(BE)
中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文73.2MSI2，ZEB1和ZO-1蛋白表達(dá)與胰腺癌術(shù)后預(yù)后的關(guān)系用Kaplan-Merier單因素生存分析發(fā)現(xiàn)，胰腺癌患者中MSI2高表達(dá)較低表達(dá)者生存預(yù)后差（中位生存時(shí)間371d：800d；2=7.750，p=0.005）（圖2A），ZO-1高表達(dá)較低表達(dá)預(yù)后好（中位生存時(shí)間800d：371d；2＝9.520，p＝0.002）（圖2C），而ZEB1與胰腺癌預(yù)后無明顯相關(guān)關(guān)系（2＝2.758，p＝0.097），但p值具有臨界統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖2B）。MSI2及ZEB1均高表達(dá)的胰腺癌患者較均低表達(dá)者預(yù)后差（中位生存時(shí)間371d：645d；2=7.212，p=0.007）（圖2D）。MSI2高表達(dá)且ZO-1低表達(dá)胰腺癌患者較MSI2低表達(dá)且ZO-1高表達(dá)者預(yù)后差（中位生存時(shí)間371d：698d；2=10.610，p=0.001）（圖2E）。以上結(jié)果提示MSI2、ZEB1和ZO-1共同影響胰腺癌患者預(yù)后。圖2胰腺癌組織中不同蛋白表達(dá)情況與患者預(yù)后的Kaplan-Meier生存曲線，A為*MSI2，B為ZEB1，C為*ZO-1，D為*MSI2/ZEB1，E為*MSI2/ZO-1。*p<0.05
中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文83.3MSI2，ZEB1及ZO1在胰腺癌細(xì)胞水平中的表達(dá)相關(guān)關(guān)系用Capan-2、SW1990胰腺癌細(xì)胞構(gòu)建MSI2沉默穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系，WB驗(yàn)證沉默效率。在蛋白水平，shMSI2組MSI2蛋白表達(dá)水平明顯低于對照組，同時(shí)在胰腺癌MSI2沉默的Capan-2和SW1990細(xì)胞中ZEB1的表達(dá)量明顯減少，ZO-1表達(dá)量明顯增高，N-Ca，MMP9，Cav-1未見明顯變化（圖3AB）。免疫共沉淀提示在胰腺癌Capan-2及SW1990細(xì)胞系中ZEB1和MSI2存在蛋白相互結(jié)合（圖3CD），提示MSI2和胰腺癌細(xì)胞例EMT關(guān)鍵蛋白作用密切相關(guān)。圖3蛋白印跡法檢測胰腺癌Capan-2(A)及SW1990(B)穩(wěn)轉(zhuǎn)沉默ShMSI2細(xì)胞與對照組細(xì)胞中MSI2，ZEB1與ZO-1蛋白水平表達(dá)量變化。免疫共沉淀法檢測Capan-2(C)及SW1990(D)中MSI2與ZEB1在蛋白水平的相互結(jié)合，MSI2為沉淀蛋白，Input與IgG分別為陽性與陰性對照。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2015年中國惡性腫瘤流行情況分析[J]. 鄭榮壽,孫可欣,張思維,曾紅梅,鄒小農(nóng),陳茹,顧秀瑛,魏文強(qiáng),赫捷. 中華腫瘤雜志. 2019 (01)
本文編號：3560920
【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁數(shù)】：32 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
倍顯微鏡下胰腺癌組織免疫組化結(jié)果提示MSI2(AD)主要為核表達(dá)與胞漿表達(dá)，ZEB1(BE)
中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文73.2MSI2，ZEB1和ZO-1蛋白表達(dá)與胰腺癌術(shù)后預(yù)后的關(guān)系用Kaplan-Merier單因素生存分析發(fā)現(xiàn)，胰腺癌患者中MSI2高表達(dá)較低表達(dá)者生存預(yù)后差（中位生存時(shí)間371d：800d；2=7.750，p=0.005）（圖2A），ZO-1高表達(dá)較低表達(dá)預(yù)后好（中位生存時(shí)間800d：371d；2＝9.520，p＝0.002）（圖2C），而ZEB1與胰腺癌預(yù)后無明顯相關(guān)關(guān)系（2＝2.758，p＝0.097），但p值具有臨界統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（圖2B）。MSI2及ZEB1均高表達(dá)的胰腺癌患者較均低表達(dá)者預(yù)后差（中位生存時(shí)間371d：645d；2=7.212，p=0.007）（圖2D）。MSI2高表達(dá)且ZO-1低表達(dá)胰腺癌患者較MSI2低表達(dá)且ZO-1高表達(dá)者預(yù)后差（中位生存時(shí)間371d：698d；2=10.610，p=0.001）（圖2E）。以上結(jié)果提示MSI2、ZEB1和ZO-1共同影響胰腺癌患者預(yù)后。圖2胰腺癌組織中不同蛋白表達(dá)情況與患者預(yù)后的Kaplan-Meier生存曲線，A為*MSI2，B為ZEB1，C為*ZO-1，D為*MSI2/ZEB1，E為*MSI2/ZO-1。*p<0.05
中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文83.3MSI2，ZEB1及ZO1在胰腺癌細(xì)胞水平中的表達(dá)相關(guān)關(guān)系用Capan-2、SW1990胰腺癌細(xì)胞構(gòu)建MSI2沉默穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系，WB驗(yàn)證沉默效率。在蛋白水平，shMSI2組MSI2蛋白表達(dá)水平明顯低于對照組，同時(shí)在胰腺癌MSI2沉默的Capan-2和SW1990細(xì)胞中ZEB1的表達(dá)量明顯減少，ZO-1表達(dá)量明顯增高，N-Ca，MMP9，Cav-1未見明顯變化（圖3AB）。免疫共沉淀提示在胰腺癌Capan-2及SW1990細(xì)胞系中ZEB1和MSI2存在蛋白相互結(jié)合（圖3CD），提示MSI2和胰腺癌細(xì)胞例EMT關(guān)鍵蛋白作用密切相關(guān)。圖3蛋白印跡法檢測胰腺癌Capan-2(A)及SW1990(B)穩(wěn)轉(zhuǎn)沉默ShMSI2細(xì)胞與對照組細(xì)胞中MSI2，ZEB1與ZO-1蛋白水平表達(dá)量變化。免疫共沉淀法檢測Capan-2(C)及SW1990(D)中MSI2與ZEB1在蛋白水平的相互結(jié)合，MSI2為沉淀蛋白，Input與IgG分別為陽性與陰性對照。
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2015年中國惡性腫瘤流行情況分析[J]. 鄭榮壽,孫可欣,張思維,曾紅梅,鄒小農(nóng),陳茹,顧秀瑛,魏文強(qiáng),赫捷. 中華腫瘤雜志. 2019 (01)
本文編號：3560920
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