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骨髓瘤RPMI 8226細胞與TAMs對血管內(nèi)皮細胞體外成管能力的協(xié)同影響

發(fā)布時間:2021-12-31 14:21
  背景和目的多發(fā)性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一種漿細胞異常增生性疾病,是血液系統(tǒng)中第二大常見的惡性腫瘤。血管生成是MM生長的首要條件,探討MM血管生成機制并抑制其血管生成對MM患者的治療和長期生存具有重要意義。血管內(nèi)皮生長因子 A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)是最主要的促血管生長因子,可與血管內(nèi)皮生長因子受體(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)特異性結(jié)合,刺激血管內(nèi)皮細胞(vein endothelial cell,VEC)增殖和遷移,在腫瘤血管生成過程中發(fā)揮重要作用。腫瘤相關(guān)巨噬細胞(tumor associated macrophages,TAMs)是腫瘤微環(huán)境的重要組成部分,能夠分泌血管內(nèi)皮生長因子、血管生成素、血小板衍生因子等促進血管生長的細胞因子,進而影響腫瘤血管的發(fā)生發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn),VEGFA siRNA轉(zhuǎn)染MM細胞后,MM細胞中VEGFA表達下調(diào),然而MM血管的生成并沒有明顯減少,因此推測單純抑制MM細胞VEGFA的表達不能達到... 

【文章來源】:鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:84 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

骨髓瘤RPMI 8226細胞與TAMs對血管內(nèi)皮細胞體外成管能力的協(xié)同影響


圖1?Elisa標準品加樣方法??(6)加樣:取3個己包被VEGFA抗體的八連管,做好標記

生長曲線,生長曲線,條件,遷移能力


????/?2.5「+?NC?group??co-M1?group?乂??2.0?-?…?Z??①?女?co-M2?group?jT?w??fE?^??〇?〇??1?i?i?r?i???0?1?2?3?4?5??Days??圖1.3不同條件培養(yǎng)下各組VEC的生長曲線(n=3)??1.3各組VEC遷移能力情況??通過Transwe丨丨遷移法檢測各組VEC遷移能力。對遷移細胞染色后,通過倒??置顯微鏡對小室上、中、下、左、右五個視野區(qū)進行拍照(附圖3),并通過Image??J軟件計算各組每個區(qū)域遷移的細胞數(shù)(如表1.4)。依圖1.4所示,C〇-M2組VEC??遷移能力明顯高于NC組(P<0.05),co-Ml組VEC遷移能力明顯低于NC組(尸??<0.05)。??表1.4不同條件培養(yǎng)下各組VEC遷移細胞數(shù)(個)??m?染色細胞數(shù)?^±S? ̄?? ̄NC?組?344368 ̄"325?374?365?355.200?±?20.315??co-M2?til?685?660?635?640?690?662.000?±?25.150?883.8?0.000??co-MI?組?126?139?150?119?138?134.400±?12.095??w?800「??^?**??f?600?-?BH|??卜■??i?_?_??j?』?j??f<¥°?acf??#?彳??夕?o°??圖丨.4不同條件培養(yǎng)下各組VEC遷移細胞數(shù)(n=5)??**,尸<0.01?(與NC組相比)??23??

總長,分支,條件


????l.4各組VEC體外成管能力??通過基質(zhì)膠小管形成實驗檢測各組VEC體外成管能力。待各組VEC培養(yǎng)??相同的時間,隨機選取三個視野拍照(附圖6),并用Image?J軟件計算各組VEC??成環(huán)分支的總長度(如表1.5)。依圖1.5所示,co-M2組VEC成管能力明顯高??于NC組(P<0.05),co-Ml組VEC成管能力明顯低于NC組(尸<0.05)。??表1.5不同條件培養(yǎng)下各組VEC成環(huán)分支總長度??組別?成環(huán)分支總長度(nm)?x?±?S?F值?^值??NC?組?8044?7714?7005?7587.67?±?530.89??co-M2?組?9147?9846?9712?9568.33?±?370.98?93.22?0.000??co-Ml?組?4887?4656?4012?4518.33?±?453.45??'15000r??|??^?■?**??cd1?0000?……—r-..??卜_?_??5_?■■麵??1通_?_??,V%,??圖1.5不同條件培養(yǎng)下各組VEC成環(huán)分支總長度(n=3)??**,尸<0.01?(與NC組相比)??1.5各組VEC中VEGFR1?mRNA表達情況??通過qRT-PCR實驗檢測各組VEC中VEGFR]?mRNA的表達量。依圖1.6??各組VEC中VEGFR1?mRNA相對表達量所示,co-M2組VEC中VEGFR1?mRNA??的表達量是NC組的5倍,明顯高于NC組(P?<0.05),?co-Ml組VEC中VEGFR1??mRNA的表達量貝。拭黠@低于NC組(尸<0.05)。??24??

【參考文獻】:
期刊論文
[1]小鼠自發(fā)乳腺癌模型中腫瘤相關(guān)巨噬細胞的表型檢測與分析[J]. 任曉杰,任鵬,羅松,冀全博,許猛,陸寧,王巖.  細胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(06)



本文編號:3560412

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