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氣凝膠三維培養(yǎng)對急性白血病細胞系生物學特性影響的研究

發(fā)布時間:2021-12-24 04:01
  研究背景:近年來,血液系統(tǒng)腫瘤的發(fā)病率逐漸提高,但白血病的治療仍為一大挑戰(zhàn)。骨髓微環(huán)境是由細胞外基質(zhì)、基質(zhì)細胞及多種細胞因子等構(gòu)成的三維結(jié)構(gòu)。在體內(nèi),白血病細胞位于其特有的三維骨髓微環(huán)境,在該微環(huán)境影響下,白血病細胞具有與體外傳統(tǒng)二維培養(yǎng)不同的生物學特性。與傳統(tǒng)二維培養(yǎng)相比,三維支架培養(yǎng)可以更有效地模擬骨髓微環(huán)境,研究白血病細胞的生物學特性。目的:研討聚乙烯醇(Polyvinyl Alcohol,PVA)+氧化石墨烯(Graphene Oxide,GO,質(zhì)量百分比1 wt%)氣凝膠三維支架培養(yǎng)對急性淋巴細胞白血病細胞系Jurkat及急性髓系白血病細胞系HL-60增殖活力、細胞表型及耐藥性的影響。方法:將Jurkat細胞系及HL-60細胞系植入PVA+GO氣凝膠三維支架進行培養(yǎng),通過掃描電鏡和熒光顯微鏡觀察。使用CCK-8法定期檢測細胞增殖活力,熒光染色后流式細胞術(shù)分析細胞表型,并與傳統(tǒng)二維培養(yǎng)的細胞對比。使用阿糖胞苷進行耐藥性實驗,并使用CCK-8法檢測細胞增殖活力。結(jié)果:長期培養(yǎng)下發(fā)現(xiàn)氣凝膠支架中生長的Jurkat細胞活力高于傳統(tǒng)二維培養(yǎng),而在HL-60細胞中只有第8天到第20天三維... 

【文章來源】:青島大學山東省

【文章頁數(shù)】:49 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

氣凝膠三維培養(yǎng)對急性白血病細胞系生物學特性影響的研究


1.在支架中生長的細胞1:Jurkat細胞(×100),2:HL-60細胞(×400)

細胞成像,支架,細胞


青島大學碩士學位論文10圖1.2.在支架中生長的Jurkat細胞(×100,DAPI染色,EVOSXL細胞成像系統(tǒng))。1.3掃描電子顯微鏡下的細胞和支架通過掃描電鏡可以觀察到氣凝膠支架為蜂窩狀結(jié)構(gòu),細胞在支架材料之間形成的孔隙中生長。12

細胞,支架,三維培養(yǎng),二維


結(jié)果1134圖1.3.掃描電鏡下的支架和細胞1,2:培養(yǎng)7天后的Jurkat細胞;3,4:培養(yǎng)30天后的Jurkat細胞。2細胞活力檢測結(jié)果在Jurkat細胞中,d6前二維培養(yǎng)對照組細胞活力持續(xù)升高,高于三維培養(yǎng)組。但從d8開始明顯降低并穩(wěn)定。而d14開始三維培養(yǎng)組中細胞活力逐漸增高,并超過二維培養(yǎng)對照組,在d20達到最高值。圖2.1三維與二維培養(yǎng)下Jurkat細胞活力對比藍:三維培養(yǎng)組;綠:二維培養(yǎng)組*P<0.05,與二維培養(yǎng)相比。在HL-60細胞中,二維培養(yǎng)對照組在第4天活力達到最高,高于三維培養(yǎng)組,d6開始明顯降低并穩(wěn)定,d20后再次升高。而三維培養(yǎng)組中細胞第8天活力高于二維培養(yǎng)組,之后緩慢降低,d20低于二維培養(yǎng)組,提示本支架不利于應(yīng)用于急性髓系白血病細胞系HL-60的增殖。

【參考文獻】:
期刊論文
[1]氣凝膠材料的發(fā)展趨勢與應(yīng)用前景[J]. 樂弦,章婷,賈歡歡,李華鑫,向軍輝.  工程研究-跨學科視野中的工程. 2017(06)



本文編號:3549782

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