目的探討新型降糖藥達(dá)格列凈抑制乳腺癌細(xì)胞增殖的作用機(jī)制,從而為達(dá)格列凈應(yīng)用于乳腺癌合并糖尿病患者的治療提供更充分的實驗依據(jù)。方法1.通過TCGA數(shù)據(jù)庫分析和免疫組化染色,觀察人乳腺癌組織與癌旁組織中鈉-葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2（Sodium dependent glucose transporters 2,SGLT2）的表達(dá)情況。2.采用基因芯片技術(shù)對比觀察經(jīng)達(dá)格列凈處理后,人乳腺癌MCF-7細(xì)胞系基因表達(dá)變化,并用qRT-PCR和蛋白質(zhì)免疫印跡（Western Blot,WB）篩選達(dá)格列凈的可能作用靶點。3.應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)觀察達(dá)格列凈對MCF-7及MDA-MB-231細(xì)胞周期的影響;利用WB檢測經(jīng)達(dá)格列凈處理后,細(xì)胞周期相關(guān)蛋白和P38-絲裂原活化蛋白激酶（P38-Mitogen Activated Protein Kinase,P38-MAPK）信號通路相關(guān)蛋白表達(dá)水平的改變。4.利用細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)下調(diào)或過表達(dá)MCF-7及MDA-MB-231細(xì)胞系中切除修復(fù)交叉互補(bǔ)嚙齒動物修復(fù)缺陷,互補(bǔ)組6樣（Excision repair cross-complementing rodent rep... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

SGLT2在乳腺癌組織中表達(dá)情況

23MDA-MB-231中進(jìn)行了相同處理。結(jié)果顯示在MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞中，ERCC6L的表達(dá)隨藥物濃度增加而逐漸下降，且其變化最明顯（圖4.2D、E），因此ERCC6可能是達(dá)格列凈抑制乳腺癌細(xì)胞增殖的作用靶點。圖4.2達(dá)格列凈抑制乳腺癌細(xì)胞中ERCC6L的表達(dá)A：達(dá)格列凈處理MCF-7細(xì)胞后差異性表達(dá)基因的基因富集分析(GeneOntology,GO)；左側(cè)為表達(dá)下調(diào)基因，右側(cè)為表達(dá)上調(diào)基因。B：基因熱圖，達(dá)格列凈處理

25頏頒硰顫漅漅墥漅漅漅漅漅顴漅漅墨漅漅碩漅漅漅颪漅漅墫漅漅碬漅漅漅漅墮漅漅颰漅漅圖4.3達(dá)格列凈阻斷P38-MAPK信號通路并誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞周期阻滯A、B：達(dá)格列凈對MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞周期的影響。C、D：達(dá)格列凈對MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞周期相關(guān)蛋白質(zhì)表達(dá)水平的影響。E、F：達(dá)格列凈對MCF-7和MDA-MB-231細(xì)胞系P38-MAPK信號通路蛋白質(zhì)表達(dá)水平的影響。β-actin作為內(nèi)參。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Hyperglycemia is a significant prognostic factor of hepatocellular carcinoma after curative therapy[J]. Takanori Hosokawa,Masayuki Kurosaki,Kaoru Tsuchiya,Shuya Matsuda,Masaru Muraoka,Yuichiro Suzuki,Nobuharu Tamaki,Yutaka Yasui,Toru Nakata,Takashi Nishimura,Shoko Suzuki,Ken Ueda,Hiroyuki Nakanishi,Jun Itakura,Yuka Takahashi,Namiki Izumi.  World Journal of Gastroenterology. 2013(02)



本文編號：3541033