目的探討新型降糖藥達格列凈抑制乳腺癌細胞增殖的作用機制,從而為達格列凈應(yīng)用于乳腺癌合并糖尿病患者的治療提供更充分的實驗依據(jù)。方法1.通過TCGA數(shù)據(jù)庫分析和免疫組化染色,觀察人乳腺癌組織與癌旁組織中鈉-葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白2（Sodium dependent glucose transporters 2,SGLT2）的表達情況。2.采用基因芯片技術(shù)對比觀察經(jīng)達格列凈處理后,人乳腺癌MCF-7細胞系基因表達變化,并用qRT-PCR和蛋白質(zhì)免疫印跡（Western Blot,WB）篩選達格列凈的可能作用靶點。3.應(yīng)用流式細胞技術(shù)觀察達格列凈對MCF-7及MDA-MB-231細胞周期的影響;利用WB檢測經(jīng)達格列凈處理后,細胞周期相關(guān)蛋白和P38-絲裂原活化蛋白激酶（P38-Mitogen Activated Protein Kinase,P38-MAPK）信號通路相關(guān)蛋白表達水平的改變。4.利用細胞轉(zhuǎn)染技術(shù)下調(diào)或過表達MCF-7及MDA-MB-231細胞系中切除修復(fù)交叉互補嚙齒動物修復(fù)缺陷,互補組6樣（Excision repair cross-complementing rodent rep... 

【文章來源】：南華大學湖南省

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

SGLT2在乳腺癌組織中表達情況

23MDA-MB-231中進行了相同處理。結(jié)果顯示在MCF-7和MDA-MB-231細胞中，ERCC6L的表達隨藥物濃度增加而逐漸下降，且其變化最明顯（圖4.2D、E），因此ERCC6可能是達格列凈抑制乳腺癌細胞增殖的作用靶點。圖4.2達格列凈抑制乳腺癌細胞中ERCC6L的表達A：達格列凈處理MCF-7細胞后差異性表達基因的基因富集分析(GeneOntology,GO)；左側(cè)為表達下調(diào)基因，右側(cè)為表達上調(diào)基因。B：基因熱圖，達格列凈處理

25頏頒硰顫漅漅墥漅漅漅漅漅顴漅漅墨漅漅碩漅漅漅颪漅漅墫漅漅碬漅漅漅漅墮漅漅颰漅漅圖4.3達格列凈阻斷P38-MAPK信號通路并誘導乳腺癌細胞周期阻滯A、B：達格列凈對MCF-7和MDA-MB-231細胞周期的影響。C、D：達格列凈對MCF-7和MDA-MB-231細胞周期相關(guān)蛋白質(zhì)表達水平的影響。E、F：達格列凈對MCF-7和MDA-MB-231細胞系P38-MAPK信號通路蛋白質(zhì)表達水平的影響。β-actin作為內(nèi)參。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Hyperglycemia is a significant prognostic factor of hepatocellular carcinoma after curative therapy[J]. Takanori Hosokawa,Masayuki Kurosaki,Kaoru Tsuchiya,Shuya Matsuda,Masaru Muraoka,Yuichiro Suzuki,Nobuharu Tamaki,Yutaka Yasui,Toru Nakata,Takashi Nishimura,Shoko Suzuki,Ken Ueda,Hiroyuki Nakanishi,Jun Itakura,Yuka Takahashi,Namiki Izumi.  World Journal of Gastroenterology. 2013(02)



本文編號：3541033