[目的]探索CCL19誘導(dǎo)肺腺癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化及侵襲轉(zhuǎn)移的作用及機(jī)制。[方法]（1）實(shí)驗(yàn)分組如下:空白對照組（A549細(xì)胞）、A549細(xì)胞加DMSO組、A549細(xì)胞加CCL19組、A549細(xì)胞加MK2206組、A549細(xì)胞加CCL19和MK2206組。（2）CCK8實(shí)驗(yàn)檢測不同分組A549細(xì)胞增殖能力的變化。（3）模擬失巢性凋亡模型,流式細(xì)胞術(shù)檢測不同分組A549細(xì)胞凋亡的變化。（4）劃痕實(shí)驗(yàn)檢測不同分組A549細(xì)胞的遷移能力的變化。（5）Transwell實(shí)驗(yàn)檢測不同分組 A549 細(xì)胞侵襲的變化。（6）WB 實(shí)驗(yàn)檢測 pan-AKT、p-AKT（Thr308）、p-AKT（Ser473）、snail、N-cad及E-cad的蛋白表達(dá)情況。（7）免疫組化實(shí)驗(yàn)檢測不同地區(qū)臨床肺癌組織中MMP-9及CCL19的表達(dá)。（8）GraphPad Prism 6統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。[結(jié)果]（1）CCK8實(shí)驗(yàn)檢測發(fā)現(xiàn)CCL19不影響A549細(xì)胞的增殖（P>0.05）,加入MK2206后細(xì)胞增殖明顯受到抑制（P<0.05）。（2）流式細(xì)胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)加入CCL19后A549失巢... 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１不同分組對Ａ５４９細(xì)胞增殖能力影響的柱狀分析圖??ＣＣＫ－８實(shí)驗(yàn)檢測不同分組Ａ５４９細(xì)胞增殖能力的變化，兩兩比較采用配對ｔ??

取對數(shù)生長期細(xì)胞接種于包被ｐｏｌｙ－ＨＥＭＡ的６孔板中，按分組分別加入??ＤＭＳＯ、ＣＣＬ１９和ＭＫ２２０６，常規(guī)培養(yǎng)４８小時后，ｌＯＯＯｒｐｍ離心５ｍｉｎ，收集細(xì)??胞，進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測。結(jié)果顯示，加入ＣＣＬ１９后，與對照組相比，細(xì)胞凋??亡率降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜〇．〇５），而加入ＭＫ２２０６后，與對照組相比，??細(xì)胞凋亡率未見明顯變化，差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（７＞＞〇．〇５）。結(jié)果提示，ＣＣＬ１９??能夠抑制細(xì)胞的失巢性凋亡，而ＭＫ２２０６不能抑制細(xì)胞的失巢性凋亡。??Ａ?Ｂ??

圖３不同分組對Ａ５４９細(xì)胞失巢性凋亡影響的柱狀分ＦＣＭ實(shí)驗(yàn)檢測不同分組Ａ５４９細(xì)胞凋亡狀態(tài)的變化，兩兩比驗(yàn)，數(shù)據(jù)用７表示，每組實(shí)驗(yàn)重復(fù)三次。??３?ＣＣＬ１９及ＭＫ２２０６對Ａ５４９細(xì)胞遷移的影響??接種于６孔板的Ａ５４９細(xì)胞按分組分別加入ＤＭＳＯ、ＣＣＬ１９別于劃痕換液后、２４ｈ、３６ｈ及４８ｈ拍照，計(jì)算遷移面積，結(jié)果顯相比，加入ＣＣＬ１９后，細(xì)胞遷移率明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義加入ＭＫ２２０６后，細(xì)胞遷移率明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Ｐ＜示ＣＣＬ１９能夠促進(jìn)Ａ５４９細(xì)胞遷移，而ＭＫ２２０６抑制Ａ５４９細(xì)胞〇／ｍ??２４?小時

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Inflammatory microenvironment contributes to epithelial-mesenchymal transition in gastric cancer[J]. Hui-Ying Ma,Xin-Zhou Liu,Chun-Min Liang.  World Journal of Gastroenterology. 2016(29)
[2]Emerging molecular basis of hematogenous metastasis in gastric cancer[J]. Jing Zhong,Yan Chen,Liang-Jing Wang.  World Journal of Gastroenterology. 2016(08)
[3]chemokine/chemokine receptor pair ccL20/ccR6 in human colorectal malignancy:An overview[J]. Vilma Oliveira Frick,Claudia Rubie,Ulrich Keilholz,Pirus Ghadjar.  World Journal of Gastroenterology. 2016(02)
[4]Chemokine ligand 20 enhances progression of hepatocellular carcinoma via epithelial-mesenchymal transition[J]. Ke-Zhu Hou,Zhi-Qiang Fu,Hua Gong.  World Journal of Gastroenterology. 2015(02)



本文編號：3456296