目的:研究基因NEDD4L在腎透明細(xì)胞癌中的表達(dá)及對(duì)腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞系生長(zhǎng)、遷移等生物學(xué)功能的影響,初步探討NEDD4L在腎透明細(xì)胞癌中的相關(guān)作用機(jī)制,為診斷和治療腎透明細(xì)胞癌提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法:1.采用TCGA數(shù)據(jù)挖掘分析腎透明細(xì)胞癌及癌旁正常組織中NEDD4L的表達(dá)情況,及NEDD4L的表達(dá)與腎透明細(xì)胞癌患者生存期之間的關(guān)系。2.應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色的方法檢測(cè)25對(duì)腎透明細(xì)胞癌組織及其癌旁正常組織中NEDD4L蛋白的表達(dá)情況。3.應(yīng)用qRT-PCR分析50對(duì)腎透明細(xì)胞癌組織及其癌旁正常組織中NEDD4L mRNA的表達(dá)情況,并采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)一步分析NEDD4L mRNA的表達(dá)與腎透明細(xì)胞癌患者的臨床病理學(xué)特點(diǎn)之間的關(guān)系。4.應(yīng)用Western Blot檢測(cè)人正常腎細(xì)胞293T和人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞ACHN、A498、Caki-1、786-0中NEDD4L的表達(dá)情況。采用慢病毒感染的方式將NEDD4L過(guò)表達(dá)載體和空載體導(dǎo)入人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞株786-0和ACHN中,構(gòu)建NEDD4L過(guò)表達(dá)和空載對(duì)照穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株,并結(jié)合qRT-PCR、Western Blot等手段對(duì)NEDD4L的... 

【文章來(lái)源】：廈門(mén)大學(xué)福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?ＮＥＤＤ４Ｌ在多種腫瘤及癌旁正常組織中的表達(dá)情況??

（ｋｉｄｎｅｙｒｅｎａｌｐａｐｉｌｌａｒｙｃｅｌｌｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＫＩＲＰ）中明顯低表達(dá)（尸＜０．０５），但在??嫌色性腎細(xì)胞癌（Ｃｈｒｏｍｏｐｈｏｂｅ?ｒｅｎａｌ?ｃｅｌｌ?ｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＫＩＣＨ）中其表達(dá)與對(duì)照組??相比沒(méi)有顯著差異性（圖２）。??＿?ＵＫ??■??ｊｉｌＬｉｉｉＬＬｒｉｈｌｌ?ＪｌｊｋｌｌｂｄｊｌｆｌｉｉＪａｌＬＬＬ??？?．．?．－ｒ?ｖ?—Ｏ?．?．…ｖ?ｕ?？??．．．?．？?？?＊？？?．?＇、卜．：：？＊■?．ｉ．?＇，?．?．?■：?＊?？?■?．?？?．ｙ－?ｗ－．?－?＼??．Ｌ＊＇?〇?＇Ｏ＇＊?ｖ＂?＾?？＞－＇?Ｏ＇?Ｏ＇?Ｓｒ?＇?４?＾?ｃｃ??圖１?ＮＥＤＤ４Ｌ在多種腫瘤及癌旁正常組織中的表達(dá)情況??１０??

在ＴＣＧＡ?ＫＩＲＣ數(shù)據(jù)庫(kù)中，可得出ＮＥＤＤ４Ｌ高表達(dá)患者與低表達(dá)患者各２５８例??的總體生存率曲線，如Ｋ圖所示，ＮＥＤＤ４Ｌ在腎透明細(xì)胞癌中高表達(dá)者總體生存??率百分?jǐn)?shù)明顯高于低表達(dá)者（Ｐ＜〇．〇〇ｌ）（圖３）。??Ｏｖｅｒａｌｌ?Ｓｕｒｖｉｖａｌ??５?——Ｌｏｗ?ＮＥＤＤ４Ｌ?ＴＰＭ??——Ｈｉｇｈ?ＮＥＤＤ４Ｌ?ＴＰＭ??Ｌｏｇｒａｎｋ?ｐ＝３．９ｅ－０５??ＣＯ?ＨＲ（ｈｉｇｈ）＝０．５３??６?—?＼ｐ（ＨＲ）＝５．３ｅ－０５??ｎ（ｈｉｇｈ）＝２５８??＞?ｎ（ｌｏｗ）＝２５８??ｉ－?ｄ?—?ｗｍｗｉ??另?＾??〇?５?－?￣￣ｌ－ＷＫ??（Ｎ?＿??ｄ??ｑ?＿??ｏ?—??Ｉ?Ｉ?Ｉ￣??０?５０?１００?１５０??Ｍｏｎｔｈｓ??圖３?ＴＣＧＡ數(shù)據(jù)庫(kù)中腎透明細(xì)胞癌中ＮＥＤＤ４Ｌ高表達(dá)組與低表達(dá)組患者的總體生??存曲線??１．４．３免疫組化檢測(cè)２５對(duì)臨床樣本中ＮＥＤＤ４Ｌ蛋白的表達(dá)情況??免疫組織化學(xué)染色結(jié)果顯示ＮＥＤＤ４Ｌ蛋白多表達(dá)于腎小宵細(xì)胞胞漿，腎小??球中表達(dá)較少。在２５例腎透明細(xì)胞癌中１９例低表達(dá)，在２５例癌旁組織中２例??ＩＩ??


本文編號(hào)：3439016