目的：本研究旨在探討MSC在胃炎微環(huán)境中的特性,MSC如何重塑胃炎微環(huán)境,通過研究MSC與炎癥微環(huán)境的相互作用理解MSC促非可控性炎癥惡性轉(zhuǎn)化的作用及與胃癌發(fā)生的關(guān)系；本研究還將揭曉MSC在胃癌微環(huán)境中的生物學(xué)功能及其參與重塑胃癌微環(huán)境的潛在機(jī)制；將為胃癌的預(yù)防和治療提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法：（1）清潔級雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為2組,對照組正常飲食飲水,模型組采用含N-甲基-N’-硝基-N’-亞硝基胍（N-methyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG）的水溶液配合高鹽飼料喂養(yǎng)。影像學(xué)核磁共振成像觀察大鼠胃部結(jié)構(gòu)變化情況,采集不同時(shí)間點(diǎn)的血標(biāo)本和組織標(biāo)本通過血清學(xué)Luminex液相芯片技術(shù)和組織學(xué)切片染色動(dòng)態(tài)觀察大鼠胃炎惡性轉(zhuǎn)化的情況。分離正常胃組織的MSC （RGN-MSC）和炎癥微環(huán)境下的胃組織MSC （RGI-MSC）,通過細(xì)胞誘導(dǎo)分化染色,流式分析表面標(biāo)記,干細(xì)胞相關(guān)指標(biāo)檢測等實(shí)驗(yàn)鑒定兩者的多向分化潛能和自我更新能力。（2）采用細(xì)胞生長曲線,平板克隆,細(xì)胞周期,transwell實(shí)驗(yàn),Luminex液相芯片等技術(shù)比較RGN-MSC和RGI... 

【文章來源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：113 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２．２橫踏共振成像觀察靑部結(jié)構(gòu)??Ｆｉｇ?２．２?Ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｓｔｏｍａｃｈ?ｓｔｒｕ幻ｕｒｅ?ｂｙ?ｕｓｉｎｇ?ｍａｇｎｅｔｉｃ?ｒ巧ｏｎａｎｃｅ?ｉｍａｇｉｎｇ??

正常大鼠胃壁肥厚有彈性，胃內(nèi)表面黏膜光滑呈淺紅色，皺裳完整且排列整齊，不??見異常增生或結(jié)節(jié)。模型組大鼠的胃壁普遍缺乏彈性，胃熟膜呈灰黃或灰白色，黏膜層??變薄，皺髮變淺甚至消失（圖２．４）。造模達(dá)６月時(shí)，胃內(nèi)壁可見散在出血點(diǎn)或糜爛，表??面可有粘液性滲出物覆蓋，可出現(xiàn)增生結(jié)節(jié)或潰瘍樣改變。造模時(shí)間達(dá)９月時(shí)，可在胃??貴口部見菜花樣隆起。造模達(dá)１２月時(shí)，不僅貴口部見菜花樣腫塊，胃體部或近幽口部有??結(jié)節(jié)樣腫塊形成，腫塊組織顏色發(fā)白，質(zhì)地較硬，活動(dòng)性差。??ｌｉｌ?繼ｉ??Ｃｏｎｔｒｏｌ?ＭＮＮＧ－３?ＭＮＮＧ－６??ＭＮＮＧ－９?ＭＮＮＧ－１２??圖２．４肉眼觀察胃黏膜內(nèi)表面??Ｆｉｇ?２．４?Ｍａｃｒｏｓｃｏｐｉｃ?ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏ打?ｏｆ?ｔｈｅ?ｓｔｏｍａｃｈ?ｉｎｎｅｒ?ｗａｌｌ??２．３．５組織學(xué)??如圖２．５所示，正常大鼠胃ＨＥ染色可見胃粘膜完整；腺管和腺上皮分界清楚；腺??體密集分布，大小均一；腺體管腔形狀規(guī)則；細(xì)胞形態(tài)一致，排列整齊。造模達(dá)３月的??大鼠胃ＨＥ染色顯示黏膜淺層即黏膜層上１／３發(fā)生病變，呈化狀或彌漫分布，表淺上皮??壞死脫落，熟膜層稍變薄，腺體未見明顯異常，可診斷為淺表性胃炎。造模達(dá)６月時(shí)，??鏡下發(fā)現(xiàn)腺體變小

（ＡＢｐＨ２．５）反應(yīng)陽性，呈藍(lán)色；中酸性混合的粘蛋白呈紫色。為進(jìn)一步判斷胃粘膜??腸化生的分型，我們對胃組織切片進(jìn)行阿利新藍(lán)一雪夫氏（ＡＢ－ＰＡＳ）染色后發(fā)現(xiàn)黏膜??腺體混合存在藍(lán)色和紫色的細(xì)胞核，說明腸化生亞型為小腸型化生（圖２．７）。??圖２．７?ＡＢ－ＰＡＳ染色判斷腸化生類型??Ｆｉｇ?２．７?Ｔｈｅ?ｔｙｐｅ?ｏｆ?ｉｒＵｅｓｔｉｎａｌ?ｍｅｔａｐｌａｓｉａ?ｓｈｏｗｅｄ?ｂｙ?ＡＢ－ＰＡＳ?ｓｔａｉｎｉｎｇ??注：左圖放大倍率，＞＜１〇〇；右圖放大倍率，＞＜２００；比例尺＝５０＾１１１。??２．３．６胃ＭＳＣ形態(tài)學(xué)??胃組織貼壁培養(yǎng)約１４天后，鏡下觀察可見單個(gè)或少量紡鍵形貼壁細(xì)胞集落樣生長，??細(xì)胞集落可逐漸擴(kuò)大、融合。Ｐ３代細(xì)胞大多呈長梭形，透亮飽滿，有立體感，無顆粒。??當(dāng)細(xì)胞達(dá)９０％融合時(shí)，細(xì)胞可呈旋禍狀排列（圖２．８）。??國瞧??ＲＧＮ－ＭＳＣ?民?ＧＩ－ＭＳＣ??圖２．８?ＲＧＮ－ＭＳＣ與ＲＸＨ－ＭＳＣ的形態(tài)觀寨??Ｆｉｇ?２．８?孔ｅ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ＲＧＮ－ＭＳＣ?ａｎｄ?民ＧＩ－ＭＳＣ??注：放大倍率，Ｘ?１００；比例尺＝５０｜ｉｍ。??２．３．７染色體分析??Ｗｉｓｔａｒ系大鼠細(xì)胞染色體數(shù)目２ｎ＝４２，其中１對性染色體，２０對常染色體（圖２．９）。??根據(jù)Ｈｕｎｇｅｒｇｏｒｄ的大鼠染色體分類標(biāo)準(zhǔn)，將大鼠染色體分組、編號。Ａ組包括１￣３號，??其中１號體積最大

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]2011年中國惡性腫瘤發(fā)病和死亡分析[J]. 陳萬青,鄭榮壽,曾紅梅,鄒小農(nóng),張思維,赫捷.  中國腫瘤. 2015(01)
[2]中國慢性胃炎共識意見（2012年,上海）[J]. 房靜遠(yuǎn),劉文忠,李兆申,杜亦奇,紀(jì)小龍,戈之錚,李延青,姒健敏,呂農(nóng)華,吳開春,陳縈,蕭樹東.  中國醫(yī)學(xué)前沿雜志(電子版). 2013(07)
[3]非可控性炎癥和腫瘤細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 倪建波,郭傳勇,王興鵬.  中華腫瘤防治雜志. 2011(17)
[4]高鹽飼料配合甲基硝基亞硝基胍誘發(fā)大鼠胃癌[J]. 朱曉東,林庚金,許祖德,陳忠清.  上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科學(xué). 2003(02)

碩士論文
[1]慢性胃炎內(nèi)鏡和病理診斷的臨床分析[D]. 隋曉艷.大連醫(yī)科大學(xué) 2012



本文編號：3382995