目的本論文旨在探究賴(lài)氨酸特異性去甲基化酶1（LSD1）與自噬體蛋白LC3在卵巢癌組織中的表達(dá)以及相互關(guān)系,并探討LSD1在人卵巢癌細(xì)胞自噬中的作用及其具體調(diào)控機(jī)制,為探尋卵巢癌發(fā)病機(jī)理及其分子靶向治療提供一種新的思路。方法1、利用生物信息學(xué),通過(guò)卵巢癌患者的癌癥基因組圖譜（TCGA）數(shù)據(jù)庫(kù)、Oncomine數(shù)據(jù)庫(kù)、Kaplan-Meier繪圖儀等分析軟件對(duì)卵巢癌組織中LSD1和LC3基因的表達(dá)進(jìn)行分析。2、通過(guò)基因表達(dá)譜交互分析（GEPIA）軟件對(duì)LSD1與LC3基因表達(dá)的相關(guān)性進(jìn)行分析。3、利用GST-LC3B pulldown實(shí)驗(yàn)檢測(cè)LSD1的SWIRM結(jié)構(gòu)域與卵巢癌細(xì)胞內(nèi)的自噬體蛋白LC3的相互作用。4、通過(guò)免疫熒光染色法檢測(cè)LSD1與LC3在卵巢癌細(xì)胞內(nèi)的定位情況。5、采用蛋白質(zhì)免疫共沉淀法檢測(cè)卵巢癌HO8910和SKOV3細(xì)胞內(nèi)LC3蛋白的甲基化水平,以及LSD1對(duì)LC3甲基化的影響。6、在蛋白合成抑制劑cycloheximide（CHX）處理?xiàng)l件下,采用免疫印跡法檢測(cè)LSD1敲低對(duì)LC3蛋白穩(wěn)定性的影響。7、在溶酶體抑制劑Chloroquine（CQ）或蛋白酶體抑制劑MG1... 

【文章來(lái)源】：江蘇大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：75 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

自噬過(guò)程模式圖[58]

賴(lài)氨酸特異性去甲基化酶1在卵巢癌細(xì)胞自噬中的作用機(jī)理研究4圖1.1自噬過(guò)程模式圖[58]Fig1.1Theautophagypatterndiagramshowsthestagesandmolecules圖1.2自噬體蛋白LC3的成熟過(guò)程[59]Figure1.2MaturationprocessofautophagosomeproteinLC3自噬是一把雙刃劍[60]，自噬既能在不利環(huán)境中維持腫瘤細(xì)胞存活，又能在腫瘤發(fā)展的不同階段抑制其發(fā)生和轉(zhuǎn)移[61]。自噬可能參與癌細(xì)胞的生存或死亡[62]。此外，自噬的正常調(diào)節(jié)有利于腫瘤抑制蛋白或者癌基因的表達(dá)[63]。mTOR和AMPK可以負(fù)調(diào)控抑癌因子，導(dǎo)致自噬的誘導(dǎo)和對(duì)癌變起始階段的抑制[64]。相反，mTOR、I類(lèi)PI3K和AKT可激活癌基因，從而抑制自噬，增強(qiáng)腫瘤形成[65]。

FIREHOSE分析LSD1(KDM1A)和LC3(MAP1LC3B)表達(dá)譜


本文編號(hào)：3377931