目的探討低強(qiáng)度超聲在誘導(dǎo)HeLa腫瘤細(xì)胞凋亡中的作用及其機(jī)制。方法將體外培養(yǎng)的HeLa腫瘤細(xì)胞根據(jù)超聲干預(yù)強(qiáng)度分為陰性對(duì)照組 （切斷電源后給予假的超聲干預(yù)）和0.5、1.3、2.0 W/cm²超聲干預(yù)組,分別通過MTT實(shí)驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞活力、存活率,HE染色檢測(cè)細(xì)胞形態(tài),細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定ROS含量及Western blot 實(shí)驗(yàn)檢測(cè)caspase-12、survivin和內(nèi)參蛋白β-actin的表達(dá)情況。多組間比較采用單因素方差分析,各個(gè)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組比較采用Dunnet-t檢驗(yàn)。結(jié)果與陰性對(duì)照組比較,0.5、1.3、2.0 W/ cm²超聲干預(yù)組的HeLa腫瘤細(xì)胞活力[（99.23±1.56）﹪比 （80.52±1.72）﹪、（54.31±1.69）﹪（27.75±1.26）﹪]、細(xì)胞存活率[（99.91±1.51）﹪比 （76.69±1.92）﹪、（52.57±1.63）﹪、（29.81±1.22）﹪]、survivin蛋白表達(dá) （51.19±0.21比43.46±0.34、25.28±0.29、18.32±0.3）均... 

【文章來源】：中華細(xì)胞與干細(xì)胞雜志(電子版). 2020,10(05)

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光學(xué)顯微鏡下觀察超聲干預(yù)對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響（蘇木精-伊紅染色，×40)

圖1 光學(xué)顯微鏡下觀察超聲干預(yù)對(duì)細(xì)胞形態(tài)的影響（蘇木精-伊紅染色，×40)表2 不同超聲強(qiáng)度干預(yù)對(duì)Hela腫瘤細(xì)胞中caspase-12蛋白和survivin蛋白表達(dá)水平的影響 分組 實(shí)驗(yàn)重復(fù)次數(shù) ROS含量 caspase-12蛋白 survivin蛋白 陰性對(duì)照組 3 11.21±0.45 13.05±0.21 51.19±0.21 0.5 W/cm2超聲干預(yù)組 3 24.34±1.23a 20.23±0.19a 43.46±0.34a 1.3 W/cm2超聲干預(yù)組 3 38.26±2.47a 33.17±0.32a 25.28±0.29a 2.0 W/cm2超聲干預(yù)組 3 52.18±1.56a 41.52±0.21a 18.32±0.31a F值 365.400 8634.002 8034.149 P值 ＜ 0.001 ＜ 0.001 ＜ 0.001注:與陰性對(duì)照組比較,aP < 0.05

表2 不同超聲強(qiáng)度干預(yù)對(duì)Hela腫瘤細(xì)胞中caspase-12蛋白和survivin蛋白表達(dá)水平的影響 分組 實(shí)驗(yàn)重復(fù)次數(shù) ROS含量 caspase-12蛋白 survivin蛋白 陰性對(duì)照組 3 11.21±0.45 13.05±0.21 51.19±0.21 0.5 W/cm2超聲干預(yù)組 3 24.34±1.23a 20.23±0.19a 43.46±0.34a 1.3 W/cm2超聲干預(yù)組 3 38.26±2.47a 33.17±0.32a 25.28±0.29a 2.0 W/cm2超聲干預(yù)組 3 52.18±1.56a 41.52±0.21a 18.32±0.31a F值 365.400 8634.002 8034.149 P值 ＜ 0.001 ＜ 0.001 ＜ 0.001注:與陰性對(duì)照組比較,aP < 0.05有報(bào)道顯示,caspase-12、survivin等與凋亡相關(guān)的蛋白在細(xì)胞凋亡中發(fā)生了巨大的作用[13-14]。caspase蛋白與細(xì)胞凋亡密切相關(guān),并且參與了細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化和凋亡的調(diào)節(jié),caspase家族成員有很多,其中caspase-1、caspase-4和caspase-11不直接參與凋亡信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo),它們主要是參與白介素前體的活化;而caspase-2,caspase-8,caspase-9和caspase-10在細(xì)胞凋亡的起始階段起作用,參與細(xì)胞凋亡執(zhí)行的則是caspase-3,caspase-6和caspase-7,其中caspase-3和7具有相近的底物和抑制劑特異性。前期研究表示,超聲誘導(dǎo)細(xì)胞后,caspase-12蛋白的表達(dá)隨著超聲強(qiáng)度的增大而增加,使得caspase-12蛋白得以穩(wěn)定表達(dá),caspase-12蛋白的激活間接激活了caspase-3蛋白的表達(dá),從而使細(xì)胞發(fā)生凋亡[15-16]。survivin是凋亡抑制劑家族的一員,是細(xì)胞增殖及細(xì)胞動(dòng)力學(xué)等生理功能的調(diào)節(jié)因子。它不僅參與抑制細(xì)胞凋亡、血管生成和應(yīng)激反應(yīng),而且參與組織穩(wěn)態(tài)和細(xì)胞再生能力。survivin具有高度的組織特異性,在結(jié)腸直腸癌和潰瘍性結(jié)腸炎中均有高表達(dá),是一種良好的診斷標(biāo)志物[17-18]。此前有多項(xiàng)研究表明,survivin通常在正常細(xì)胞中含量較低,但在許多實(shí)體癌和血癌中含量較高,survivin在癌癥中的表達(dá)會(huì)增強(qiáng),與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移增加有關(guān)。survivin作為線粒體相關(guān)凋亡的上游調(diào)控因子,表達(dá)survivin的內(nèi)皮細(xì)胞可降低caspase-7。由于survivin的特性,通常將其作為一種通過促進(jìn)細(xì)胞凋亡來治療癌癥的方法[19-20]。


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