研究背景:乳腺癌是世界范圍內常見的女性惡性腫瘤之一,位居我國女性惡性腫瘤發(fā)病率首位,已成為女性健康的重大威脅。在乳腺癌的死亡病例中,約90%源于乳腺癌的轉移。因此,鑒定驅動乳腺癌增殖和轉移的關鍵分子網絡將有助于我們深入理解乳腺癌發(fā)生發(fā)展的分子機制,為乳腺癌篩查和治療靶點的選擇提供科學依據(jù)。黏連蛋白（Cohesin）是一種進化上保守的多亞基復合物,能夠維持姐妹染色單體黏附,參與同源重組DNA修復,調節(jié)基因組的穩(wěn)定性。近年來發(fā)現(xiàn)Cohesin在多種癌癥中表達失調。RAD21作為Cohesin的核心亞基,能夠調節(jié)Cohesin與染色質的結合或解離。越來越多的研究證實RAD21基因可能是導致乳腺癌的驅動基因之一,Rad21既可以介導染色質高級結構形成,也可以作為轉錄輔因子參與調控MFC、CD44、HOXA 7和TGFB1等多個腫瘤相關的關鍵基因表達,進而促進腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。作為Hippo信號通路重要的下游效應分子,轉錄共激活因子YAP（Yes-associated protein）在調控腫瘤細胞的增殖、轉移和化療耐藥等方面具有重要作用。然而關于“YAP在乳腺癌發(fā)生中的作用”是富有爭議的,既有... 

【文章來源】：山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?Ｃｏｈｅｓｉｎ各亞基在ＴＣＧＡ浸潤性乳腺癌中的表達情況??２．?ＲＡＤ２１患

ｏｎ（ｓ）?ｉｎ?Ｑｕｅｒｙ?Ｇｅｎｅ（ｓ）?１３７４?７６５?１６７．９３３３３３３??圖２?ＲＡＤ２１商表達的乳腺癌患者預后差??３．?ＲＡＤ２１在乳腺癌組織中的表達情況??我們對收集到的８例乳腺癌患者腫瘤組織病理切片進行了?ＲＡＤ２１免疫組化??分析，初步結果表明ＲＡＤ２１在乳腺癌組織的細胞核中高表達，而在癌旁組織中??表達較低。??Ｐａｒａｃａｎｃｅｒｏｕｓ?ｔｉｓｓｕｅ?Ｂｒｅａｓｔ?ｃａｎｃｅｒ?ｔｉｓｓｕｅ??．??．ｖ．?．??，繼變??？－Ｍ??圖３?ＲＡＤ２１在乳腺癌組織中高表達??４．?ＲＡＤ２１在乳腺癌細胞系中的表達情況??通過Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔｔｉｎｇ我們檢測了?Ｃｏｈｅｓｉｎ不同組分在多種的乳腺癌細胞中??的表達情況。如圖４所示，Ｃｏｈｅｓｉｎ組分ＲＡＤ２１、ＳＴＡＧ２和ＳＭＣ１Ａ在乳腺癌細??４２??

－１０Ａ，其中ＲＡＤ２１在不同乳腺癌細??胞系中的變化最明顯。與正常的乳腺細胞系ＭＣＦ－１０Ａ相比，ＲＡＤ２１在乳腺癌??細胞中的表達較高；與上皮樣乳腺癌細胞系ＭＣＦ－７、Ｔ４７Ｄ相比，ＲＡＤ２１在三??陰性乳腺癌細胞ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８、ＢＴ５４９中表達較高。??＾?，??／?／?／?￡??—ｍｒｎｒｎｍ?ｍａｍ?ｍｔｍｍ?ＲＡＤ２１??細？＿？?ＳＴＡＧ２??？?—＾?■?一?－?一?ＳＭＣ１Ａ??ｒｎｔｍｍｍｍ?ａ－ｔｕｂｕｌｉｎ??圖４?ＲＡＤ２１在正常乳腺細胞和乳腺癌細胞系中的表達情況??二．ＲＡＤ２１對乳腺癌細胞增殖能力的影響??１．利用ｓｉＲＮＡｓ探宄ＲＡＤ２１對細胞增殖能力的影響??１．１靶向／Ｌ４Ｄ２Ｊ基因的ｓｉＲＮＡｓ??根據(jù)Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ公司提供的革Ｅ向ＲＡＤ２１的ｓｉＲＮＡｓ小干擾序列，我們選??擇了其中的?ＲＡＤ２１－５７９８、ＲＡＤ２１－５８０２、ＲＡＤ２１－５８０３?三個序列。在?ＭＤＡ－ＭＢ－??２３１細胞分別轉染這三個小干擾序列，通過ＲＴ－ｑＰＣＲ對ＲＡＤ２１的干擾效果進行??了檢測。我們發(fā)現(xiàn)ｓｉＲＡＤ２１－５８０３干擾效率最高，敲低效率約９８％。在ＭＤＡ－ＭＢ－??２３１和ＭＣＦ７細胞中的Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔｔｉｎｇ實驗同樣證明了?ｓｉＲＡＤ２１－５８０３能有效抑??制兄４Ｄ２７基因的表達。在后續(xù)實驗中我們都使用了該ｓｉＲＮＡ。??Ａ?＊…?Ｂ??｜?１５１???＇二??－?＋?－?＋?ｓｉ－ＲＡＤ２１??要?—?■?＊？？?？????—??Ｉ?圍?１０．??｜?ｇ?ｍｍｍ?ｍｍｍｍ?＾

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3354366