研究背景:乳腺癌是世界范圍內(nèi)常見的女性惡性腫瘤之一,位居我國女性惡性腫瘤發(fā)病率首位,已成為女性健康的重大威脅。在乳腺癌的死亡病例中,約90%源于乳腺癌的轉(zhuǎn)移。因此,鑒定驅(qū)動乳腺癌增殖和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵分子網(wǎng)絡(luò)將有助于我們深入理解乳腺癌發(fā)生發(fā)展的分子機制,為乳腺癌篩查和治療靶點的選擇提供科學依據(jù)。黏連蛋白（Cohesin）是一種進化上保守的多亞基復(fù)合物,能夠維持姐妹染色單體黏附,參與同源重組DNA修復(fù),調(diào)節(jié)基因組的穩(wěn)定性。近年來發(fā)現(xiàn)Cohesin在多種癌癥中表達失調(diào)。RAD21作為Cohesin的核心亞基,能夠調(diào)節(jié)Cohesin與染色質(zhì)的結(jié)合或解離。越來越多的研究證實RAD21基因可能是導致乳腺癌的驅(qū)動基因之一,Rad21既可以介導染色質(zhì)高級結(jié)構(gòu)形成,也可以作為轉(zhuǎn)錄輔因子參與調(diào)控MFC、CD44、HOXA 7和TGFB1等多個腫瘤相關(guān)的關(guān)鍵基因表達,進而促進腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。作為Hippo信號通路重要的下游效應(yīng)分子,轉(zhuǎn)錄共激活因子YAP（Yes-associated protein）在調(diào)控腫瘤細胞的增殖、轉(zhuǎn)移和化療耐藥等方面具有重要作用。然而關(guān)于“YAP在乳腺癌發(fā)生中的作用”是富有爭議的,既有... 

【文章來源】：山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?Ｃｏｈｅｓｉｎ各亞基在ＴＣＧＡ浸潤性乳腺癌中的表達情況??２．?ＲＡＤ２１患

ｏｎ（ｓ）?ｉｎ?Ｑｕｅｒｙ?Ｇｅｎｅ（ｓ）?１３７４?７６５?１６７．９３３３３３３??圖２?ＲＡＤ２１商表達的乳腺癌患者預(yù)后差??３．?ＲＡＤ２１在乳腺癌組織中的表達情況??我們對收集到的８例乳腺癌患者腫瘤組織病理切片進行了?ＲＡＤ２１免疫組化??分析，初步結(jié)果表明ＲＡＤ２１在乳腺癌組織的細胞核中高表達，而在癌旁組織中??表達較低。??Ｐａｒａｃａｎｃｅｒｏｕｓ?ｔｉｓｓｕｅ?Ｂｒｅａｓｔ?ｃａｎｃｅｒ?ｔｉｓｓｕｅ??．??．ｖ．?．??，繼變??？－Ｍ??圖３?ＲＡＤ２１在乳腺癌組織中高表達??４．?ＲＡＤ２１在乳腺癌細胞系中的表達情況??通過Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔｔｉｎｇ我們檢測了?Ｃｏｈｅｓｉｎ不同組分在多種的乳腺癌細胞中??的表達情況。如圖４所示，Ｃｏｈｅｓｉｎ組分ＲＡＤ２１、ＳＴＡＧ２和ＳＭＣ１Ａ在乳腺癌細??４２??

－１０Ａ，其中ＲＡＤ２１在不同乳腺癌細??胞系中的變化最明顯。與正常的乳腺細胞系ＭＣＦ－１０Ａ相比，ＲＡＤ２１在乳腺癌??細胞中的表達較高；與上皮樣乳腺癌細胞系ＭＣＦ－７、Ｔ４７Ｄ相比，ＲＡＤ２１在三??陰性乳腺癌細胞ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８、ＢＴ５４９中表達較高。??＾?，??／?／?／?￡??—ｍｒｎｒｎｍ?ｍａｍ?ｍｔｍｍ?ＲＡＤ２１??細？＿？?ＳＴＡＧ２??？?—＾?■?一?－?一?ＳＭＣ１Ａ??ｒｎｔｍｍｍｍ?ａ－ｔｕｂｕｌｉｎ??圖４?ＲＡＤ２１在正常乳腺細胞和乳腺癌細胞系中的表達情況??二．ＲＡＤ２１對乳腺癌細胞增殖能力的影響??１．利用ｓｉＲＮＡｓ探宄ＲＡＤ２１對細胞增殖能力的影響??１．１靶向／Ｌ４Ｄ２Ｊ基因的ｓｉＲＮＡｓ??根據(jù)Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ公司提供的革Ｅ向ＲＡＤ２１的ｓｉＲＮＡｓ小干擾序列，我們選??擇了其中的?ＲＡＤ２１－５７９８、ＲＡＤ２１－５８０２、ＲＡＤ２１－５８０３?三個序列。在?ＭＤＡ－ＭＢ－??２３１細胞分別轉(zhuǎn)染這三個小干擾序列，通過ＲＴ－ｑＰＣＲ對ＲＡＤ２１的干擾效果進行??了檢測。我們發(fā)現(xiàn)ｓｉＲＡＤ２１－５８０３干擾效率最高，敲低效率約９８％。在ＭＤＡ－ＭＢ－??２３１和ＭＣＦ７細胞中的Ｗｅｓｔｅｒｎ?Ｂｌｏｔｔｉｎｇ實驗同樣證明了?ｓｉＲＡＤ２１－５８０３能有效抑??制兄４Ｄ２７基因的表達。在后續(xù)實驗中我們都使用了該ｓｉＲＮＡ。??Ａ?＊…?Ｂ??｜?１５１???＇二??－?＋?－?＋?ｓｉ－ＲＡＤ２１??要?—?■?＊？？?？????—??Ｉ?圍?１０．??｜?ｇ?ｍｍｍ?ｍｍｍｍ?＾

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3354366