NO供體SIN-1對口腔鱗癌細胞SCC-25的影響
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【摘要】:目的通過外源性的一氧化氮刺激,對口腔鱗狀細胞癌細胞觀察其電鏡下的改變,細胞毒性的測試、通過超螺旋敏感定量PCR(ss-qPCR)測定線粒體DNA(mtDNA)結(jié)構(gòu)的改變的研究,為因氮化應(yīng)激引發(fā)的口腔癌的預防和治療提供新的輔助方法。方法選用口腔癌中發(fā)病率較高,惡性程度比較強的口腔鱗狀細胞癌scc-25細胞株作為實驗模型,以不同濃度的SIN-1誘導細胞出現(xiàn)RNS反應(yīng),觀察SIN-1在0.5mM,1mM,1.5mM,2mM劑量組,分別刺激時間為15min,1h,3h,6h,12h,24h,48h,72h時對細胞的影響,采用超螺旋敏感PCR檢測新技術(shù)分析mtDNA損傷情況和拷貝數(shù)的變化情況。采用MTT方法檢測細胞的活性。結(jié)果與沒加任何刺激的口腔鱗狀細胞癌細胞相比在SIN-1為0.5mM刺激時幾乎沒有反應(yīng);在1mM,1.5mM的濃度下連續(xù)性的刺激細胞,細胞在電鏡下觀察形態(tài)上沒有發(fā)生明顯的變化,在mtDNA的損傷程度上有了些許的變化,但隨著時間的延長mtDNA的損傷程度有了恢復,但拷貝數(shù)降低說明細胞有了不可逆的損傷;而在2mM的刺激下,細胞有了明顯的形態(tài)改變,mtDNA的損傷程度有明顯的統(tǒng)計學意義,并且mtDNA的拷貝數(shù)有明顯的降低現(xiàn)象。結(jié)論本實驗通過外源性的氮化刺激,誘導出口腔鱗狀細胞癌細胞出現(xiàn)氧化損傷產(chǎn)生氮化應(yīng)激反應(yīng),在刺激持續(xù)加強的作用下造成mtDNA的損傷和拷貝數(shù)的動態(tài)變化。同時結(jié)合細胞的活性檢測的結(jié)果分析說明,口腔鱗狀細胞癌細胞對氧化損傷比較敏感,而氧化損傷是致癌的主要因素,將對口腔鱗狀細胞癌的早期發(fā)現(xiàn)提供新的方向。
【關(guān)鍵詞】:一氧化氮 活性氮 氧化損傷 線粒體DNA損傷 超螺旋敏感定量PCR
【學位授予單位】:錦州醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R739.85
【目錄】:
- 中文論著摘要4-5
- 英文論著摘要5-7
- 英文縮略語表7-8
- 前言8-9
- 實驗材料與方法9-16
- 結(jié)果16-23
- 討論23-24
- 結(jié)論24-25
- 本研究創(chuàng)新性的自我評價25-26
- 參考文獻26-28
- 附錄28-37
- 一、文獻綜述 一氧化氮在口腔癌癥中的研究進展28-34
- 參考文獻31-34
- 二、在學期間科研成績34-35
- 三、致謝35-36
- 四、個人簡歷36-37
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本文關(guān)鍵詞:NO供體SIN-1對口腔鱗癌細胞SCC-25的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號:332239
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