發(fā)布時(shí)間：2021-06-17 23:59

　　目的和背景:食管癌是一種常見(jiàn)的消化道惡性腫瘤,其發(fā)病率位于全球惡性腫瘤發(fā)病率的第八位,死亡率位于第六位。在食管癌進(jìn)展過(guò)程中,許多信號(hào)通路中的激酶發(fā)生變化并進(jìn)行調(diào)節(jié)。90-kDa核糖體S6激酶（RSK1-4）是絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶家族,參與轉(zhuǎn)錄、翻譯、細(xì)胞周期調(diào)控和細(xì)胞存活。RSK的表達(dá)和激活在乳腺癌、前列腺癌和肺癌等多種惡性腫瘤中均存在失調(diào),RSK已被報(bào)道可能是一種有前途的癌癥治療靶點(diǎn)。SL0101及其類似物等是已報(bào)道的RSK抑制劑,雖然他們?cè)谌橄侔┲芯哂猩L(zhǎng)抑制作用但是在非小細(xì)胞肺癌中也被證明具有促進(jìn)侵襲的作用。因此,尋找更有效的RSK抑制劑仍然十分重要。已有研究表明,醌類化合物具有抗皰疹、抗登革熱和抗腫瘤等多種藥理活性。拉帕醇又名黃鐘花醌,最初是從南美洲的天然產(chǎn)物的TabebuliaAvellanedae中提取出來(lái),屬于萘醌類化合物并且具有抗炎、抗病毒和抗癌的作用。有研究報(bào)道拉帕醇通過(guò)靶向丙酮酸激酶M2（PKM2）抑制黑色素瘤細(xì)胞的生長(zhǎng),拉帕醇通過(guò)靶向DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ和Ⅱ抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)。然而,拉帕醇在食管鱗狀細(xì)胞癌（Esophageal squamous cell car... 

【文章來(lái)源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?（Ａ）拉帕醇的化學(xué)結(jié)構(gòu)式

?實(shí)驗(yàn)結(jié)果???Ｄ??ｓｈＣｏｎｔｒｏｌ?ｓｈＲＳＫ２＃３?ｓｈＲＳＫ２＃４??ＫＹＳＥ４５０?ｐｉ：．：．．．．．．－．．．．．．．．．．．．?￣??ｉ?云除＇°?ｌ．??？ｍｍ???－??＊?［ｆｉｈｉｉｎｉｉｉｉｉ－－?．．?＊?ｒ?－?１??Ｏ知??〇?＝?１２０?１??８０：?■??ｆｌ＞?°?Ｔ??ｆｌ?ＬＪＩＨＬＪＢＭＬ－ＩＨＩ＿＿??ｚ?ｕ??ｓｈＲＳＫ２?．?＃３?＃４??ｓｈＣｏｎｔｒｏｌ?ｓｈＲＳＫ２＃３?ｓｈＲＳＫ２＃４??ＫＹＳＥ５１０?ｐ？－｜?—￣ｍｍ??ｉｆ?＿＿ＬＪ??８＝１２０！??�。�。：?■?＊?＊??■?Ｊｉｉ．．．＿．．．．．．．．．．??ｓｈＲＳＫ２?■?＃３?＃４??圖２核糖體Ｓ６激酶是ＥＳＣＣ的一個(gè)治療靶點(diǎn)。（Ａ）磷酸化ＲＳＫ在食管細(xì)胞和食管鱗??癌細(xì)胞系中的表達(dá)。鋪細(xì)胞并孵育４８ｈ，?Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ實(shí)驗(yàn)檢測(cè)ＲＳＫ、ｐ－ＲＳＫ和ｐ－ＨｉｓｔｏｎｅＨ３??的表達(dá)。（Ｂ）下調(diào)ＲＳＫ２之后對(duì)ＲＳＫ信號(hào)通路的影響。建立ｓｈＲＳＫ２細(xì)胞系，然后Ｗｅｓｔｅｒｎ??ｂｌｏｔ實(shí)驗(yàn)檢測(cè)ＲＳＫ２及其下游蛋白分子的表達(dá)。（Ｃ和Ｄ）敲低ＲＳＫ２抑制ＥＳＣＣ細(xì)胞的生??長(zhǎng)。細(xì)胞生長(zhǎng)通過(guò)ＭＴＴ和ｓｏｆｔａｇａｒ?qū)嶒?yàn)檢測(cè)。數(shù)據(jù)的均值和方差來(lái)自三次獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)，＊表??示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ｐ＜〇．〇５）。條帶的灰度值，通過(guò)Ｉｍａｇｅ?Ｊ軟件計(jì)算。??ｓｈＣｏｎｔｒｏｌ?＋?－?－?？?－??ｓｈＲＳＫ２?？?＃１?＃２?＃３?＃４??ＲＳＫ２?｜??＾－Ａｃｔｉｎ?ｊ??２６??

）?－?１０?２０?Ｌａｐａｃｈｏｌ?（｜ｘＭ）?？?１０?２０??Ｃｙｃｌｉｎ?Ｂ１?丨?＿?Ｉ—？?鑛］?ＣＤＫ２?釋馬??ｒ〇?０：９?０．５?Ｊ?＇?１．ｃｆ—：一＂ｌ．１?＇…０．７—Ｊ??—匿憂—Ｄ?ｓ圓曙＜??１．０?０．８?０．２?１．０?１．２?１．６??Ｃｙｃｌｉｎ?Ｄ１?個(gè)?Ｐ＾Ｓｔ〇％＾?｜?一?一?二??１．０?１．０?０．Ｓ??ｐ（？ｉＤ６Ｋ〇）?ｐ－Ａｃｔｉｎ?ｉ?丨丨丨：：二’??１．０?０．８?０．２?１．０?１．０?１．０??圖３拉帕醇抑制食管鱗癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。（Ａ）拉帕醇對(duì)ＥＳＣＣ細(xì)胞株錨定依賴性生長(zhǎng)的作??用。ＫＹＳＥ３０、ＫＹＳＥ４５０和ＫＹＳＥ５１０細(xì)胞處理不同劑量的拉帕醇４８ｈ，?５７０ｎｍ測(cè)細(xì)胞的吸??光度，檢測(cè)細(xì)胞的生長(zhǎng)。（Ｂ）拉帕醇對(duì)細(xì)胞錨定非依賴性生長(zhǎng)的抑制作用。ＫＹＳＥ４５０和??ＫＹＳＥ５１０細(xì)胞給予不同劑量的拉帕醇，處理時(shí)間兩周。用顯微鏡拍照和Ｉｍａｇｅ－Ｐｒｏ?ＰＬＵＳ軟??件計(jì)算克隆的數(shù)量。（Ｃ）拉帕醇對(duì)細(xì)胞周期蛋白的影響。ＫＹＳＥ３０細(xì)胞用不同劑量的拉帕醇??處理４８?ｈ，并且用含有２％血清的培養(yǎng)基。Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ檢測(cè)周期蛋白。所有數(shù)據(jù)均以平均值??士標(biāo)準(zhǔn)差表示，每個(gè)實(shí)驗(yàn)都有三份重復(fù)樣本。＊代表差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義＜１９．０５）。條帶的灰??度值，通過(guò)Ｉｍａｇｅ?Ｊ軟件計(jì)算。??３．４拉帕醇對(duì)ＥＳＣＣ細(xì)胞株生長(zhǎng)的抑制作用依賴于ＲＳＫ２的表達(dá)??為了探索拉帕醇對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用，是否依賴于ＲＳＫ２蛋白的表達(dá)。??ｓｈＲＳＫ２＃４和ｓｈＣｏｎｔｒｏｌ細(xì)胞分別處理不同劑量的拉帕醇４８?ｈ，ＭＴＴ實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)??胞的生長(zhǎng)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，


本文編號(hào)：3236165