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H19調(diào)控的腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞促進(jìn)肝細(xì)胞肝癌侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制探

發(fā)布時(shí)間:2021-04-20 06:54
  目的:探討活化的腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞(Tumor-associnated macrophages,TAMs)對(duì)肝細(xì)胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)侵襲轉(zhuǎn)移和干性特征的影響,并進(jìn)一步探討其潛在的分子機(jī)制。方法:生物信息學(xué)分析64例HCC基因芯片信息,探討局部分化抗原群68(Cluster of Differentiation 68,CD68)陽(yáng)性(CD68+)TAMs的浸潤(rùn)和Long non-coding RNA H19(H19)的相關(guān)性及H19與miR193b和MAPK之間的相關(guān)性。隨機(jī)選取64例經(jīng)部分肝切除術(shù)治療的HCC患者石蠟組織切片標(biāo)本,同時(shí)收集患者的臨床病理資料,利用免疫組織化學(xué)技術(shù)(Immunohistochemical,IHC)檢測(cè)CD68和CD163、神經(jīng)細(xì)胞型鈣黏蛋白(N-cadherin)、上皮型鈣黏蛋白(E-cadherin)和β-連接素(β-catenin)的表達(dá),分析H19的表達(dá)和CD68,CD163及上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相關(guān)蛋白表達(dá)的相關(guān)性,同時(shí)分析H19表達(dá)和... 

【文章來(lái)源】:天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:91 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、 H19參與腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞促進(jìn)HCC侵襲轉(zhuǎn)移
    1.1 對(duì)象和方法
        1.1.1 病例及標(biāo)本來(lái)源
        1.1.2 細(xì)胞系
        1.1.3 免疫組織化學(xué)染色試劑
        1.1.4 細(xì)胞培養(yǎng)試劑
        1.1.5 細(xì)胞功能實(shí)驗(yàn)試劑
        1.1.6 熒光實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)試劑
        1.1.7 細(xì)胞成球?qū)嶒?yàn)試劑
        1.1.8 流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗(yàn)試劑
        1.1.9 質(zhì)粒擴(kuò)增、提取和轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
        1.1.10 芯片檢測(cè)試劑
        1.1.11 人基因組U133基因芯片檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
        1.1.12 免疫組化染色實(shí)驗(yàn)操作流程及結(jié)果判定
        1.1.13 實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)
        1.1.14 平板克隆實(shí)驗(yàn)
        1.1.15 AnnexinV凋亡實(shí)驗(yàn)
        1.1.16 劃痕修復(fù)實(shí)驗(yàn)
        1.1.17 Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)
        1.1.18 流式細(xì)胞術(shù)
        1.1.19 體外成球?qū)嶒?yàn)
        1.1.20 質(zhì)粒擴(kuò)增、提取和轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 生物信息學(xué)分析H19與TAMs浸潤(rùn)之間的相關(guān)性
        1.2.2 在HCC組織中H19與TAMs浸潤(rùn)、EMT和臨床病理指標(biāo)之間的相關(guān)性
        1.2.3 活化的TAMs對(duì)HCC細(xì)胞H19表達(dá)的影響
        1.2.4 活化的TAMs對(duì)HCC細(xì)胞增殖和凋亡的影響
        1.2.5 活活化的TAMs對(duì)HCC細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的影響
        1.2.6 活化的TAMs對(duì)HCC干性特征的影響
        1.2.7 HCC細(xì)胞高表達(dá)H19后對(duì)其侵襲轉(zhuǎn)移和干性的影響
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、H19介導(dǎo)的TAMs促進(jìn)HCC細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制探討
    2.1 對(duì)象和方法
        2.1.1 細(xì)胞系
        2.1.2 細(xì)胞培養(yǎng)試劑
        2.1.3 熒光實(shí)時(shí)定量PCR實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.4 WesternBlot實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.5 芯片檢測(cè)試劑
        2.1.6 熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)試劑
        2.1.7 人基因組U133基因芯片檢測(cè)試驗(yàn)
        2.1.8 實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)
        2.1.9 WesternBlot
        2.1.10 熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 生物信息學(xué)分析提示H19-miR193b-MAPK調(diào)節(jié)軸的存在
        2.2.2 活化的TAMs對(duì)HCC中miR193b及其下游靶基因的影響……
        2.2.3 H19高表達(dá)對(duì)HCC細(xì)胞miR193b及其下游靶基因的影響……
        2.2.4 熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)證實(shí)H19-miR193b-MAPK調(diào)節(jié)軸的存在
        2.2.5 活化的TAMs對(duì)HCCEMT發(fā)生的影響
        2.2.6 活化的TAMs對(duì)HCC干性基因轉(zhuǎn)錄的影響
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
附錄
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào):3149201

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