【目的】研究蛋白酶體抑制劑MG132對急性T淋巴細(xì)胞白血�。═-ALL）細(xì)胞株的作用及其機(jī)制�！痉椒ā繉⒉煌瑵舛鹊腗G132作用于T-ALL細(xì)胞株CCRF-CEM,MTS技術(shù)檢測細(xì)胞增殖、流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞凋亡。用q RT-PCR、Western blotting分別從RNA及蛋白水平檢測FOXO3a及其下游Puma的表達(dá)。利用慢病毒干擾技術(shù)構(gòu)建FOXO3a-sh RNA穩(wěn)定細(xì)胞株,再次驗證MG132對其作用�！窘Y(jié)果】MG132對CCRF-CEM細(xì)胞起抑制增殖、促進(jìn)凋亡作用,而對健康人外周血單個核細(xì)胞增殖抑制作用較弱。MG132作用于CCRF-CEM細(xì)胞后:FOXO3a的m RNA表達(dá)水平無明顯改變,Puma的m RNA表達(dá)明顯上升;細(xì)胞中FOXO3a及Puma蛋白表達(dá)量增加;其中胞核中FOXO3a蛋白表達(dá)量上升明顯,胞漿中亦略有上升。FOXO3a sh RNA干擾后:CCRF-CEM細(xì)胞的FOXO3a及Puma蛋白表達(dá)均下降;MG132的細(xì)胞增殖抑制作用減弱�！窘Y(jié)論】MG132能夠抑制T-ALL細(xì)胞株CCRF-CEM增殖,誘導(dǎo)其凋亡,其機(jī)制與抑制泛素-蛋白酶體對FOXO3a的降解、... 

【文章來源】：中山大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)科學(xué)版). 2017,38(02)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料、試劑與儀器
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞活性檢測
        1.2.2 凋亡檢測
        1.2.3 RNA的提取
        1.2.4 Western blot
        1.2.5 慢病毒感染
    1.3 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 MG132抑制CCRF-CEM細(xì)胞的增殖
    2.2 MG132促進(jìn)CCRF-CEM細(xì)胞凋亡
    2.3 MG132處理CCRF-CEM細(xì)胞后FOXO3a及Puma m RNA的變化
    2.4 MG132對CCRF-CEM細(xì)胞FOXO3a、Puma蛋白表達(dá)的影響
    2.5 敲低FOXO3a后,FOXO3a及Puma的表達(dá)減低
    2.6 FOXO3a敲低的細(xì)胞對MG132敏感性下降
3 討論



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