目的:1.探討miR-17-92家族成員之一—miR-19a在人多發(fā)性骨髓瘤（Multiple myeloma,MM）細(xì)胞株LP-1和U266中的表達(dá)情況。2.研究miR-19a對多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株LP-1和U266的增殖、侵襲、凋亡等生物學(xué)行為的影響。3.探討miR-19a在多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞中負(fù)向調(diào)控PTEN的機制及對PTEN/AKT/p AKT相關(guān)通路蛋白的調(diào)控作用。方法:1.RT-PCR檢測多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株LP-1和U266中miR-19a的表達(dá)情況;2.CCK8檢測miR19a對多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株LP-1和U266增殖的影響;3.Transwell方法測miR-19a對多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株LP-1和U266侵襲影響;4.采用Anexin V-FITC/PI流式細(xì)胞儀檢測miR-19a對多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株LP-1和U266凋亡的影響;5.RT-PCR檢測miR-19a對多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株LP-1和U266凋亡、耐藥相關(guān)關(guān)鍵調(diào)控基因bcl-2和mdr-1的影響;6.Western檢測miR-19a對多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株LP-1和U266凋亡、耐藥相關(guān)關(guān)鍵調(diào)控蛋白BCL-2和MDR-1... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

骨髓瘤Lp-1和U266細(xì)胞中miR-19a的表達(dá)情況及轉(zhuǎn)染效率

圖 2 骨髓瘤 Lp-1 和 U266 細(xì)胞中 miR-19a 的表達(dá)情況及轉(zhuǎn)染效率1.3.2 miR-19a 促進(jìn)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株 LP-1 和 U266 的增殖LP-1 和 U266 骨髓瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)染 miR-19a 0、24、48、72h 后，經(jīng) CCK-8 實驗測取 OD 值以反應(yīng)細(xì)胞增值率，結(jié)果顯示 miR-19a 促進(jìn)多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株 LP-1（p=0.0363）和 U266（p=0.0482）的增殖（圖 3）。

圖 4 轉(zhuǎn)染 miR-19a 對骨髓瘤 Lp-1 和 U266 細(xì)胞侵襲的影響1.3.4 miR-19a 抑制多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞株 LP-1 和 U266 的凋亡hsa-miR-19a mimic 和 hsa-miR-19a mimic NC 處理 Lp-1 和 U266 細(xì)胞 48h 后，用 anexinV FITC/PI 檢測細(xì)胞凋亡。結(jié)果顯示 hsa-miR-19a mimic 處理后兩組細(xì)胞凋亡率明顯低于 hsa-miR-19a mimic NC (Lp-1: 凋亡率 14.9±0.7% vs 25.6±1.2%，P＜0.05；U266: 31.3±1.7% vs 41.2±2.3%，P＜0.05）（圖 5、6）。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3146175