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YY1/miR-186/ZHX1調(diào)控胰腺癌侵襲和增殖的機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2021-04-09 23:43
  目的ZHX1(zinc finger and homeobox 1)是ZHX家族(ZHX1,ZHX2,ZHX3)的一員,很有可能扮演轉(zhuǎn)錄抑制因子的作用。有研究表明ZHX1在癌癥的發(fā)展過(guò)程發(fā)揮重要的作用,如胃癌,肝癌,膽管癌,腎癌等。但是關(guān)于ZHX1在胰腺癌中的相關(guān)研究暫未有報(bào)道。在本研究中,我們探討ZHX1在胰腺癌中的表達(dá)、功能以及相關(guān)機(jī)制。方法(1)利用IHC(免疫組織化學(xué)法)檢測(cè)ZHX1在53對(duì)胰腺癌組織和對(duì)應(yīng)非癌組織中的定位及表達(dá),分析ZHX1的表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系;利用免疫熒光法(IF)檢測(cè)ZHX1在胰腺癌細(xì)胞中的表達(dá)部位;(2)利用RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄聚合酶聯(lián)反應(yīng))和Western blot(蛋白印跡實(shí)驗(yàn))檢測(cè)ZHX1在胰腺癌細(xì)胞株SW1990,CFPAC-1,Patu8988,PL45,和Panc-1中的表達(dá)情況,分別用si RNA-ZHX1轉(zhuǎn)染胰腺癌細(xì)胞株靶向沉默ZHX1的表達(dá),用ZHX1過(guò)表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至胰腺癌細(xì)胞株,利用RT-PCR和Western blot確認(rèn)si RNA沉默及質(zhì)粒過(guò)表達(dá)ZHX1的效率;(3)下調(diào)及上調(diào)ZHX1表達(dá)后,利用細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)、劃痕實(shí)驗(yàn)、平... 

【文章來(lái)源】:蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】:64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

YY1/miR-186/ZHX1調(diào)控胰腺癌侵襲和增殖的機(jī)制研究


胰腺癌5年生存率和中位生存時(shí)間(引自Hartwig,TheLancetOncology,2013[4])

胰腺癌,免疫組化檢測(cè),陽(yáng)性率


圖 1 胰腺癌及非癌胰腺組織 ZHX-1 的表達(dá)(IHC,X200,X400) 1 免疫組化檢測(cè) ZHX1 蛋白在胰腺癌和非癌胰腺組織中的表例數(shù) 陽(yáng)性例數(shù) 陽(yáng)性率 χ2織 53 14 26.4%27.549 織 53 41 77.3%表 2 胰腺癌中 ZHX1 的表達(dá)與臨床病理因素的關(guān)系ZHX1 的表達(dá)素 例數(shù) 陽(yáng)性 陰性 28 6 2225 8 17歲)

表達(dá)水平,計(jì)量資料


十、統(tǒng)計(jì)處理采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理, 計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,組間比較采用單因素方差分析。P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié) 果一、ZHX1 在胰腺癌細(xì)胞中的表達(dá)和定位在 5 個(gè)胰腺癌細(xì)胞株(SW1990,CFPAC-1,Patu8988,PL45,和 PANC-1)中,我們通過(guò) RT-PCR 和 Western blot 實(shí)驗(yàn)分別在 mRNA 和蛋白水平檢測(cè) ZHX1 的表達(dá)。結(jié)果顯示,ZHX1 在 Patu8988 細(xì)胞中表達(dá)水平最高,在 CFPAC-1 中 ZHX1 表達(dá)水平最低(圖 1,圖 3)。因此,我們選用 Patu8988 和 CFPAC-1 細(xì)胞株進(jìn)行后續(xù)的細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)。在胰腺癌細(xì)胞株 Patu8988 中,免疫熒光實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明 ZHX1 主要在細(xì)胞核中表達(dá),并在細(xì)胞質(zhì)中略微表達(dá)(圖 2),與第一部分胰腺癌組織免疫組化的結(jié)果相一致。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]胰腺癌危險(xiǎn)因素的研究進(jìn)展[J]. 王濱.  職業(yè)與健康. 2017(21)
[2]PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路在腫瘤中的研究進(jìn)展[J]. 肖亮,殷小成.  現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2016(12)
[3]ZHX2與腫瘤的相關(guān)性研究[J]. 付世杰,郭慶河.  國(guó)際腫瘤學(xué)雜志. 2013 (12)
[4]Notch信號(hào)通路與腫瘤研究[J]. 劉兆國(guó),朱智杰,周梁,田超,王愛(ài)云,陳文星,鄭仕中,陸茵.  中國(guó)藥理學(xué)通報(bào). 2012(08)
[5]胰腺癌發(fā)病分子機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 葉爾買(mǎi)克,張明鑫,王健生.  北京聯(lián)合大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2010(03)
[6]腫瘤轉(zhuǎn)移研究的現(xiàn)狀與趨勢(shì)[J]. 齊菲菲,賀福初,姜穎.  生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展. 2009(10)
[7]真核生物轉(zhuǎn)錄因子及其研究方法進(jìn)展[J]. 張娜,尹繼剛,孫高超,陳啟軍.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2009(01)
[8]miRNA的生物學(xué)特性和功能[J]. 俞焙秦,劉炳亞.  上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2007(05)

博士論文
[1]轉(zhuǎn)錄因子和microRNA組成的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的生物信息學(xué)分析[D]. 蘇乃芳.北京大學(xué) 2013

碩士論文
[1]肝細(xì)胞癌組織HK-Ⅱ表達(dá)對(duì)評(píng)估患者預(yù)后的價(jià)值[D]. 陳賀.大連醫(yī)科大學(xué) 2014



本文編號(hào):3128522

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