目的:研究在肝癌中RMP（RPB5 Mediating Protein）介導(dǎo)的DNA損傷修復(fù)及其分子機制。方法:1、肝癌細胞以及肝正常細胞經(jīng)60Coγ射線處理后,Real-time PCR和Western blot檢測RMP的mRNA和蛋白表達水平。2、通過Real-time PCR檢測各細胞株輻照后不同時間點Rad50、Mre11和Ku70的mRNA表達水平。3、通過Western blot檢測各細胞株輻照后不同時間點Rad50、Mre11、Ku70、ATM、p-ATM、p65、p-p65、AKT、p-AKT、IκB的蛋白表達水平。4、通過免疫共沉淀實驗檢測RMP與Mre11的相互作用。5、通過Western blot檢測瞬時轉(zhuǎn)染不同劑量RMP過表達質(zhì)粒pCDNA3.1-RMPo的HepG2細胞中p65、p-p65、IκB的蛋白表達水平。6、通過Western blot檢測ATM抑制劑Ku55933處理后各細胞株p65入核情況。7、通過Western blot檢測NFκB磷酸化抑制劑Bay 11-7082處理后各細胞株中p65和p-p65的蛋白表達水平。8、通過彗星電泳實驗檢測NFκ... 

【文章來源】：蘇州大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
引言
材料與方法
    1 材料
    2 主要儀器設(shè)備
    3 實驗方法
實驗結(jié)果
    1 肝癌細胞系（HepG2、SMMC-7721）和肝正常細胞系（QSG-7701、HL-7702）輻照之后不同時間點RMP基因的mRNA表達量
    2 肝癌細胞系（HepG2、SMMC-7721）和肝正常細胞系（QSG-7701、HL-7702）輻照之后不同時間點RMP基因的蛋白表達水平
    3 檢測RMP對DNA損傷修復(fù)相關(guān)基因mRNA表達量的影響
    4 檢測RMP對DNA損傷修復(fù)相關(guān)基因蛋白表達量的影響
    5 RMP與Mre11蛋白的相互作用情況
    6 RMP表達對ATM表達量及其磷酸化水平的影響
    7 RMP表達對p65表達量及其磷酸化水平的影響
    8 RMP表達量的不同對p65磷酸化水平的影響
    9 抑制劑Ku55933抑制p65入核
    10 檢測Bay 11-7082對肝癌細胞內(nèi)p-p65蛋白表達的影響
    11 抑制劑Bay 11-7082抑制RMP對肝癌細胞DNA損傷修復(fù)的促進作用
    12 RMP、p-ATM、p-p65在臨床病例中的表達
結(jié)論
討論
參考文獻
綜述：關(guān)于DNA雙鏈損傷修復(fù)信號通路的研究
    參考文獻
展望
本文受下列資金資助
縮略詞表
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]原發(fā)性肝癌放射治療進展[J]. 代麗,趙恒芳,劉孜.  胃腸病學(xué). 2008(11)
[2]腫瘤細胞放射敏感性與放射誘導(dǎo)凋亡關(guān)系的研究[J]. 鐘軍,熊戴群,羅輝,陳文學(xué).  實用癌癥雜志. 2007(06)



本文編號：3127000